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2型登革病毒ns1基因克隆及其表达产物的生物学特性研究
被引量：
2
1
作者
但妍
张娟
+2 位作者
张君
郑建
黄爱龙
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008年第2期168-171,共4页
目的克隆并表达2型登革病毒非结构蛋白ns1基因片段,初步鉴定重组蛋白的生物学特性。方法利用登革热2型病毒重组质粒,经PCR方法扩增出ns1全长基因片段,在pQE30表达系统中表达,表达产物用Ni柱亲和层析纯化后,用鼠抗登革病毒免疫血清对重...
目的克隆并表达2型登革病毒非结构蛋白ns1基因片段,初步鉴定重组蛋白的生物学特性。方法利用登革热2型病毒重组质粒,经PCR方法扩增出ns1全长基因片段,在pQE30表达系统中表达,表达产物用Ni柱亲和层析纯化后,用鼠抗登革病毒免疫血清对重组蛋白进行Western Blot及ELISA鉴定。结果构建的重组质粒pQE-30/NS1,pQE-30/NS1-N,pQE-30/NS1-80-200aa和pQE-30/NS1-C经IPTG诱导,重组蛋白高效表达并纯化成功,经Western Blot及ELISA证实重组蛋白可以被免疫血清特异识别。结论2型登革病毒结构蛋白表达载体在大肠杆菌SG13009中高效表达。纯化产物具有较强的免疫原性,为进一步研究NS1的生物学特性和血清学检测奠定了基础。
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关键词
登革病毒
非结构蛋白
克隆
原核表达
免疫原性
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职称材料
题名
2型登革病毒ns1基因克隆及其表达产物的生物学特性研究
被引量：
2
1
作者
但妍
张娟
张君
郑建
黄爱龙
机构
重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008年第2期168-171,共4页
文摘
目的克隆并表达2型登革病毒非结构蛋白ns1基因片段,初步鉴定重组蛋白的生物学特性。方法利用登革热2型病毒重组质粒,经PCR方法扩增出ns1全长基因片段,在pQE30表达系统中表达,表达产物用Ni柱亲和层析纯化后,用鼠抗登革病毒免疫血清对重组蛋白进行Western Blot及ELISA鉴定。结果构建的重组质粒pQE-30/NS1,pQE-30/NS1-N,pQE-30/NS1-80-200aa和pQE-30/NS1-C经IPTG诱导,重组蛋白高效表达并纯化成功,经Western Blot及ELISA证实重组蛋白可以被免疫血清特异识别。结论2型登革病毒结构蛋白表达载体在大肠杆菌SG13009中高效表达。纯化产物具有较强的免疫原性,为进一步研究NS1的生物学特性和血清学检测奠定了基础。
关键词
登革病毒
非结构蛋白
克隆
原核表达
免疫原性
Keywords
dengue virus nonstructural protein clone prokaryotic expression immunogenicity
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
2型登革病毒ns1基因克隆及其表达产物的生物学特性研究
但妍
张娟
张君
郑建
黄爱龙
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008
2
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