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一种适用于甘蔗SSR-PCR的DNA快速提取方法
被引量：
6
1
作者
陈忠良
秦翠鲜
+3 位作者
郭元元
杨翠芳
罗海斌
何海波
《广西农业科学》
CSCD
2010年第11期1155-1157,共3页
以不同甘蔗品种幼苗期幼嫩叶片为材料,以改良SDS法和DNA快速提取法对甘蔗基因组DNA进行提取,并以SSR-PCR检测比较两者的扩增效果。结果表明,两种方法提取获得的基因组DNA条带基本一致,条带较为清晰,重复性好且稳定,均可满足SSR-PCR扩增...
以不同甘蔗品种幼苗期幼嫩叶片为材料,以改良SDS法和DNA快速提取法对甘蔗基因组DNA进行提取,并以SSR-PCR检测比较两者的扩增效果。结果表明,两种方法提取获得的基因组DNA条带基本一致,条带较为清晰,重复性好且稳定,均可满足SSR-PCR扩增的需要。但DNA快速提取法简化了SDS改良法,具有高通量、操作方便、简单、快速、成本低、DNA存放时间较长等优点,能在较短时间内完成大量样品的DNA提取。
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关键词
甘蔗
dna
提取
SDS改良
法
dna快速提取法
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职称材料
转基因植物快速检测方法的研究
被引量：
16
2
作者
谢为龙
陈其文
+4 位作者
喻国泉
李冠雄
乐海洋
谭群英
廖力
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2002年第4期39-42,46,共5页
本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取...
本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取。利用复合PCR法可在同一反应管中同步检测 35S、NOS及CP4-EPSPS基因 ,明显提高了检测效率。应用本试验建立的DNA快速提取 -复合PCR扩增 -银染检测技术可在 6小时内得出结果 ,达到了快速、简便、灵敏、可靠的检测目的。
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关键词
转基因植物
快速
检测方
法
dna快速提取法
复合PCR
银染
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职称材料
一种高通量的CRISPR/Cas9材料靶点检测方法在大豆中的应用研究
3
作者
彭丽华
欧阳文琦
+9 位作者
曹东
郭葳
杨红丽
郝青南
陈水莲
张婵娟
袁松丽
陈海峰
沙爱华
陈李淼
《中国油料作物学报》
2025年第4期920-928,共9页
CRISPR/Cas9基因编辑技术已经被广泛地应用于多种植物中,常规基因编辑靶点检测方法实验繁琐且耗时,成本较高,开发更简便和高通量的方法可以极大提高靶点检测的效率。本实验以南方大豆品种天隆一号为材料,开发了一种叶片DNA的快速提取方...
CRISPR/Cas9基因编辑技术已经被广泛地应用于多种植物中,常规基因编辑靶点检测方法实验繁琐且耗时,成本较高,开发更简便和高通量的方法可以极大提高靶点检测的效率。本实验以南方大豆品种天隆一号为材料,开发了一种叶片DNA的快速提取方法——水磨法,缩短DNA提取和检测时间,并且提取的DNA可以保存20 d。此外,本文还进一步研究了将提取液替换为TE buffer后,在煮沸条件下,DNA的稳定性分析。结果表明:煮沸1 min、3 min、5 min和10 min后,4℃或-20℃放置的DNA样品均可以保存45 d。然后,将天隆一号为遗传背景的待测材料中的靶点序列PCR产物进行毛细管电泳,与对照材料相比,观察是否存在差异碱基的特异性条带,进而判断待测材料是否发生基因编辑及可能存在的编辑类型种类。本文将植物叶片DNA快速提取法和毛细管电泳技术相结合,更加快速、高通量地筛选大豆材料的突变情况及突变种类,为大豆重要性状基因功能分析提供技术支持。
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关键词
大豆
CRISPR/Cas9
dna快速提取法
靶点检测
高通量
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职称材料
题名
一种适用于甘蔗SSR-PCR的DNA快速提取方法
被引量：
6
1
作者
陈忠良
秦翠鲜
郭元元
杨翠芳
罗海斌
何海波
机构
广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室
农业部甘蔗品质监督检验测试中心(南宁)
广西甘蔗遗传改良重点实验室
广西师范大学生命科学学院
出处
《广西农业科学》
CSCD
2010年第11期1155-1157,共3页
基金
国家科技支撑计划项目(2007BAD30B05)
广西自然科学基金项目(桂科自0991183)
+1 种基金
广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻0782004-5,桂科能0815011-6-1)
广西农业科学院基本科研业务专项项目(200803Z-基)
文摘
以不同甘蔗品种幼苗期幼嫩叶片为材料,以改良SDS法和DNA快速提取法对甘蔗基因组DNA进行提取,并以SSR-PCR检测比较两者的扩增效果。结果表明,两种方法提取获得的基因组DNA条带基本一致,条带较为清晰,重复性好且稳定,均可满足SSR-PCR扩增的需要。但DNA快速提取法简化了SDS改良法,具有高通量、操作方便、简单、快速、成本低、DNA存放时间较长等优点,能在较短时间内完成大量样品的DNA提取。
关键词
甘蔗
dna
提取
SDS改良
法
dna快速提取法
Keywords
sugarcane
dna
extraction
SDS modified method
rapid
dna
extraction
分类号
S566.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
转基因植物快速检测方法的研究
被引量：
16
2
作者
谢为龙
陈其文
喻国泉
李冠雄
乐海洋
谭群英
廖力
机构
珠海出入境检验检疫局
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2002年第4期39-42,46,共5页
文摘
本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取。利用复合PCR法可在同一反应管中同步检测 35S、NOS及CP4-EPSPS基因 ,明显提高了检测效率。应用本试验建立的DNA快速提取 -复合PCR扩增 -银染检测技术可在 6小时内得出结果 ,达到了快速、简便、灵敏、可靠的检测目的。
关键词
转基因植物
快速
检测方
法
dna快速提取法
复合PCR
银染
Keywords
Genetically modified plant Rapid method for
dna
extraction Multiplex PCR Silver staining
分类号
Q788 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
一种高通量的CRISPR/Cas9材料靶点检测方法在大豆中的应用研究
3
作者
彭丽华
欧阳文琦
曹东
郭葳
杨红丽
郝青南
陈水莲
张婵娟
袁松丽
陈海峰
沙爱华
陈李淼
机构
长江大学农学院
出处
《中国油料作物学报》
2025年第4期920-928,共9页
基金
国家自然科学基金:面上项目(32171957)
武汉市知识创新专项基础研究项目(2023020201010127)
农业生物育种国家科技重大专项(2023ZD04036)。
文摘
CRISPR/Cas9基因编辑技术已经被广泛地应用于多种植物中,常规基因编辑靶点检测方法实验繁琐且耗时,成本较高,开发更简便和高通量的方法可以极大提高靶点检测的效率。本实验以南方大豆品种天隆一号为材料,开发了一种叶片DNA的快速提取方法——水磨法,缩短DNA提取和检测时间,并且提取的DNA可以保存20 d。此外,本文还进一步研究了将提取液替换为TE buffer后,在煮沸条件下,DNA的稳定性分析。结果表明:煮沸1 min、3 min、5 min和10 min后,4℃或-20℃放置的DNA样品均可以保存45 d。然后,将天隆一号为遗传背景的待测材料中的靶点序列PCR产物进行毛细管电泳,与对照材料相比,观察是否存在差异碱基的特异性条带,进而判断待测材料是否发生基因编辑及可能存在的编辑类型种类。本文将植物叶片DNA快速提取法和毛细管电泳技术相结合,更加快速、高通量地筛选大豆材料的突变情况及突变种类,为大豆重要性状基因功能分析提供技术支持。
关键词
大豆
CRISPR/Cas9
dna快速提取法
靶点检测
高通量
Keywords
soybean
CRISPR/Cas9
rapid
dna
extraction
target detection
high throughput
分类号
S565.1 [农业科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种适用于甘蔗SSR-PCR的DNA快速提取方法
陈忠良
秦翠鲜
郭元元
杨翠芳
罗海斌
何海波
《广西农业科学》
CSCD
2010
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
转基因植物快速检测方法的研究
谢为龙
陈其文
喻国泉
李冠雄
乐海洋
谭群英
廖力
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2002
16
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
一种高通量的CRISPR/Cas9材料靶点检测方法在大豆中的应用研究
彭丽华
欧阳文琦
曹东
郭葳
杨红丽
郝青南
陈水莲
张婵娟
袁松丽
陈海峰
沙爱华
陈李淼
《中国油料作物学报》
2025
在线阅读
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职称材料
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