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Heartbeat与Drbd在大容量OLT中的应用 被引量:2
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作者 王鹤 孙晓艳 《现代电子技术》 2012年第24期131-133,137,共4页
针对大容量OLT系统高可用性能的要求,以Heartbeat与Drbd结合为研究对象,使系统具有热备高可用的同时又具有同步文件的功能。在此讨论了Heartbeat与Drbd结合应用的基本原理及可行性,实现了其应用于大容量OLT的热备系统中,改进了切换的速... 针对大容量OLT系统高可用性能的要求,以Heartbeat与Drbd结合为研究对象,使系统具有热备高可用的同时又具有同步文件的功能。在此讨论了Heartbeat与Drbd结合应用的基本原理及可行性,实现了其应用于大容量OLT的热备系统中,改进了切换的速度,增加其稳定性。实际测试表明Heartbeat与Drbd能很好地应用于大容理OLT中,系统快速稳定,满足应用系统高可用性。并基于开源Linux-HA项目下的免费软件使得降低成本,使其拥有更高的市场竞争力。 展开更多
关键词 Linux-HA HEARTBEAT 大容量OLT drbd
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3TAT-DRBD融合蛋白的原核表达及其siRNA结合活性与穿膜功能的鉴定
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作者 刁艳君 刘家云 +2 位作者 马越云 苏明权 郝晓柯 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期201-206,共6页
目的:构建3TAT-DRBD重组载体,表达和纯化融合蛋白,并对其siRNA结合活性和穿膜功能进行初步验证。方法:采用基因合成技术获取靶基因3TAT-DRBD,并克隆到原核表达载体pET-44b中;用IPTG诱导融合蛋白表达,镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白,凝血... 目的:构建3TAT-DRBD重组载体,表达和纯化融合蛋白,并对其siRNA结合活性和穿膜功能进行初步验证。方法:采用基因合成技术获取靶基因3TAT-DRBD,并克隆到原核表达载体pET-44b中;用IPTG诱导融合蛋白表达,镍亲和凝胶层析柱纯化融合蛋白,凝血酶切除标签,Western blotting鉴定。凝胶迁移阻滞实验验证DRBD和siRNA的结合能力,激光共聚焦显微镜观察TAT的穿膜能力。结果:限制性酶切和基因测序表明重组质粒pET-44b-3TAT-DRBD构建成功;IPTG诱导后3TAT-DRBD融合蛋白(含Nus标签和S标签)在大肠杆菌中高效表达,可溶性蛋白占菌体总蛋白约80%;成功切除融合标签并纯化了无标签的融合蛋白,经Western blotting鉴定其相对分子质量约为17 000;凝胶迁移阻滞实验证明,融合蛋白3TAT-DRBD能有效结合靶向survivin基因的siRNA(survivin-siRNA);激光共聚焦显微镜下可见,在TAT的介导下survivin-siRNA穿透胞膜进入前列腺癌PC3细胞的效率明显增高。结论:成功表达并纯化了具有siRNA结合活性与穿膜功能的3TAT-DRBD融合蛋白,为进一步3TAT-DRBD的功能研究及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 TAT drbd 融合蛋白 SIRNA 前列腺癌 结合活性 穿膜功能
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