期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
金鱼HSC70和HSP40基因克隆及其原核表达
被引量：
1
1
作者
金新萍
谢倩
+1 位作者
吕斌
曹诣斌
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期367-374,共8页
【目的】克隆金鱼热激同源蛋白70(HSC70)和热休克蛋白(HSP40)基因,构建原核表达载体并通过IPTG诱导表达获得目的蛋白,明确HSC70和HSP40蛋白的生物学功能,为揭示金鱼的高温应答机制打下基础。【方法】提取金鱼鳃组织总RNA,利用RT-PCR扩...
【目的】克隆金鱼热激同源蛋白70(HSC70)和热休克蛋白(HSP40)基因,构建原核表达载体并通过IPTG诱导表达获得目的蛋白,明确HSC70和HSP40蛋白的生物学功能,为揭示金鱼的高温应答机制打下基础。【方法】提取金鱼鳃组织总RNA,利用RT-PCR扩增金鱼HSC70和HSP40基因,将目的基因片段克隆至线性空表达载体p ET-32a上构建原核表达载体p ET-32a-HSC70和p ET-32a-HSP40,转化大肠杆菌Rosetta表达菌株后用IPTG进行诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting检测分析表达获得的融合蛋白。【结果】金鱼HSC70基因CDS序列全长1950 bp,编码650个氨基酸;金鱼HSP40基因CDS序列全长996 bp,编码332个氨基酸。金鱼HSC70氨基酸序列与斑马鱼、人类、家鼠、金线鲃和草鱼的相似度分别为96.28%、95.50%、95.35%、98.15%和98.61%;HSP40氨基酸序列与斑马鱼的完全一致(相似度100.00%),与普通鲤鱼、金线鲃、人类和家鼠的相似度均为94.12%。原核诱导表达获得的融合蛋白TrxHSC70和Trx-HSP40为可溶性表达,其大小约91.5和55.0 k D,均能与Anti-Trx抗体发生特异性反应。【结论】HSC70和HSP40蛋白在鱼类及哺乳动物中高度保守,经原核诱导表达获得的金鱼融合蛋白Trx-HSC70和Trx-HSP40为可溶性表达,且携带有Trx标签,能与Anti-Trx抗体发生特异性反应,可作为互作蛋白用于RNA pull down试验。
展开更多
关键词
金鱼
HSC70基因
hsp
40
基因
克隆
原核
表达
载体
在线阅读
下载PDF
职称材料
禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的克隆和表达
被引量：
2
2
作者
任红玉
谢芝勋
+9 位作者
谢丽基
王盛
黄娇玲
邓显文
谢志勤
罗思思
曾婷婷
张艳芳
范晴
张民秀
《中国动物检疫》
CAS
2020年第3期92-97,共6页
本研究参照GenBank中编码禽源热休克蛋白HSP70、HSP40和核糖体蛋白RL4等的基因序列,分别设计特异性引物,采用RT-PCR扩增HSP70、HSP40和RPL4基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-HSP70、pEF1α-Myc-HSP4...
本研究参照GenBank中编码禽源热休克蛋白HSP70、HSP40和核糖体蛋白RL4等的基因序列,分别设计特异性引物,采用RT-PCR扩增HSP70、HSP40和RPL4基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-HSP70、pEF1α-Myc-HSP40和pEF1α-Myc-RPL4;将构建好的重组质粒,转染HEK293T细胞后,采用间接免疫荧光和Western-blot技术,对目的蛋白进行验证。结果表明,Myc-HSP70、Myc-HSP40和Myc-RPL4融合蛋白在HEK293T细胞内得到了正确表达。本研究为后续禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的功能研究奠定了基础。
展开更多
关键词
hsp
70基因
hsp
40
基因
RPL4基因
禽源
克隆
和
表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
二氯喹啉酸诱导稗草EcDnaJ基因表达
被引量：
1
3
作者
李岗
王强
+3 位作者
蔡磊明
吴声敢
赵学平
吴长兴
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期853-860,共8页
DnaJ作为分子伴侣在植物抗逆中起重要作用．但目前在二氯喹啉酸逆境下，其在抗药性稗草中表达特点却鲜有报道．本研究采用RACE技术从抗二氯喹啉酸稗草中克隆了1个DnaJ基因，命名为EcDnaJl（GenBank登录号：JX518598），其cDNA全长为215...
DnaJ作为分子伴侣在植物抗逆中起重要作用．但目前在二氯喹啉酸逆境下，其在抗药性稗草中表达特点却鲜有报道．本研究采用RACE技术从抗二氯喹啉酸稗草中克隆了1个DnaJ基因，命名为EcDnaJl（GenBank登录号：JX518598），其cDNA全长为2154bp，开放阅读框为1350bp．编码449个氨基酸，理论分子量为48．4kD，等电点为9．5．该蛋白质氮端含有1个保守的J结构域，中部含有4个模式为CxxCxGxG的锌指结构．Real—timePCR分别测定EcDnaJl在二氯喹啉酸抗性和敏感的稗草生物型苗期叶、根及成株期根、茎、叶和种子中的表达，在感、抗生物型的相对表达量分别是0．8～20．9和7．4～30．2，其中在抗性稗草苗期叶片中相对表达量最高为30．2，而在敏感稗草种子中最低为0．8，抗性稗草是敏感稗草的1．4～9．2倍．受二氯喹啉酸诱导后，其在感、抗稗草的相对表达量分别为35．8～72．5和84．9～261．9，在抗性稗草苗期叶片中相对表达量最高为261．9，而在敏感稗草的种子中相对表达量最低为35．8，抗性稗草是敏感稗草的2．4～3．6倍．诱导前后，无论是在苗期根和叶中还是成株期的根、茎、叶和种子中，EcDnaJl表达量均是抗性稗草高于敏感稗草．抗、感稗草生物型的EcDnaJl在mRNA水平差异表达暗示，它可能参与了稗草对二氯喹啉酸的抗药性．
展开更多
关键词
抗药性稗草
二氯喹啉酸诱导基因
dnaj
(
hsp
40
)
克隆与
表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
金鱼HSC70和HSP40基因克隆及其原核表达
被引量：
1
1
作者
金新萍
谢倩
吕斌
曹诣斌
机构
浙江师范大学化学与生命科学学院
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期367-374,共8页
基金
国家自然科学基金项目(KJZKJY13088)
文摘
【目的】克隆金鱼热激同源蛋白70(HSC70)和热休克蛋白(HSP40)基因,构建原核表达载体并通过IPTG诱导表达获得目的蛋白,明确HSC70和HSP40蛋白的生物学功能,为揭示金鱼的高温应答机制打下基础。【方法】提取金鱼鳃组织总RNA,利用RT-PCR扩增金鱼HSC70和HSP40基因,将目的基因片段克隆至线性空表达载体p ET-32a上构建原核表达载体p ET-32a-HSC70和p ET-32a-HSP40,转化大肠杆菌Rosetta表达菌株后用IPTG进行诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting检测分析表达获得的融合蛋白。【结果】金鱼HSC70基因CDS序列全长1950 bp,编码650个氨基酸;金鱼HSP40基因CDS序列全长996 bp,编码332个氨基酸。金鱼HSC70氨基酸序列与斑马鱼、人类、家鼠、金线鲃和草鱼的相似度分别为96.28%、95.50%、95.35%、98.15%和98.61%;HSP40氨基酸序列与斑马鱼的完全一致(相似度100.00%),与普通鲤鱼、金线鲃、人类和家鼠的相似度均为94.12%。原核诱导表达获得的融合蛋白TrxHSC70和Trx-HSP40为可溶性表达,其大小约91.5和55.0 k D,均能与Anti-Trx抗体发生特异性反应。【结论】HSC70和HSP40蛋白在鱼类及哺乳动物中高度保守,经原核诱导表达获得的金鱼融合蛋白Trx-HSC70和Trx-HSP40为可溶性表达,且携带有Trx标签,能与Anti-Trx抗体发生特异性反应,可作为互作蛋白用于RNA pull down试验。
关键词
金鱼
HSC70基因
hsp
40
基因
克隆
原核
表达
载体
Keywords
goldfish
gene HSC70
gene
hsp
40
clone
prokaryotic expression vector
分类号
S965.811 [农业科学—水产养殖]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的克隆和表达
被引量：
2
2
作者
任红玉
谢芝勋
谢丽基
王盛
黄娇玲
邓显文
谢志勤
罗思思
曾婷婷
张艳芳
范晴
张民秀
机构
广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室
出处
《中国动物检疫》
CAS
2020年第3期92-97,共6页
基金
国家自然科学基金项目（31660715）
广西科技专项（AA17204057,AD17195083）
+1 种基金
“广西八桂学者”专项（2019-79）
国家“万人计划”领军人才专项（W02060083）
文摘
本研究参照GenBank中编码禽源热休克蛋白HSP70、HSP40和核糖体蛋白RL4等的基因序列,分别设计特异性引物,采用RT-PCR扩增HSP70、HSP40和RPL4基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-HSP70、pEF1α-Myc-HSP40和pEF1α-Myc-RPL4;将构建好的重组质粒,转染HEK293T细胞后,采用间接免疫荧光和Western-blot技术,对目的蛋白进行验证。结果表明,Myc-HSP70、Myc-HSP40和Myc-RPL4融合蛋白在HEK293T细胞内得到了正确表达。本研究为后续禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的功能研究奠定了基础。
关键词
hsp
70基因
hsp
40
基因
RPL4基因
禽源
克隆
和
表达
Keywords
hsp
70 gene
hsp
40
gene
RPL4 gene
cloning and expression
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
二氯喹啉酸诱导稗草EcDnaJ基因表达
被引量：
1
3
作者
李岗
王强
蔡磊明
吴声敢
赵学平
吴长兴
机构
省部共建国家重点实验室培育基地"浙江省植物有害生物防控重点实验室"农业部农药残留检测重点实验室浙江省农业科学院农产品质量标准研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期853-860,共8页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划,No.2011AA100806)
浙江省自然科学基金(No.LY13C140007)
+1 种基金
浙江省农科院创新提升工程项目(No.2009R19Y01D04)
浙江省农科院博士启动经费项目~~
文摘
DnaJ作为分子伴侣在植物抗逆中起重要作用．但目前在二氯喹啉酸逆境下，其在抗药性稗草中表达特点却鲜有报道．本研究采用RACE技术从抗二氯喹啉酸稗草中克隆了1个DnaJ基因，命名为EcDnaJl（GenBank登录号：JX518598），其cDNA全长为2154bp，开放阅读框为1350bp．编码449个氨基酸，理论分子量为48．4kD，等电点为9．5．该蛋白质氮端含有1个保守的J结构域，中部含有4个模式为CxxCxGxG的锌指结构．Real—timePCR分别测定EcDnaJl在二氯喹啉酸抗性和敏感的稗草生物型苗期叶、根及成株期根、茎、叶和种子中的表达，在感、抗生物型的相对表达量分别是0．8～20．9和7．4～30．2，其中在抗性稗草苗期叶片中相对表达量最高为30．2，而在敏感稗草种子中最低为0．8，抗性稗草是敏感稗草的1．4～9．2倍．受二氯喹啉酸诱导后，其在感、抗稗草的相对表达量分别为35．8～72．5和84．9～261．9，在抗性稗草苗期叶片中相对表达量最高为261．9，而在敏感稗草的种子中相对表达量最低为35．8，抗性稗草是敏感稗草的2．4～3．6倍．诱导前后，无论是在苗期根和叶中还是成株期的根、茎、叶和种子中，EcDnaJl表达量均是抗性稗草高于敏感稗草．抗、感稗草生物型的EcDnaJl在mRNA水平差异表达暗示，它可能参与了稗草对二氯喹啉酸的抗药性．
关键词
抗药性稗草
二氯喹啉酸诱导基因
dnaj
(
hsp
40
)
克隆与
表达
Keywords
quinclorac-resistant barnyardgrass
quinclorac-induced gene
cloning and expression of
dnaj
（
hsp
40
）
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金鱼HSC70和HSP40基因克隆及其原核表达
金新萍
谢倩
吕斌
曹诣斌
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的克隆和表达
任红玉
谢芝勋
谢丽基
王盛
黄娇玲
邓显文
谢志勤
罗思思
曾婷婷
张艳芳
范晴
张民秀
《中国动物检疫》
CAS
2020
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
二氯喹啉酸诱导稗草EcDnaJ基因表达
李岗
王强
蔡磊明
吴声敢
赵学平
吴长兴
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
