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LncRNA MALAT1通过调控miR-124-3p/IGF2BP1分子轴促进宫颈癌细胞增殖和转移 被引量:16
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作者 周莉 秦娟 陆安伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期182-189,共8页
目的:探讨lncRNA MALAT1通过调控miR-124-3p/IGF2BP1分子轴介导宫颈癌细胞增殖和转移的影响。方法:选取2014年4月至2017年12月在贵阳市妇幼保健院妇产科收治的、经手术切除的45例宫颈癌患者癌组织及相应癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系S... 目的:探讨lncRNA MALAT1通过调控miR-124-3p/IGF2BP1分子轴介导宫颈癌细胞增殖和转移的影响。方法:选取2014年4月至2017年12月在贵阳市妇幼保健院妇产科收治的、经手术切除的45例宫颈癌患者癌组织及相应癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系SiHa、Caski、HeLa和C33a,采用q PCR法检测癌组织和癌细胞系中MALAT1的表达水平。构建MALAT1敲降载体、miR-124-3p inhibitor及IGF2BP1过表达载体转染宫颈癌细胞,采用CCK-8、Transwell、Wb及免疫荧光实验探讨MALAT1或其敲降后通过miR-124-3p/IGF2BP1分子轴对宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响。采用双荧光素酶报告基因检测lnc RNA MALAT1、miR-124-3p及IGF2BP1的靶向调控关系。结果:MALAT1在宫颈癌组织和细胞系中高表达(P<0.05或P<0.01)。同时,敲降MALAT1显著抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实MALAT1靶向作用miR-124-3p并下调其表达水平,miR-124-3p可负调控IGF2BP1的表达。实验进一步证实敲降MALAT1通过靶向上调miR-124-3p对IGF2BP1的抑制作用,进而抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(P<0.05或P<0.01)。结论:lncRNA MALAT1通过下调miR-124-3p/IGF2BP1分子轴促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化,为临床宫颈癌早期诊断/治疗提供了潜在的分子靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 增殖 上皮间质转化 lncRNA MALAT1 miR-124-3p igf2BP1
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基质金属蛋白酶-3和Ⅰ型胶原α1链基因多态性对原发性冻结肩易感性的影响 被引量:6
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作者 陈文祥 包倪荣 +7 位作者 王艺颖 方益春 邱阳 郭耀曼 韦昌辉 钱洪 谢发荣 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第3期289-293,共5页
目的目前原发性冻结肩的病因及发病机制在基因及分子生物学领域的研究报道较少。文中旨在探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和I型胶原α1链(COL1A1)基因多态性对原发性冻结肩的易感性的影响。方法选择2016年1月至6月来南京军区南京总医院骨... 目的目前原发性冻结肩的病因及发病机制在基因及分子生物学领域的研究报道较少。文中旨在探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和I型胶原α1链(COL1A1)基因多态性对原发性冻结肩的易感性的影响。方法选择2016年1月至6月来南京军区南京总医院骨科就诊的42名原发性冻结肩患者为病例组,50名健康受试者作为对照组。对所有研究对象的MMP-3基因多态性rs679620及rs522616与COL1A1基因多态性rs1107946,分别进行基因型测定。结果 MMP-3多态性位点rs679620基因型分布与原发性冻结肩易感性无明显相关性(P>0.05)。等位基因A与G比较,差异有统计学意义(OR=0.54,95%CI:0.30~0.99,P=0.044)。COL1A1多态性位点rs1107946基因型及等位基因频率与原发性冻结肩易感性无明显相关性(P=0.994、0.920)。与隐性遗传模型GG相比,GT、TT和GT+TT差异无统计学意义;等位基因T与G比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MMP-3基因多态性rs679620等位基因A是原发性冻结肩发病的保护性因素。MMP-3基因多态性rs522616和COL1A1基因多态性rs1107946与原发性冻结肩易感性无关。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-3 型胶原α1 基因多态性 原发性冻结肩
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白术内酯Ⅰ对IL-1β诱导的关节软骨细胞炎性损伤的影响 被引量:2
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作者 张应鹏 王世金 亓峰 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1152-1156,共5页
目的探讨白术内酯I(Atractylenolide I,AT-I)对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的关节软骨细胞炎性损伤的影响。方法人关节软骨细胞来自武汉普诺赛生命科技有限公司。实验分6组:对照组(未处理)、模型组(10 ng/mL IL-1β)、A... 目的探讨白术内酯I(Atractylenolide I,AT-I)对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的关节软骨细胞炎性损伤的影响。方法人关节软骨细胞来自武汉普诺赛生命科技有限公司。实验分6组:对照组(未处理)、模型组(10 ng/mL IL-1β)、AT-I-L组(25μmol/L)、AT-I-M组(50μmol/L)、AT-I-H组(100μmol/L)、AT-I-H+740 Y-P组[100μmol/L AT-I与50μg/mL 740 Y-P磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)激活剂]。CCK-8法和流式细胞术分别测定增殖及凋亡;ELISA法测定上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;Western blot检测PI3K/蛋白激酶B(AKT)/核因子-κB(NF-κB)相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组OD450值(24、48 h)降低(P<0.05),TNF-α、IL-6表达、凋亡率、PI3K/AKT/NF-κB蛋白表达均升高(P<0.05)。与模型组对比,AT-I-L组OD450值(24、48 h)、TNF-α、IL-6表达、凋亡率、PI3K/AKT/NF-κB通路蛋白表达差异不显著(P>0.05),AT-I-M组、AT-I-H组OD450值(24 h、48 h)升高(P<0.05),TNF-α、IL-6表达、细胞凋亡率、PI3K/AKT/NF-κB通路蛋白表达均降低(P<0.05)。与AT-I-H组对比,AT-I-H+740 Y-P组OD450值(24、48 h)降低(P<0.05),TNF-α、IL-6表达、凋亡率、PI3K/AKT/NF-κB通路蛋白表达均升高(P<0.05)。结论白术内酯Ⅰ改善IL-1β诱导的关节软骨细胞炎性损伤,其可能机制是促进软骨细胞增殖并抑制炎症反应、细胞凋亡和PI3K/AKT/NF-κB通路实现。 展开更多
关键词 白术内酯 关节软骨细胞 炎性损伤 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子-κB信号通路 白细胞介素-1Β
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杏六区中部葡Ⅰ1—3油层聚合物驱布井方式研究 被引量:3
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作者 胡伟 李璐 苏聪 《断块油气田》 CAS 2013年第1期67-70,共4页
杏六区中部在40多年的开发历程中,先后经历了基础井网、一次加密和二次加密调整。到2009年12月底,区块平均综合含水率为92.6%,处于特高含水期开采阶段。通过分析葡Ⅰ1—3油层动用状况和剩余油分布特征,提出了以该油层整体作为一套层系... 杏六区中部在40多年的开发历程中,先后经历了基础井网、一次加密和二次加密调整。到2009年12月底,区块平均综合含水率为92.6%,处于特高含水期开采阶段。通过分析葡Ⅰ1—3油层动用状况和剩余油分布特征,提出了以该油层整体作为一套层系、利用分注工艺降低层间影响的聚合物驱开发方式:聚合物驱注采井距保持在150 m或小于150 m的范围,在原一次加密调整井排和二次加密调整油井排间布一排注聚合物井,形成采出井和注入井排,排距为100 m,井排上井距为200 m,注采井距141 m的五点法面积井网。在此基础上,预测了开发效果和经济效益。该布井方式对类似油藏聚驱井网部署及调整具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 1-3油层 聚合物驱 油层动用 剩余油分布
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IGFBP-3在大鼠心肌纤维化和心肌成纤维细胞活化增殖中的表达 被引量:5
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作者 宋剑南 陶辉 +2 位作者 丁季飞 徐盛松 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期263-268,共6页
目的探究胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在大鼠心肌纤维化和心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的表达变化。方法用40只SD大鼠随机等分成模型组和对照组,模型组大鼠用皮下注射异丙肾上腺素的方式建立心肌组织纤维化模型,对照组注射等... 目的探究胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在大鼠心肌纤维化和心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖中的表达变化。方法用40只SD大鼠随机等分成模型组和对照组,模型组大鼠用皮下注射异丙肾上腺素的方式建立心肌组织纤维化模型,对照组注射等质的生理盐水。用转化生长因子β1(TGF-β1)刺激乳鼠CFs,使其增殖活化制备细胞模型作为模型组,对照组为未经任何刺激正常培养等时长的CFs。大鼠心肌组织纤维化模型运用HE和Masson染色检测病理变化,用CCK-8测定CFs增殖活化程度,分别用qRT-PCR、Western blot检测IGFBP-3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原前胶原A1(COL1A1)的mRNA和蛋白表达情况。结果与对照组比较,动物模型组中心肌组织胶原纤维增生,心肌细胞排列紊乱,细胞模型组中加入TGF-β1刺激后CFs增殖活化明显。在动物和细胞模型组中与对照组相比,IGFBP-3、α-SMA和COL1A1的蛋白和mRNA的表达显著增高。结论IGFBP-3在纤维化心肌和加入TGF-β1刺激后的CFs中表达明显升高,提示IGFBP-3在心肌纤维化病变过程中可能存在促进或抑制作用,有助于探索心肌纤维化的病理机制。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白-3 心肌纤维化 心肌成纤维细胞 型胶原 增殖 转化生长因子β1
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人胰岛素样生长因子-1甄核表达质粒的构建及其在成肌细胞中的表达 被引量:4
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作者 张鹏 陈世益 +1 位作者 陈疾忤 卫宏图 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期9-12,20,共5页
目的 :构建人胰岛素样生长因子 - 1(hIGF - 1)真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1并通过转染成肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用DNA重组方法将编码hIGF - 1cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(- )中 ,构建pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1真核... 目的 :构建人胰岛素样生长因子 - 1(hIGF - 1)真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1并通过转染成肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用DNA重组方法将编码hIGF - 1cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(- )中 ,构建pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1真核表达质粒 ;应用阳性脂质体介导的基因转染技术 ,将真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1瞬时转染C2C12成肌细胞中 ;采用RT -PCR及免疫组化染色等方法检测hIGF - 1基因在成肌细胞中的表达情况 ;应用MTT法检测转染后细胞上清液中hIGF - 1的生物活性。结果 :将构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1转染成肌细胞后 ,hIGF - 1mRNA及蛋白表达水平明显增高 ;转染后的成肌细胞培养上清液具有促使成纤维细胞增殖的生物活性。结论 :成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1,其转染成肌细胞后可获得较高水平hIGF - 1蛋白的表达 ,所表达出hIGF - 1蛋白具有生物学活性。 展开更多
关键词 igf-1 成肌细胞 真核表达质粒 转染 PCDNA3 人胰岛素样生长因子-1 蛋白 DNA重组 cDNA克隆 igf1
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截短型人胰岛素样生长因子-Ⅰ 在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 被引量:4
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作者 刘晓辉 梁述文 +2 位作者 王伟 申泉 郭焱 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期738-741,共4页
利用PCR、删除突变和基因重组技术构建了N端缺失3个氨基酸的人胰岛素样生长因子-[des(1-3)IGF-]的表达载体pExSec/IGF,在大肠杆菌蛋白酶缺陷株BL21(DE3)中,通过用IPTG于超常规的12℃低温诱导16h,des(1-3)IGF-获得了可溶性表达。表达水... 利用PCR、删除突变和基因重组技术构建了N端缺失3个氨基酸的人胰岛素样生长因子-[des(1-3)IGF-]的表达载体pExSec/IGF,在大肠杆菌蛋白酶缺陷株BL21(DE3)中,通过用IPTG于超常规的12℃低温诱导16h,des(1-3)IGF-获得了可溶性表达。表达水平达到可溶性细菌总蛋白约15%。经超滤和SephadexG-50凝胶过滤,des(1-3)IGF-纯度分别达到49%和82%,且表现出明显的免疫学活性和刺激Balb3T3细胞增殖的生物学活性。 展开更多
关键词 截短型 胰岛素样 生长因子 非融合表达 纯化
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DACT1对Ⅰ型卵巢癌恶性侵袭行为的影响 被引量:2
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作者 李若男 刘斌 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期2158-2163,共6页
目的探讨β-环连蛋白抑制基因1(dapper antagonist of catenin-1,DACT1)对Ⅰ型上皮性卵巢癌迁移侵袭能力的影响及可能机制。方法免疫组织化学检测Ⅰ型人卵巢癌临床组织中DACT1的表达;采用人黏液性卵巢癌细胞株3AO构建外源性转染DACT1的... 目的探讨β-环连蛋白抑制基因1(dapper antagonist of catenin-1,DACT1)对Ⅰ型上皮性卵巢癌迁移侵袭能力的影响及可能机制。方法免疫组织化学检测Ⅰ型人卵巢癌临床组织中DACT1的表达;采用人黏液性卵巢癌细胞株3AO构建外源性转染DACT1的稳转株,通过划痕实验、Transwell迁移及基质胶侵袭实验检测细胞运动能力;免疫荧光观察DACT1对细胞骨架重塑的影响。结果Ⅰ型卵巢癌组织中DACT1表达低于正常卵巢组织(P<0.01)。外源性转染DACT1后3AO细胞株迁移侵袭能力降低(P<0.01),且腹腔内成瘤能力有所下降,细胞骨架中特化膜结构减少。结论 DACT1对Ⅰ型卵巢癌浸润转移具有抑制效应,其在Ⅰ型卵巢癌组织中的低表达可能与其疾病发生相关。 展开更多
关键词 型卵巢癌 β-环连蛋白抑制基因1 卵巢癌细胞株3AO 迁移侵袭
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重组人截短型胰岛素样生长因子1在大肠杆菌中的高效表达 被引量:2
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作者 李莹 邓鸿业 +3 位作者 狄春辉 施群 韩文玲 马大龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期57-60,共4页
目的:建立人截短型胰岛素样生长因子1的原核高效表达系统。方法:利用基因重组技术将人截短型胰岛素样生长因子1〔Des(13)IGF1〕的cDNA片段克隆到融合蛋白表达载体pMTY4中,用离子交换层析法纯化蛋白并经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射免疫... 目的:建立人截短型胰岛素样生长因子1的原核高效表达系统。方法:利用基因重组技术将人截短型胰岛素样生长因子1〔Des(13)IGF1〕的cDNA片段克隆到融合蛋白表达载体pMTY4中,用离子交换层析法纯化蛋白并经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射免疫检测、N末端前16位氨基酸序列测定及生物活性检测等方法对所获蛋白进行了鉴定。结果:获得含人Des(13)IGF1基因的重组质粒,在大肠杆菌中高效表达出含凝血酶识别序列的MS2Des(13)IGF1融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化后纯化可获得与天然型一致的人Des(13)IGF1。结论:该方法是获得人重组Des(13)IGF1的有效途径,对进一步研究Des(13)IGF1有重要意义。 展开更多
关键词 大肠杆菌 igf1 融合蛋白 des(1-3)igf1
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重楼皂苷Ⅰ对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究 被引量:3
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作者 曹银利 孙亚洲 +2 位作者 崔清洋 何晓敬 唐成和 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第21期2583-2587,共5页
目的:探究重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法:将小鼠随机分为对照(Control)组、LPS组、PPⅠ5 mg/kg组、PPⅠ10 mg/kg组、PPⅠ20 mg/kg组和地塞米松(DEX)组,每组8只。PPⅠ各组小鼠灌胃相应剂量PP... 目的:探究重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法:将小鼠随机分为对照(Control)组、LPS组、PPⅠ5 mg/kg组、PPⅠ10 mg/kg组、PPⅠ20 mg/kg组和地塞米松(DEX)组,每组8只。PPⅠ各组小鼠灌胃相应剂量PPⅠ,DEX组灌胃2 mg/kg DEX,对照组灌胃生理盐水预处理7 d,鼻腔滴入LPS(5 mg/kg)建立小鼠ALI模型。24 h后处死小鼠,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),检测肺湿/干重(W/D)值;HE染色观察肺组织损伤情况并评分;检测BALF中总蛋白含量、白细胞和巨噬细胞数;试剂盒检测一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测小鼠肺组织中p38和AMPK的磷酸化及NLRP3、caspase-1、Nrf2和KEAP1的蛋白表达。结果:与对照组相比,LPS组小鼠肺组织发生病理性变化,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显升高(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著上调(P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著下调(P<0.01)。与LPS组比较,PPⅠ(10 mg/kg和20 mg/kg)和DEX减轻了LPS诱导的ALI,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显降低(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论:PPⅠ能够减轻LPS诱导的小鼠ALI,可能与p38-NLRP3/caspase-1和AMPK-Nrf2/KEAP1信号途径有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷 急性肺损伤 超氧化物歧化酶 肿瘤坏死因子-α p38-NLRP3/caspase-1
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均苯三甲酸银配合物的水热合成与表征
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作者 马烽 曹之敏 魏代宝 《山东科技大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第3期95-98,共4页
采用均苯三甲酸配体与AgNO3进行水热配位反应,合成了[Ag4(μ-Hbtc)(μ-H2btc)]n(H3btc=1,3,5-均苯三甲酸)配合物,并通过元素分析、红外分析、热分析、荧光光谱分析以及X射线单晶衍射等手段对其结构、组成与性质进行了表征。X-射线单晶... 采用均苯三甲酸配体与AgNO3进行水热配位反应,合成了[Ag4(μ-Hbtc)(μ-H2btc)]n(H3btc=1,3,5-均苯三甲酸)配合物,并通过元素分析、红外分析、热分析、荧光光谱分析以及X射线单晶衍射等手段对其结构、组成与性质进行了表征。X-射线单晶衍射结果表明,配合物属于正交晶系,Fddd空间群,通过不同类型相互作用的Ag-Ag键以及氢键形成具有三维结构的配合物。热重分析表明配合物在394℃开始发生分解。室温固态荧光测试显示,配合物在498nm处具有强的荧光发射。 展开更多
关键词 1 3 5-均苯三甲酸 Ag()配合物 水热合成 晶体结构 荧光性质
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二苯乙烯苷减轻小鼠急性脑缺血再灌注后的氧化应激损伤及其对自噬的影响 被引量:3
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作者 张奇龙 薛威 +3 位作者 徐博涵 唐虹 江勤 董六一 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1232-1236,共5页
目的 研究小鼠急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后二苯乙烯苷(TSG)对自噬作用的影响及其神经保护作用。方法 雄性昆明种小鼠100只,随机分为假手术组、模型组和TSG低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg)。采用双侧颈总动脉结扎法建立急性脑缺血再... 目的 研究小鼠急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后二苯乙烯苷(TSG)对自噬作用的影响及其神经保护作用。方法 雄性昆明种小鼠100只,随机分为假手术组、模型组和TSG低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg)。采用双侧颈总动脉结扎法建立急性脑缺血再灌注模型,缺血2 h再灌注24 h,于缺血和再灌注前尾静脉注射给药各1次。断头取脑检测脑组织含水量,采用试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量,HE染色检测小鼠脑组织病理变化,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白的表达。结果 与模型组比较,TSG组脑皮层神经元的病理性损伤较轻,神经元数量增加,形态改善,核固缩减轻;TSG中、高剂量组显著降低脑组织含水量及MDA的含量,并可显著升高血清中SOD活性(P <0. 01),TSG高剂量组亦可显著抑制自噬相关基因Atg6 (Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/Ⅰ)蛋白的表达(P <0. 05)。结论 TSG对小鼠急性CIRI具有很好的神经保护作用,作用机制可能与抑制CIRI中自噬激活有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 二苯乙烯苷 自噬 BECLIN1 LC3-Ⅱ/
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