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白纹伊蚊C6/36细胞登革Ⅱ型病毒结合分子的筛选被引量：4: 1; 作者郑学礼雷子庆潘京《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1270-1273,共4页; 目的筛选白纹伊蚊C6／36细胞表达连接登革Ⅱ型病毒分子。方法提取C6／36细胞的总蛋白和膜蛋白，收集和纯化登革Ⅱ型病毒，用12％SDS．PAGE分析C6／36细胞的总蛋白和膜蛋白，转于硝纤膜上，用病毒覆盖蛋白结合实验（VOPBA）筛选C6／36细... 展开更多; 关键词白纹伊蚊C6/36细胞登革ⅱ型病毒结合分子筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

福建省1株登革Ⅱ型病毒的鉴定被引量：1: 2; 作者汪小瑛谢剑锋 +3 位作者吴冰珊蔡少健沈晓娜王美爱《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1180-1183,共4页; 目的对2005年福建省分离的1株登革病毒(DV)进行鉴定,并从分子水平追踪其可能的传染源。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测疑似登革热患者血清中DV(IgM、IgG抗体;同时应用C6/36细胞、单克隆抗体间接免疫荧光(McAb-IFA)、逆转录(套式PC... 展开更多; 关键词登革ⅱ病毒分离鉴定序列分析输入性; 在线阅读下载PDF 职称材料

从白纹伊蚊与致倦库蚊分离和鉴定可结合登革Ⅱ病毒的蛋白分子被引量：2: 3; 作者付宇姣郑学礼潘京《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期342-345,共4页; 目的筛选登革Ⅱ病毒(DENV-2)识别白纹伊蚊、致倦库蚊的连接分子。方法提取不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊的总蛋白,用SDS-12%PAGE进行分析,用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)筛选不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊表达连接DENV-2分子。结果 ... 展开更多; 关键词白纹伊蚊致倦库蚊登革ⅱ病毒受体分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

登革Ⅱ型病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定被引量：2: 4; 作者付宇姣郑学礼《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期425-428,共4页; 目的在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的第一,二结构域(DⅠ/Ⅱ)并进行免疫反应性鉴定。方法登革Ⅱ型病毒接种乳鼠,提取总RNA,经RT-PCR扩增目的基因片段。双酶切PCR纯化产物和质粒pET-28a(+)并连接构建重组质粒pET28a-DV2-E-D1... 展开更多; 关键词登革病毒 E蛋白第Ⅰ-ⅱ结构域表达免疫印迹; 在线阅读下载PDF 职称材料

白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞与登革病毒相互作用蛋白的筛选: 5; 作者潘京朱娉婷郑学礼《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期447-451,共5页; 目的筛选登革Ⅱ型病毒与白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中的连接分子。方法富集纯化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析提取的C6/36细胞膜蛋白和白纹伊蚊中肠组织总蛋白,将分离胶上的蛋白转于硝酸纤维素膜(PVDF)上,应用病毒覆盖蛋白结合试验(... 展开更多; 关键词登革病毒白纹伊蚊中肠 C6 36细胞受体分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

用斑点免疫结合法测定登革病毒单克隆抗体亲和力: 6; 作者姚海军曹虹郭辉玉《第一军医大学学报》 CSCD 1996年第4期323-324,共2页; 建立斑点免疫结合法（ＤＩＡ）测定抗体相对亲和力。用此法出定了登革病毒Ⅱ型非结构蛋白ＮＳ１四株单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的相对亲和力，４株ＭｃＡｂｓ对ＮＳ１的亲和力各不相同。按５０％最大结合浓度分析，抗体株６─１／Ｃ为０... 展开更多; 关键词单克隆抗体登革病毒ⅱ型亲和力斑点免疫结合试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名白纹伊蚊C6/36细胞登革Ⅱ型病毒结合分子的筛选被引量：4: 1; 作者郑学礼雷子庆潘京; 机构南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1270-1273,共4页; 基金国家自然科学基金(30872198 30972566)~~; 文摘目的筛选白纹伊蚊C6／36细胞表达连接登革Ⅱ型病毒分子。方法提取C6／36细胞的总蛋白和膜蛋白，收集和纯化登革Ⅱ型病毒，用12％SDS．PAGE分析C6／36细胞的总蛋白和膜蛋白，转于硝纤膜上，用病毒覆盖蛋白结合实验（VOPBA）筛选C6／36细胞表达连接登革Ⅱ型病毒分子。结果C6／36细胞的总蛋白和膜蛋白经12％SDS．PAGE分离后转膜，分别与纯化的病毒液和阴性对照液孵育，用抗登革病毒I～Ⅳ单克隆抗体检测，结果显示病毒孵育组在67000和30000的位置有特异性的条带出现，而阴性对照组无此条带。结论用VOPBA法初步从白纹伊蚊C6／36细胞中筛选67000和30000等登革Ⅱ型病毒结合分子，其功能的鉴定正在进行。; 关键词白纹伊蚊C6/36细胞登革ⅱ型病毒结合分子筛选; Keywords Aedes albopictus C6/36 cells dengue ⅱ virus virus binding molecules screening; 分类号 R383 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名福建省1株登革Ⅱ型病毒的鉴定被引量：1: 2; 作者汪小瑛谢剑锋吴冰珊蔡少健沈晓娜王美爱; 机构福建省疾病预防控制中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1180-1183,共4页; 文摘目的对2005年福建省分离的1株登革病毒(DV)进行鉴定,并从分子水平追踪其可能的传染源。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测疑似登革热患者血清中DV(IgM、IgG抗体;同时应用C6/36细胞、单克隆抗体间接免疫荧光(McAb-IFA)、逆转录(套式PCR法分别进行病毒的分离和鉴定,并对分离株的部分基因进行核苷酸序列分析。结果患者血清登革病毒特异性IgM抗体阳性、IgG抗体可疑,表明该患者在近期感染过登革病毒。患者血清接种C6/36细胞,观察到登革病毒特有的CPE。受感染的C6/36细胞能与登革病毒Ⅱ型单克隆抗体反应,表明分离的病毒株为登革Ⅱ型病毒。分离株的核酸提取物经RT(PCR扩增,登革病毒通用引物可扩增出511bp的特异性条带,型特异性引物扩增出119bp的特异性条带,进一步证实分离的病毒株为登革Ⅱ型病毒。分离株RT(PCR扩增产物的核苷酸序列与30株不同地域来源的登革Ⅱ型病毒相应序列构建的系统发生树表明,此毒株与东南亚地区的毒株比较接近。此次分离株的序列与1999年登革Ⅱ型病毒福建株的对应序列在亲缘关系上有一定程度距离。结合流行病学调查资料,进一步确定此病例为输入性感染病例。结论福建省首次从输入性登革热患者血清中分离出登革Ⅱ型病毒,该病毒来源于东南亚地区。; 关键词登革ⅱ病毒分离鉴定序列分析输入性; Keywords type ⅱ dengue virus isolation identification sequence analysis imported; 分类号 R373.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名从白纹伊蚊与致倦库蚊分离和鉴定可结合登革Ⅱ病毒的蛋白分子被引量：2: 3; 作者付宇姣郑学礼潘京; 机构南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期342-345,共4页; 基金国家自然科学基金(30872198 30972566)~~; 文摘目的筛选登革Ⅱ病毒(DENV-2)识别白纹伊蚊、致倦库蚊的连接分子。方法提取不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊的总蛋白,用SDS-12%PAGE进行分析,用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)筛选不同发育时期白纹伊蚊、致倦库蚊表达连接DENV-2分子。结果 VOPBA检测不同发育时期白纹伊蚊显示:幼虫样品的泳道可见到25 000、35 000、50 000的DEN-2结合分子,蛹样品的泳道可见到35 000、50 000分子,雄蚊样品可见到50 000分子,雌蚊样品中可见到35 000、50 000分子。DEN-2结合蚊35 000分子在白纹伊蚊幼虫、蛹及成蚊的雌蚊的三个阶段均存在,而雄蚊的成蚊则缺少这一分子。VOPBA检测不同发育时期致倦库蚊:幼虫样品可见100 000分子,蛹样品可见40、100 000分子,另外在50 000位置上下亦可见48 000、60 000左右的多个条带,雄蚊与雌蚊样品均见40 000、100 000分子。结论 35 000大小的蛋白分子分布与白纹伊蚊感染组织向性相关。; 关键词白纹伊蚊致倦库蚊登革ⅱ病毒受体分子; Keywords Aedes albopictus Culex. quinquefasciatus dengue ⅱ virus receptor molecule; 分类号 R184 [医药卫生—流行病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名登革Ⅱ型病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定被引量：2: 4; 作者付宇姣郑学礼; 机构南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期425-428,共4页; 基金国家自然科学基金(30872198 30972566)资助; 文摘目的在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的第一,二结构域(DⅠ/Ⅱ)并进行免疫反应性鉴定。方法登革Ⅱ型病毒接种乳鼠,提取总RNA,经RT-PCR扩增目的基因片段。双酶切PCR纯化产物和质粒pET-28a(+)并连接构建重组质粒pET28a-DV2-E-D1&2。筛选阳性菌落,提取质粒并转化感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白并进行SDS-PAGE分析,Western blot鉴定。结果 RT-PCR扩增得到约900bp的目的基因片段,双酶切及测序分析表明,插入序列正确且开放读码框正确。重组菌诱导后在37kD位置有明显的诱导后表达带,其大小与预测值一致。经12%SDS-PAGE分析,显示重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中;Western blot结果显示重组蛋白与His.Tag单抗和登革病毒单抗(D1-11)均发生反应。结论成功地在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的DⅠ/Ⅱ,免疫反应性鉴定结果表明其具有良好的免疫反应性。; 关键词登革病毒 E蛋白第Ⅰ-ⅱ结构域表达免疫印迹; Keywords dengue virus E proteinl domainⅠ/ⅱ expression immune imprinted; 分类号 R373.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞与登革病毒相互作用蛋白的筛选: 5; 作者潘京朱娉婷郑学礼; 机构南方医科大学病原生物学教研室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期447-451,共5页; 基金国家自然科学基金(No.30972566 81271880)资助~~; 文摘目的筛选登革Ⅱ型病毒与白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中的连接分子。方法富集纯化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析提取的C6/36细胞膜蛋白和白纹伊蚊中肠组织总蛋白,将分离胶上的蛋白转于硝酸纤维素膜(PVDF)上,应用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)方法筛选白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中表达连接登革Ⅱ型病毒的分子。结果白纹伊蚊中肠组织总蛋白经12%SDS-PAGE分离后转膜,分别与纯化的病毒液和阴性对照液孵育,用抗登革病毒单克隆抗体检测,结果显示病毒孵育组在分子量30kDa的位置有特异性的条带出现,而阴性对照组无此条带;用同样的方法筛选C6/36细胞上表达蛋白,病毒孵育组在分子量30kDa和40kDa的位置出现特异条带,而阴性对照组无。结论 VOPBA结果显示分子量为30kDa的分子在中肠组织与C6/36细胞中都能表达,具有连接登革Ⅱ型病毒的作用,对其氨基酸序列的鉴定和功能分析工作正在进行中。; 关键词登革病毒白纹伊蚊中肠 C6 36细胞受体分子; Keywords dengue ⅱ virus Aedes albopictus midgut tissue C6/36 cells binding molecules; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用斑点免疫结合法测定登革病毒单克隆抗体亲和力: 6; 作者姚海军曹虹郭辉玉; 机构第一军医大学微生物学教研室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 1996年第4期323-324,共2页; 文摘建立斑点免疫结合法（ＤＩＡ）测定抗体相对亲和力。用此法出定了登革病毒Ⅱ型非结构蛋白ＮＳ１四株单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的相对亲和力，４株ＭｃＡｂｓ对ＮＳ１的亲和力各不相同。按５０％最大结合浓度分析，抗体株６─１／Ｃ为０．０５μｇ／ｍｌ．１─７／Ｆ为０．６７μｇ／ｍｌ．５Ｄ为２５．００μｇ／ｍｌ，３─１１／Ｃ为５７．００μｇ／ｍｌ。以上结果为应用这些单克隆抗体提供了依据。同时，说明用ＤＩＡ法测定ＭｃＡｂ相对亲和力的可行性。; 关键词单克隆抗体登革病毒ⅱ型亲和力斑点免疫结合试验; Keywords monoclonal antibody dengue virtis ⅱ affinity dot immunobinding assay; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学] R373.33 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	白纹伊蚊C6/36细胞登革Ⅱ型病毒结合分子的筛选	郑学礼雷子庆潘京	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	福建省1株登革Ⅱ型病毒的鉴定	汪小瑛谢剑锋吴冰珊蔡少健沈晓娜王美爱	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	从白纹伊蚊与致倦库蚊分离和鉴定可结合登革Ⅱ病毒的蛋白分子	付宇姣郑学礼潘京	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	登革Ⅱ型病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定	付宇姣郑学礼	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞与登革病毒相互作用蛋白的筛选	潘京朱娉婷郑学礼	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	用斑点免疫结合法测定登革病毒单克隆抗体亲和力	姚海军曹虹郭辉玉	《第一军医大学学报》 CSCD	1996	0	在线阅读下载PDF 职称材料