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178例肝细胞癌患者DNA甲基转移酶3A基因rs1550117位点多态性检测及意义
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作者 徐峰 叶青 +1 位作者 王静 杨永红 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第44期72-74,共3页
目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)基因rs1550117位点多态性与肝细胞癌发生的关系。方法采用Sequenom Mass Array质谱阵列技术,检测天津汉族人群178例肝细胞癌患者(观察组)及188例健康人(对照组)DNMT3A基因rs1550117位点多态性。结果观察... 目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)基因rs1550117位点多态性与肝细胞癌发生的关系。方法采用Sequenom Mass Array质谱阵列技术,检测天津汉族人群178例肝细胞癌患者(观察组)及188例健康人(对照组)DNMT3A基因rs1550117位点多态性。结果观察组DNMT3A基因rs1550117位点基因型AA、AG、GG频率分别为4.5%、36.0%、59.5%,等位基因G、A频率分别为81.3%、18.7%;对照组基因型AA、AG、GG频率分别为3.2%、29.4%、67.4%,等位基因G、A频率分别为83.8%、16.2%;两组比较P均>0.05。结论 DNMT3A基因rs1550117位点多态性与肝细胞癌的发生无明显关系。 展开更多
关键词 肝细胞癌 dna甲基转移酶3a 基因位点多态性
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结直肠癌患者DNA甲基转移酶3A、3B基因单核苷酸多态性观察 被引量:2
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作者 徐峰 张国梁 邹江 《山东医药》 CAS 2013年第11期15-18,共4页
目的观察结直肠癌(CRC)患者DNA甲基转移酶(DNMT)3A、3B基因单核苷酸多态性特点,为CRC发病机制的研究提供依据。方法对89例CRC患者(观察组)和94例体检健康者(对照组)的血液标本进行DNA提取,应用Sequenom MassArray质谱阵列分析技术对DNMT... 目的观察结直肠癌(CRC)患者DNA甲基转移酶(DNMT)3A、3B基因单核苷酸多态性特点,为CRC发病机制的研究提供依据。方法对89例CRC患者(观察组)和94例体检健康者(对照组)的血液标本进行DNA提取,应用Sequenom MassArray质谱阵列分析技术对DNMT3A rs1550117、rs13420827、rs11887120、rs13428812和DNMT3B rs6119954、rs4911259、rs4911107、rs1569686、rs2424908、rs2424932共10个单核苷酸多态性位点(SNPs)分析,判断各位点与CRC的关联。结果 DNMT3A的4个位点之间不存在紧密连锁,DNMT3B的6个位点相互间均呈强连锁不平衡(r2>0.8),形成的4种单体型中以TGTAGG和CATAGG为主,rs6119954和rs2424908的等位基因频率在观察组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CRC患者DNMT3B rs6119954和rs2424908的等位基因频率明显增高,此为CRC发病机制的研究提供了依据。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 直肠肿瘤 dna甲基转移 单核苷酸多态性
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DNA甲基化转移酶3A调控心肌成纤维细胞活化过程中胶原的表达
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作者 代晨 陶辉 +1 位作者 石开虎 徐盛松 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第12期1237-1241,共5页
目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试... 目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试剂分为5组:DNMT3A组(CFs转染重组的DNMT3A基因过表达质粒)、空载体组(CFs转染p EGFP-C3空载体质粒)、DNMT3A siRNA组(CFs转染小干扰DNMT3A siRNA)、DNMT3A siRNA NC组(CFs转染DNMT3A siRNA NC空载体质粒)、空白对照组(CFs不作转染处理)。ELISA检测空白对照组、DNMT3A组、DNMT3A siRNA组细胞上清液胶原变化。qRT-PCR检测5组相关mRNA的表达,Western blot法检测除DNMT3A siRNA NC组外其余4组CFs中ColⅠ、ColⅢ和DNMT3a蛋白的表达及CCK8法检测4组细胞的增殖活性。结果 DNMT3A组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原明显高于空白对照组(P<0.05),DNMT3A siRNA组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量明显低于空白对照组(P<0.05)。DNMT3A组的ColⅠ、ColⅢ及DNMT3A表达量较空白对照组、空载体组明显升高(P<0.05),而DNMT3A siRNA组明显低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。DNMT3A组细胞活力(2.087±0.317)明显高于空载体组(1.063±0.223)、空白对照组(1.082±0.207),差异有统计学意义(P<0.05); DNMT3A siRNA组(0.463±0.087)明显低于空载体组、空白对照组(P<0.05)。结论 DNMT3A可以促进CFs的活化增殖,并且能够增加胶原的表达,从而对心肌纤维化产生促进作用。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 dna甲基转移3a 增殖 ColⅠ ColⅢ
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全反式维甲酸促神经干细胞分化中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达
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作者 宣爱国 龙大宏 +2 位作者 王智明 陈艳 张文娟 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期922-925,共4页
目的:探讨全反式维甲酸体外促神经干细胞分化为神经元过程中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达变化。方法:0.5、1.0和4μmol/L全反式维甲酸诱导体外培养的鼠胚神经干细胞,免疫荧光检测NeuN和DAPI,计算各组NeuN/DAPI的比值... 目的:探讨全反式维甲酸体外促神经干细胞分化为神经元过程中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达变化。方法:0.5、1.0和4μmol/L全反式维甲酸诱导体外培养的鼠胚神经干细胞,免疫荧光检测NeuN和DAPI,计算各组NeuN/DAPI的比值,免疫印迹检测DNA甲基转移酶1以及乙酰化组蛋白H3表达水平。结果:免疫荧光结果显示给药组NeuN/DAPI比值显著高于对照组。药物浓度在1和4μmol/L时,DNA甲基转移酶1表达水平与对照组相比均显著降低,且有剂量依赖性;而在4μmol/L时,组蛋白H3乙酰化水平较对照组有显著增强。结论:全反式维甲酸促进神经干细胞向神经元的分化可能与DNA甲基转移酶1的表达抑制和组蛋白乙酰化水平增加有关。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 神经干细胞 dna甲基转移1 乙酰化组蛋白H3
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刺五加DNA甲基转移酶基因的适应性进化分析
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作者 赵雪蕾 董靖 +2 位作者 王硕 龙月红 邢朝斌 《华北理工大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第2期156-164,共9页
本研究以刺五加(Eleutherococcussenticosus)的DNA甲基转移酶(cytosine-5DNA methyltransferase,C5-MTase)基因为研究对象,探究其适应性进化的特征。在刺五加的基因组中共鉴定出11条C5-MTases序列,对其进行生物信息学分析和系统发育分析... 本研究以刺五加(Eleutherococcussenticosus)的DNA甲基转移酶(cytosine-5DNA methyltransferase,C5-MTase)基因为研究对象,探究其适应性进化的特征。在刺五加的基因组中共鉴定出11条C5-MTases序列,对其进行生物信息学分析和系统发育分析,并分别利用PAML软件的分支模型、位点模型、分支-位点模型以及MEC模型、SLAC(singlelikelihood ancestorcounting,SLAC)和FEL(fixed effects likelihood model,FEL)等方法对刺五加C5-MTases基因的选择位点进行检测。生物信息学分析结果表明刺五加C5-MTases的基因结构高度保守。系统发育分析结果显示,11条C5-MTases基因序列可分为CMT、MET和DNMT三大分支。适应性进化分析结果表明,纯净选择在刺五加C5-MTases基因的进化过程中占主导地位。 展开更多
关键词 刺五加 dna甲基转移 适应性进化
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miR-200b-3p与DNA甲基转移酶-3a在骨关节炎软骨细胞中的表达及作用机制 被引量:5
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作者 商安全 王微微 +2 位作者 陆文英 胡丽庆 李冬 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第8期617-623,共7页
目的探讨mi R-200b-3p靶向DNMT3A对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法 RT-PCR法检测mi R-200b-3p,DNMT3A,MMPs和COLⅡ在正常软骨组织和骨关节炎软骨组织中的表达;采用双荧光素酶和western bolt验证mi R-200b-3p和DNMT3A之间的靶... 目的探讨mi R-200b-3p靶向DNMT3A对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法 RT-PCR法检测mi R-200b-3p,DNMT3A,MMPs和COLⅡ在正常软骨组织和骨关节炎软骨组织中的表达;采用双荧光素酶和western bolt验证mi R-200b-3p和DNMT3A之间的靶向关系;构建过表达的mi R-200b-3p和DNMT3A真核细胞载体;q RT-PCR和western bolt检测MMPs和COLⅡm RNA及蛋白质在稳定转染的软骨细胞中的表达;通过细胞活力测定(MTS法)、团块培养、Hoechst 33342染色法评估细胞的增殖与凋亡情况。结果 q RT-PCR法及western bolt结果显示,mi R-200b-3p和COLⅡ在骨关节炎软骨组织中呈低表达,而DNMT3A和MMPs呈高表达;双荧光素酶和western bolt证实mi R-200b-3p和DNMT3A之间存在靶向关系;MTS法、团块培养及Hoechst 33342染色法结果证实,在mi R-200b-3p过表达的软骨细胞中,DNMT3A和MMPs的表达水平明显下调,COLⅡ的表达水平则明显上调,且细胞的生存能力增强,凋亡率降低(P均<0.05);在过表达DNMT3A的软骨细胞中,MMPs的表达水平明显上调,COLⅡ的表达水平明显下调,且细胞的生存能力减弱,凋亡率增加(P均<0.05)。结论 mi R-200b-3p可以抑制MMPs分泌和促进COLⅡ合成,并且可以通过抑制DNMT3A的表达来增强骨关节炎软骨细胞的生长与增殖。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 miR-200b-3p dna甲基转移-3a
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DNA甲基化转移酶1与2,3,7,8-四氯二苯并对二噁英诱导小鼠腭裂的相关性研究 被引量:1
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作者 李勇 张伟 +5 位作者 安莉 宋红权 张兴伟 高雨蔚 臧棨光 焦晓辉 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第2期129-132,共4页
目的:通过检测DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)在四氯二苯并对二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-paradioxin,TCDD)诱导的腭裂小鼠体内的表达,探讨其与腭裂发病机制的相关性。方法:TCDD通过对腭部中嵴上皮细胞的毒性作... 目的:通过检测DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)在四氯二苯并对二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-paradioxin,TCDD)诱导的腭裂小鼠体内的表达,探讨其与腭裂发病机制的相关性。方法:TCDD通过对腭部中嵴上皮细胞的毒性作用,导致胎鼠腭裂发生。应用TCDD(64μg/kg)处理胚胎处于第10.5天(E10.5)的C57BL/6J怀孕小鼠建模。分别获取E13.5、E14.5、E15.5和E17.5胎鼠的口腔组织,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色检测胎鼠腭裂组织。逆转录-定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测以上各组胎鼠DNMT1mRNA表达水平的变化,Western blot检测DNMT1蛋白表达水平的变化。结果:HE染色结果显示TCDD组腭裂发生率为98.25%,对照组无腭裂发生。RTqPCR结果显示TCDD组DNMT1mRNA水平与对照组比较显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果表明与对照组比较,TCDD组DNMT1蛋白表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在TCDD诱导胎鼠腭裂的形成过程中,DNMT1发挥重要的作用。 展开更多
关键词 非综合征型唇腭裂 甲基 四氯二苯并对二噁英 dna甲基转移1
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DNA甲基转移酶与早期胚胎发育 被引量:6
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作者 赵冬梅 金帆 黄荷凤 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第3期281-284,共4页
 哺乳动物胚胎中存在两种类型的DNA甲基转移酶(DnmT):一种是维持型的DnmT1,用于保持子代细胞与母细胞相同的DNA特异性甲基化模式;另一种是新发型的Dnmt3,主要负责建立胚胎发育分化过程中的组织特异性甲基化模式,在卵母细胞中母本印记...  哺乳动物胚胎中存在两种类型的DNA甲基转移酶(DnmT):一种是维持型的DnmT1,用于保持子代细胞与母细胞相同的DNA特异性甲基化模式;另一种是新发型的Dnmt3,主要负责建立胚胎发育分化过程中的组织特异性甲基化模式,在卵母细胞中母本印记基因的建立等方面也起一定作用。DnmT对胚胎的正常发育至关重要,其表达缺失或异常表达均可导致胚胎、胎儿的发育异常。 展开更多
关键词 dna甲基 dna甲基转移 胎儿发育
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白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p的原核细胞表达及鉴定 被引量:6
9
作者 孔倩倩 廖红 +3 位作者 李芳秋 马春芳 史利宁 胡毓安 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期919-921,930,共4页
目的原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。方法用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板... 目的原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。方法用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,PCR扩增Set1-208p的编码基因,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白质表达。用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊侵袭性白念珠菌感染(IC)患者血清进行抗原性鉴定。结果成功克隆了白念珠菌抗原特异性H3K4甲基转移酶片段Set1-208p基因并诱导表达,获得了纯化的重组肽段,所得蛋白质分子量(Mr)约为29 000,带有His标签,经western blot鉴定,诱导的重组蛋白可与IC患者血清特异性反应。结论成功诱导表达了具有良好抗原反应性的Set1-208p重组蛋白质,为建立相应的抗原、抗体ELISA检测方法提供基础。 展开更多
关键词 白念珠菌 H3K4甲基转移 基因克隆 原核细胞表达
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5-氮杂-2′-脱氧胞苷对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞DNA甲基转移酶表达和细胞周期的影响 被引量:4
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作者 田小莉 杨洁 +3 位作者 杨静 闫少春 时静华 邵国 《解剖学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期404-408,共5页
目的:探究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞增殖及其对DNA甲基化转移酶(DNMT)表达的影响。方法:5-Aza-CdR处理HT22细胞,采用Real-time PCR和免疫印迹检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3BmRNA及蛋白的表达;甲基转移... 目的:探究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞增殖及其对DNA甲基化转移酶(DNMT)表达的影响。方法:5-Aza-CdR处理HT22细胞,采用Real-time PCR和免疫印迹检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3BmRNA及蛋白的表达;甲基转移酶活性试剂盒检测DNMTs活性;流式细胞仪对其细胞周期及凋亡进行检测。结果:5-Aza-CdR处理HT22细胞24h后,不同浓度5-Aza-CdR均显著抑制HT22细胞增殖,且使胞质空泡化。5-Aza-CdR降低了HT22细胞早期凋亡,但促进晚期凋亡,并诱导细胞周期发生S期阻滞。DNMT1和DNMT3A的mRNA和蛋白表达下降,但DNMT3B表达未发生明显变化。DNMT1和DNMT3B活性降低。结论:5-Aza-CdR可降低DNMT1和DNMT3A mRNA和蛋白表达以及DNMT1和DNMT3B活性,影响HT22细胞周期及凋亡。 展开更多
关键词 5-AZA-CDR HT22细胞 细胞周期 dna甲基转移 小鼠
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结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1和钠氢交换子调节因子1的表达、临床意义及相关性 被引量:5
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作者 高晓斌 武雪亮 +4 位作者 赵轶峰 聂双发 梁峰 刘小飞 张迎春 《中国医药导报》 CAS 2020年第2期20-24,共5页
目的探讨结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1(DNMT1)和钠氢交换子调节因子1(NHERF1)的表达、临床意义及相关性。方法选取2017年2月~2018年2月河北北方学院附属第一医院手术切除的结直肠癌(癌组)和癌旁正常组织(正常组)各50例,应用实时荧光... 目的探讨结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1(DNMT1)和钠氢交换子调节因子1(NHERF1)的表达、临床意义及相关性。方法选取2017年2月~2018年2月河北北方学院附属第一医院手术切除的结直肠癌(癌组)和癌旁正常组织(正常组)各50例,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组DNMT1 mRNA和NHERF1 mRNA的表达,应用免疫组化(IHC)法检测两组DNMT1和NHERF1蛋白的表达,同时收集患者的临床资料,分析二者的表达与临床病理特征间的关系,应用Spearman检验分析两种蛋白间的相关性。结果qRT-PCR法结果显示:癌组中DNMT1 mRNA的表达水平明显高于正常组,而癌组中NHERF1 mRNA的表达水平则明显低于正常组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);IHC法结果显示:癌组中DNMT1蛋白阳性表达率明显高于正常组,而癌组中NHERF1蛋白阳性表达率明显低于正常组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);癌组中DNMT1和NHERF1蛋白的表达水平均与病变浸润程度、TNM分期、淋巴结转移及肝转移有关(均P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(均P>0.05);Spearman相关分析显示:癌组织中DNMT1与NHERF1呈负相关(r=-0.491,P<0.01)。结论DNMT1高表达和NHERF1低表达在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用,二者均可作为结直肠癌早期诊断和治疗监测的潜在分子生物学指标。 展开更多
关键词 dna甲基转移-1 钠氢交换子调节因子 结直肠癌 逆转录聚合链反应 免疫组化 临床意义
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O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶与肿瘤 被引量:2
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作者 王小兵 袁玉梅 赵桂森 《食品与药品》 CAS 2005年第02A期15-17,共3页
DNA修复酶O6 -甲基鸟嘌呤 -DNA甲基转移酶 (MGMT)是机体修复烷基加合物的关键酶。该酶结构与功能异常与肿瘤发生、发现、有效治疗及肿瘤耐药性等方面都有着密切的联系 ,本文综述了近年来的研究进展。
关键词 O^6-甲基鸟嘌呤-dna甲基转移 肿瘤 MGMT蛋白 基因结构 dna修复
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甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌细胞迁移侵袭抑制及SPG20基因甲基化调节作用观察
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作者 赵宝山 孙光蕊 +3 位作者 黄景涛 韩晓丽 梁宗英 王敏 《山东医药》 CAS 2024年第27期6-9,共4页
目的分析甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力的抑制作用及痉挛性截瘫-20(SPG20)基因甲基化水平的调节作用,以探讨甲基化转移酶抑制剂对肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法以不同浓度甲基化转移酶抑制剂SGI-... 目的分析甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力的抑制作用及痉挛性截瘫-20(SPG20)基因甲基化水平的调节作用,以探讨甲基化转移酶抑制剂对肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法以不同浓度甲基化转移酶抑制剂SGI-1027作用于肺腺癌A549细胞,MTT法测算细胞增殖活力,筛选得到SGI-1027最佳作用浓度为7.5μmol/L,作为后续实验的作用浓度。将A549细胞分为SGI-1027组和二甲基亚砜(DMSO)组,SGI-1027组培养基中加入SGI-1027培养,对照组培养基中加入DMSO培养。两组培养48 h时,采用划痕愈合实验观察细胞迁移能力,Transwell小室实验观察细胞侵袭能力;采用qRT-PCR法检测细胞DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)、SPG20 mRNA,焦磷酸测序法检测细胞SPG20基因甲基化水平,Western blotting法检测细胞DNMT3b、SPG20蛋白。结果培养48 h时,与DMSO组比较,SGI-1027组细胞迁移距离小、穿膜细胞数少(P均<0.05)。与DMSO组比较,SGI-1027组DNMT3b mRNA及蛋白相对表达量下降,SPG20 mRNA及蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。SGI-1027组SPG20基因甲基化率较DMSO组降低(P<0.05)。结论甲基化转移酶抑制剂SGI-1027可抑制肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力,降低细胞SPG20基因甲基化水平;SGI-1027可能通过下调细胞内SPG20基因甲基化水平进而抑制肺腺癌细胞的迁移、侵袭能力。 展开更多
关键词 甲基转移抑制剂 SGI-1027 甲基转移 dna甲基转移3B 痉挛性截瘫-20 肺腺癌
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SLE患者外周血T细胞DNA甲基转移酶1表达与疾病活动的关系 被引量:2
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作者 米向斌 曾凡钦 谭国珍 《岭南皮肤性病科杂志》 2006年第4期266-268,共3页
目的:初步探讨系统性红斑狼疮患者外周血T细胞DNA甲基转移酶1的mRNA的表达和疾病活动的关系。方法:采用SLEDAI对系统性红斑狼疮患者疾病活动进行评分;用RT-PCR方法测定了28例系统性红斑狼疮患者和14例健康人外周血T淋巴细胞表达DNA甲基... 目的:初步探讨系统性红斑狼疮患者外周血T细胞DNA甲基转移酶1的mRNA的表达和疾病活动的关系。方法:采用SLEDAI对系统性红斑狼疮患者疾病活动进行评分;用RT-PCR方法测定了28例系统性红斑狼疮患者和14例健康人外周血T淋巴细胞表达DNA甲基转移酶1的mRNA水平。结果:①系统性红斑狼疮患者外周血T细胞表达DNA甲基转移酶1较健康人显著下降(P<0.05);②系统性红斑狼疮患者外周血T细胞的DNA甲基转移酶1表达水平与SLEDAI呈现负相关(P<0.05)。结论:T细胞表达DNA甲基转移酶1的显著降低很可能是系统性红斑狼疮患者基因组DNA低甲基化而失去对疾病相关基因的表达调控,最终导致疾病发生发展的原因。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 dna甲基转移 表观遗传 SLE患者 外周血 T细胞
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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对肝癌DNA甲基转移酶1及上皮钙黏附素表达的影响
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作者 吴守伟 汤必奎 +2 位作者 黄银久 胡明洁 赵莉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期328-332,共5页
目的:研究5-氮杂-2'脱氧胞苷(5~Aza—CdR)对肝癌细胞中DNA甲基转移酶1(DNMT1)及上皮钙黏附素(E-cadherin)表达的影响。方法:免疫组织化学检测上皮钙黏附素在肝癌(26例)及癌旁组织(20例)中的表达。用终浓度10μmol/L的5-A... 目的:研究5-氮杂-2'脱氧胞苷(5~Aza—CdR)对肝癌细胞中DNA甲基转移酶1(DNMT1)及上皮钙黏附素(E-cadherin)表达的影响。方法:免疫组织化学检测上皮钙黏附素在肝癌(26例)及癌旁组织(20例)中的表达。用终浓度10μmol/L的5-Aza-CdR处理培养的肝癌细胞株GQY-7703作为实验组,未处理细胞为对照组;DNMT1基因和上皮钙黏附素基因(CDH1)的转录产物及表达蛋白分别使用半定量RT-PCR和免疫印迹法检测;CDH1的甲基化状态使用甲基化特异性PCR(MSP)检测。结果:相比较癌旁组织,肝癌组织中上皮钙黏附素表达显著下调。5-Aza-CdR降低了GQY-7703细胞中DNMT1在转录水平和翻译水平的表达;CDH1CpG岛的甲基化水平降低;上皮钙黏附素mRNA和蛋白表达量明显增高,对电泳条带的半定量分析显示实验组和对照组之间的差异具有统计学意义。结论:5-Aza-CdR通过抑制DNMT1的表达,改变了CDH1基因的异常甲基化状态,进而恢复上皮钙黏附素的表达。 展开更多
关键词 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 肝癌细胞 dna甲基转移1 上皮钙黏附素
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DNA甲基转移酶基因多态性与自身免疫性疾病关系的研究进展 被引量:7
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作者 姚承佼 钟晓武 +2 位作者 黄翠平 青玉凤 周京国 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第4期91-94,共4页
DNA甲基化是最常见的表观遗传修饰形式,在调控基因表达、维持基因组稳定中起着极其重要的作用。DNA甲基转移酶是催化并维持这一过程的一类酶,其单核苷酸多态性可导致DNA甲基转移酶构型、功能异常,进而影响基因组DNA甲基化水平,并通过多... DNA甲基化是最常见的表观遗传修饰形式,在调控基因表达、维持基因组稳定中起着极其重要的作用。DNA甲基转移酶是催化并维持这一过程的一类酶,其单核苷酸多态性可导致DNA甲基转移酶构型、功能异常,进而影响基因组DNA甲基化水平,并通过多种机制导致自身免疫性疾病的发生、发展。本文以系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、免疫性血小板减少症等常见自身免疫性疾病为例,重点阐述DNA甲基转移酶单核苷酸多态性与免疫性疾病易感性的关系。 展开更多
关键词 dna甲基 dna甲基转移 单核苷酸多态性 自身免疫性疾病
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甲基转移酶3基因对前列腺癌细胞c-Myc、EGFR、Bcl-2表达的影响及其机制 被引量:3
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作者 李显永 赵晖 +3 位作者 梁勇 程阳 韩登俊 官润云 《山东医药》 CAS 2021年第32期20-23,共4页
目的观察甲基转移酶3(METTL3)基因对前列腺癌细胞系PC-3、DU145中肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2表达的影响,并探讨相关作用机制。方法运用RNA干扰技术合成METTL3 siRNA-1400、阴性siRNA。将PC-3、DU145细胞分别分为空白对照组、阴性... 目的观察甲基转移酶3(METTL3)基因对前列腺癌细胞系PC-3、DU145中肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2表达的影响,并探讨相关作用机制。方法运用RNA干扰技术合成METTL3 siRNA-1400、阴性siRNA。将PC-3、DU145细胞分别分为空白对照组、阴性对照组、实验组,空白对照组不做特殊处理,阴性对照组转染阴性对照siRNA,实验组转染METTL3 siRNA-1400。采用Western blotting法检测各组细胞中的肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2,Dolt blotting法检测各组细胞RNA的N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平。结果PC-3细胞、DU145细胞的实验组c-Myc、EGFR、Bcl-2蛋白表达均低于空白对照组、阴性对照组(P均<0.01)。PC-3细胞、DU145细胞的实验组RNA m6A修饰水平均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.01)。结论沉默前列腺癌PC-3、DU145细胞中METTL3基因可抑制肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2的表达,其机制可能与METTL3参与RNA的m6A修饰有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 甲基转移3 m6A修饰 C-MYC蛋白 EGFR蛋白 BCL-2蛋白
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DNA甲基转移酶在儿童免疫性血小板减少症中的蛋白表达 被引量:2
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作者 郭路阳 范蕊 +4 位作者 肖爱菊 曹丽佳 石太新 赵东菊 李培岭 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2017年第5期257-260,265,共5页
目的通过检测DNA甲基转移酶(DNMTs)在儿童免疫性血小板减少症(ITP)外周血中蛋白水平的表达,探讨其与儿童ITP的发病机制的关系。方法收集2015年5月-2016年5月在新乡医学院第一附属医院门诊、病房就诊和治疗的60例新诊断ITP患儿(实验组)... 目的通过检测DNA甲基转移酶(DNMTs)在儿童免疫性血小板减少症(ITP)外周血中蛋白水平的表达,探讨其与儿童ITP的发病机制的关系。方法收集2015年5月-2016年5月在新乡医学院第一附属医院门诊、病房就诊和治疗的60例新诊断ITP患儿(实验组)和门诊健康体检的36例儿童(对照组)为研究对象。无菌采集其空腹外周血2 mL,采取酶联免疫吸附法检测血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平。分别分析年龄、性别、血小板计数(PLT)对血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的影响,及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b三者之间的关系。结果 (1)新诊断ITP患儿PLT为(21.3±26.1)×10~9/L,明显低于健康对照组(261.2±78.4)×10~9/L,差异有显著性(t=-17.777,P=0.000)。(2)ITP患儿DNMT1、DNMT3a、DNMT3b(ug/L)的蛋白表达水平分别为(1.43±0.96)、(0.67±0.39)、(0.53±0.39),明显低于对照组(2.05±1.24)、(1.04±0.58)、(0.73±0.45),差异有显著性(t=-2.547,-3.692,-2.341;P=0.013,0.000,0.021)。经Person相关性分析,ITP患儿血小板计数与DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平无明显相关性(r=-0.062、0.161、0.079,P=0.636、0.220、0.549)。DNMT1与DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达无相关性(r=-0.025,-0.057;P=0.851、0.665),DNMT3a、3b的蛋白表达正相关性(r=0.259,P=0.046)。结论新诊断ITP患儿外周血中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平显著降低,提示DNA甲基转移酶的异常表达可能与儿童ITP的发病机制相关,推测在儿童ITP患儿DNA甲基化过程中,DNMT3a、DNMT3b起着相互协调的作用。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 dna甲基转移 儿童
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DNA甲基转移酶抑制剂在动物体细胞核移植研究中的应用 被引量:1
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作者 蒙丽娜 罗婷 +4 位作者 柯浩 刘晓华 孙洪亮 陆凤花 石德顺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期133-136,共4页
甲基化对胚胎发育和机体形成具有重要的调控作用,体细胞核移植胚胎常常表现出异常的DNA甲基化,DNA甲基转移酶抑制剂能抑制细胞的DNA甲基化水平,从而达到提高体细胞核移植效率的作用。作者主要综述了DNA甲基转移酶抑制剂在动物体细胞核... 甲基化对胚胎发育和机体形成具有重要的调控作用,体细胞核移植胚胎常常表现出异常的DNA甲基化,DNA甲基转移酶抑制剂能抑制细胞的DNA甲基化水平,从而达到提高体细胞核移植效率的作用。作者主要综述了DNA甲基转移酶抑制剂在动物体细胞核移植研究中的应用。 展开更多
关键词 dna甲基 dna甲基转移抑制剂 体细胞核移植
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LV-ERK1-RNAi转染人非小细胞肺癌细胞的ERK1/2、DNA甲基转移酶1表达观察 被引量:1
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作者 张恒 孙宇 +2 位作者 刘俊 陈尚威 周华富 《山东医药》 CAS 2020年第3期5-8,共4页
目的观察细胞外信号调节激酶1基因RNA干扰慢病毒载体(LV-ERK1-RNAi)转染后人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞NCI-H1299中细胞外信号调节激酶1(ERK1)、ERK2、DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA及ERK1、磷酸化ERK1(p-ERK1)、DNMT1蛋白表达情况。方法体... 目的观察细胞外信号调节激酶1基因RNA干扰慢病毒载体(LV-ERK1-RNAi)转染后人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞NCI-H1299中细胞外信号调节激酶1(ERK1)、ERK2、DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA及ERK1、磷酸化ERK1(p-ERK1)、DNMT1蛋白表达情况。方法体外培养NCI-H1299细胞,将细胞随机分为3组,KD组和NC组细胞分别转染LV-ERK1-RNAi、阴性对照病毒,CON组不作处理。转染72 h后,采用荧光显微镜观察细胞荧光率,实时荧光定量基因扩增法检测细胞中ERK1/2、DNMT1 mRNA,蛋白免疫印迹法检测细胞中ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白。结果空白对照组细胞无绿色荧光蛋白表达,阴性对照病毒组、LV-ERK1-RNAi组转染效率达80%以上。与NC组、CON组比较,KD组ERK1、DNMT1 mRNA及ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白表达下降(P均<0. 05)。结论 LV-ERK1-RNAi转染后NCI-H1299细胞ERK1、DNMT1 mRNA及ERK1、p-ERK1、DNMT1蛋白表达降低,ERK2表达正常,表明LV-ERK1-RNAi特异敲低ERK1而调控DNMT1的表达。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激1基因 RNA干扰技术 慢病毒载体 非小细胞肺癌 NCI-H1299细胞 细胞外信号调节激1 dna甲基转移1 磷酸化ERK1
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