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方法推介-不断追求完善--流式细胞仪进行鸡胚性别鉴定 被引量:3
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作者 刘长国 《中国家禽》 北大核心 2003年第14期28-29,共2页
关键词 鸡胚 性别鉴定 早期鉴定 分子标记 流式细胞 细胞dna含量测定 应用
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脂质体介导法转染体细胞效率的优化 被引量:5
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作者 侯颖 李文蓉 +1 位作者 谭立新 牛志刚 《黄牛杂志》 2005年第2期18-20,24,共4页
为建立脂质体介导的高效体细胞转染体系,采用脂质体TransfastTM包裹编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的pCMV-EGFP质粒,转染5~13代山羊胎儿成纤维细胞,并用流式细胞仪检测不同DNA剂量、细胞汇合度、血清、转染时间及脂质体与DNA比例等参数... 为建立脂质体介导的高效体细胞转染体系,采用脂质体TransfastTM包裹编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的pCMV-EGFP质粒,转染5~13代山羊胎儿成纤维细胞,并用流式细胞仪检测不同DNA剂量、细胞汇合度、血清、转染时间及脂质体与DNA比例等参数对转染效率的影响。实验发现0.75μgDNA按1∶1的脂质体与DNA比例,在无血清条件下转染汇合50%细胞3h,转染效率最高可达40.7%±5%。4h转染时间、细胞汇合80%及转染体系中有血清会降低转染效率。随着DNA剂量的增加,转染效率呈剂量依赖性增高,但山羊成纤维细胞的活细胞数显著下降。实验表明TransfastTM能高效安全地介导外源基因转染山羊成纤维细胞。 展开更多
关键词 转染效率 血清 脂质体介导 流式细胞检测 dna 剂量 羊胎 山羊 细胞 胎儿成纤维细胞
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大蒜素诱导人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的研究 被引量:9
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作者 曹开源 毛晓鹏 +4 位作者 丘少鹏 袁广卿 陈显景 徐霖 黄晓荣 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期432-434,438,共4页
【目的】探讨大蒜素对人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的影响。【方法】MTT法检测大蒜素对BIU87细胞生长的影响;倒置显微镜、TUNEL法观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化;半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2,bax,... 【目的】探讨大蒜素对人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的影响。【方法】MTT法检测大蒜素对BIU87细胞生长的影响;倒置显微镜、TUNEL法观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化;半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2,bax,caspase-3mRNA表达的变化,比色法测定caspase-3活性变化。【结果】大蒜素能明显抑制BIU87细胞的生长,与大蒜素的浓度和作用时间有关,5mg/L大蒜素作用5d可以杀死50%以上的细胞;可诱导BIU87细胞凋亡,细胞周期阻滞在S-和G2期;凋亡相关基因bcl-2表达减少,bax无明显变化,caspase-3表达及活性增高。【结论】诱导细胞凋亡是大蒜素发挥抗瘤效果的一种重要机制;凋亡发生可能与细胞周期阻滞、bcl-2和caspase-3基因表达及活性变化有关。 展开更多
关键词 人膀胱癌细胞 BIU87 大蒜素 caspase-3 基因BCL-2 细胞周期阻滞 流式细胞检测 MTT检测 细胞形态变化 TUNEL PCR检测 mRNA表达 诱导细胞凋亡 凋亡相关 活性变化 倒置显微镜 细胞凋亡率 比色测定 基因表达及
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野生龙池鲫鱼纯化方法的研究
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作者 宋宇康 邢志伟 +2 位作者 周国平 张平 张李阳 《水产养殖》 CAS 2020年第2期25-27,31,共4页
以鸡的红细胞DNA含量(2.50 pg/N)为标准对照,利用流式细胞仪测定了1 000尾六合龙池中鲫鱼的红细胞核DNA含量。鲫鱼采用T型标技术标记并测定了上述鱼的形态特征。结果表明:其中120尾鲫鱼的红细胞核相对DNA含量接近290,占12%,880尾样品接... 以鸡的红细胞DNA含量(2.50 pg/N)为标准对照,利用流式细胞仪测定了1 000尾六合龙池中鲫鱼的红细胞核DNA含量。鲫鱼采用T型标技术标记并测定了上述鱼的形态特征。结果表明:其中120尾鲫鱼的红细胞核相对DNA含量接近290,占12%,880尾样品接近330占总数的88%;二倍体龙池鲫鱼的DNA含量为3.82 pg/N,三倍体龙池鲫鱼的DNA含量为4.34 pg/N,可知所测龙池中鲫鱼是由二倍体和三倍体组成的混合群体;同时测定了上述鱼的侧线鳞数量,也可作为辨别二倍体和三倍体龙池鲫鱼的参考标准之一。所采用的T型标记法,在培育三周后龙池鲫鱼的存活率为100%,脱牌率为1.2%。 展开更多
关键词 龙池鲫鱼 dna含量 流式细胞 T型标记 侧线鳞
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抱子甘蓝花培苗倍性的快速鉴定 被引量:26
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作者 周元昌 S.KENNEDY 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第1期55-58,共4页
采用花药培养获得加倍单倍体 (DH)是甘蓝类蔬菜自交不亲和系选育的主要方法之一 .然而 ,花药培养后代是倍性水平不同的混合群体 ,及早鉴定出真正的 DH具有重要的意义 .本文阐述 DNA流式细胞仪测定法和形态学鉴定法在花培苗倍性鉴定上的... 采用花药培养获得加倍单倍体 (DH)是甘蓝类蔬菜自交不亲和系选育的主要方法之一 .然而 ,花药培养后代是倍性水平不同的混合群体 ,及早鉴定出真正的 DH具有重要的意义 .本文阐述 DNA流式细胞仪测定法和形态学鉴定法在花培苗倍性鉴定上的应用 ,并以抱子甘蓝的花培苗群体为材料 ,采用这两种方法鉴定其倍性组成 .结果表明 ,DNA流式细胞仪测定法可以鉴别群体的各种倍性水平 ,而形态学鉴别法可以把群体中的二倍体与单倍体、四倍体及其它倍体分开 .若以 DNA流式细胞仪测定法的鉴定结果为标准 ,苗期形态学鉴定的准确率可达 94.2 % .与 DNA流式细胞仪测定法相比 ,形态学鉴定方法具有更快速。 展开更多
关键词 花药培养 dna流式细胞仪测定法 形态学鉴定 抱子甘蓝 倍性鉴定
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