用于转基因植株检测的DNA快速微量提取方法

1

作者 卫剑文 许新萍 李宝健 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z2期52-55,共4页

建立了一个用于转基因小苗检测的ＤＮＡ快速微量方法．每２０ｍｇ新鲜叶片可提出约１０ μｇ ＤＮＡ，且 ＤＮＡ有较好的完整性，Ａ２６０／２８０值在１．７～１．９范围内，并适合于点杂文和ＰＣＲ分析．

关键词 dna快速微量提取方法 点杂交 PCR 转基因小苗

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一种简易的拟南芥幼苗微量DNA提取方法 被引量：23

2

作者 杨双 阮燕晔 +1 位作者 樊金娟 张立军 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期99-100,共2页

报道了一种简易的拟南芥幼苗微量DNA提取方法。该方法可在常温下进行DNA提取,而且样品用量少,仅需10mg左右,用100μL重蒸水回溶DNA沉淀所获得的粗提液可直接用于PCR检测。结果表明:应用该法提取的DNA完整性好,PCR效果佳,适用于拟南芥转... 报道了一种简易的拟南芥幼苗微量DNA提取方法。该方法可在常温下进行DNA提取,而且样品用量少,仅需10mg左右,用100μL重蒸水回溶DNA沉淀所获得的粗提液可直接用于PCR检测。结果表明:应用该法提取的DNA完整性好,PCR效果佳,适用于拟南芥转基因植株鉴定。 展开更多

关键词 dna提取方法 拟南芥 微量 幼苗 PCR检测 植株鉴定 粗提液 转基因

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玉米单株幼芽DNA快速提取新方法 被引量：20

3

作者 郭景伦 赵久然 +4 位作者 辛景树 赵建宗 贾希海 田雷 律宝春 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2005年第1期38-40,共3页

为了攻克利用DNA指纹技术进行玉米种子纯度鉴定中存在的技术难关,对玉米单株幼芽DNA快速提取 方法进行了研究,结果表明:利用新方法提取DNA,不用液氮、不用研磨、不用离心、不用沉淀,不用SDS、不用CTAB、 不用氯仿,并且提取的DNA不降解... 为了攻克利用DNA指纹技术进行玉米种子纯度鉴定中存在的技术难关,对玉米单株幼芽DNA快速提取 方法进行了研究,结果表明:利用新方法提取DNA,不用液氮、不用研磨、不用离心、不用沉淀,不用SDS、不用CTAB、 不用氯仿,并且提取的DNA不降解、完全可以满足利用SSR分子标记进行DNA指纹分析的需要。一个人提取100 株幼芽(1个检测样品)DNA只需30 min左右,1 d可以提取2000株幼芽(20个检测样品)的DNA,为DNA指纹技术 在玉米种子纯度及真伪快速鉴定中的广泛应用解决了关键性技术难题。 展开更多

关键词 幼芽 单株 玉米种子 SSR分子标记 dna指纹分析 利用 纯度鉴定 快速提取方法 dna指纹技术 快速鉴定

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一种适宜PCR检测的番茄DNA微量提取方法 被引量：13

4

作者 王飞 巩振辉 +3 位作者 马维 王莎莎 蔡义勇 李晓东 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期169-172,共4页

通过比较DNA微量提取方法和3种常规提取方法得到的DNA质量和PCR扩增结果,找到一种适用于番茄PCR技术的快速、简单、成本低的DNA提取方法。该方法的材料不用液氮,避免使用酚类、氯仿等有毒试剂,可以单人大批量提取,并在番茄分子标记辅助... 通过比较DNA微量提取方法和3种常规提取方法得到的DNA质量和PCR扩增结果,找到一种适用于番茄PCR技术的快速、简单、成本低的DNA提取方法。该方法的材料不用液氮,避免使用酚类、氯仿等有毒试剂,可以单人大批量提取,并在番茄分子标记辅助育种中能稳定而准确的规模化PCR检测。 展开更多

关键词 番茄 dna微量提取方法 PCR

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一种少量提取植物组织DNA的快速方法 被引量：14

5

作者 李维平 赵文明 雷萍 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第6期125-128,共4页

　为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提... 　为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提DNA,并用氯仿-异戊醇反复抽提,可显著降低蛋白质含量;通过应用RNA酶可获得纯度较高的DNA。该方法的特点是在室温下即可进行简便操作,快速(提取核酸的过程仅需30min),污染器皿少,实用性强,提取物产量高,纯度好。 展开更多

关键词 少量提取 植物组织dna 快速方法

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微量DNA高效提取方法 被引量：5

6

作者 付少彬 王海英 +1 位作者 孟庆峰 孙迪安 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第15期8868-8869,共2页

[目的]探究一种高效的提取微量地衣体及地衣共生菌DNA的方法。[方法]在CTAB法的基础上,对溶液成分、比例及应用硅基质吸附柱对微量DNA提取进行优化。[结果]对于叶状、枝状和壳状地衣,采用该方法可得到质量较高的DNA。[结论]所用方法既... [目的]探究一种高效的提取微量地衣体及地衣共生菌DNA的方法。[方法]在CTAB法的基础上,对溶液成分、比例及应用硅基质吸附柱对微量DNA提取进行优化。[结果]对于叶状、枝状和壳状地衣,采用该方法可得到质量较高的DNA。[结论]所用方法既节约样品,简便易行,费用低,稳定性好,效率高,而且不局限于新鲜材料。 展开更多

关键词 地衣 共生菌 微量dna 提取方法

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一种快速提取小鼠基因组DNA的方法

7

作者 沈洁 孟雁 +6 位作者 薛越强 刘亮 赵晓娟 史燕燕 陈彤 刘金毅 方芳 《中国实验动物学杂志》 1998年第1期41-43,共3页

本文建立一套简易、快速从小鼠肝（肾）组织中提取高分子量ＤＮＡ的方法，此法产率高，比较经济，其纯度可直接应用于ＰＣＲ进行小鼠遗传监测。

关键词 小鼠 基因组dna 快速提取方法 PCR 实验动物

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噬菌体基因组DNA快速提取方法

8

作者 刘秋婷 田雨顺 +2 位作者 云龙 罗鹏 胡超群 《热带生物学报》 2017年第2期232-235,共4页

针对传统噬菌体基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,并且提取中用到酚/氯仿抽提,操作步骤繁琐,会对操作人员身体造成一定程度的损伤等不足,笔者建立了1种噬菌体基因组DNA快速提取方法。其提取的主要步骤包括宿主核酸降解、噬菌体粒子沉... 针对传统噬菌体基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,并且提取中用到酚/氯仿抽提,操作步骤繁琐,会对操作人员身体造成一定程度的损伤等不足,笔者建立了1种噬菌体基因组DNA快速提取方法。其提取的主要步骤包括宿主核酸降解、噬菌体粒子沉淀、噬菌体DNA释放、杂质去除、DNA吸附、DNA清洗和DNA洗脱等。结果表明,通过此法能快速提取以溶藻弧菌、大肠杆菌和阴沟肠杆菌为宿主菌的多种噬菌体基因组DNA,最快可以在2 h内完成,而且提取的产量和纯度均较高,DNA浓度超过100 ng·μL^(-1),OD_(260/280)达到1.8以上,提取产物不受宿主菌基因组DNA污染,可用于下游的实验分析。 展开更多

关键词 噬菌体基因组dna 快速提取方法 核酸降解 噬菌体粒子沉淀

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改良SDS法快速提取小样品量棉花总DNA及其纯化 被引量：19

9

作者 郭宝生 张辉 +1 位作者 耿军义 张香云 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期320-320,F0003,共2页

关键词 快速提取方法 总dna 改良SDS法 纯化 棉花 样品量 多酚类物质 聚合酶链式反应 chain

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快速提取基因组DNA鉴定转基因鼠 被引量：2

10

作者 卢一凡 邓继光 +2 位作者 肖成祖 马清钧 王冬平 《中国实验动物学杂志》 1996年第2期99-99,共1页

快速提取基因组ＤＮＡ鉴定转基因鼠卢一凡，邓继光，肖成祖，马清钧，王冬平（军事医学科学院生物工程研究所，北京）采用ＰＣＲ方法快速鉴定转基因鼠是目前较为常用的方法。但剪取鼠尾提取ＤＮＡ做模板则较为费时、费力，它需要蛋白酶... 快速提取基因组ＤＮＡ鉴定转基因鼠卢一凡，邓继光，肖成祖，马清钧，王冬平（军事医学科学院生物工程研究所，北京）采用ＰＣＲ方法快速鉴定转基因鼠是目前较为常用的方法。但剪取鼠尾提取ＤＮＡ做模板则较为费时、费力，它需要蛋白酶Ｋ消化过夜，然后酚／氯仿抽提等程序... 展开更多

关键词 转基因鼠 巨大 大批量 快速鉴定 PCR方法 基因组dna 快速提取 剪取 消化 筛选

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有效提取病毒诱导基因沉默植株中DNA的方法

11

作者 何秀霞 于源华 +1 位作者 果洪宇 张淑华 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期726-729,共4页

根据PCR反应的要求,用改良的CTAB法,以番茄植株为材料,实现了微量番茄叶片基因组DNA的快速提取。提取基因组DNA所用的组织量少,所得的DNA经过电泳检测虽有降解,但足以用于PCR检测,以其作模板扩增中国番茄黄化曲叶病毒诱导的硫黄素酶(Su... 根据PCR反应的要求,用改良的CTAB法,以番茄植株为材料,实现了微量番茄叶片基因组DNA的快速提取。提取基因组DNA所用的组织量少,所得的DNA经过电泳检测虽有降解,但足以用于PCR检测,以其作模板扩增中国番茄黄化曲叶病毒诱导的硫黄素酶(Su)基因沉默植株中病毒组分中的DNAmβ和1.7A,片段大小分别为1300、500bp。测序结果证明是相应基因的部分片段。该方法的材料不需要使用液氮,可以单人大批量提取,并在基因沉默的番茄植株中能稳定而准确的规模化PCR检测。 展开更多

关键词 PCR dna微量提取方法 番茄

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转基因植物快速检测方法的研究 被引量：16

12

作者 谢为龙 陈其文 +4 位作者 喻国泉 李冠雄 乐海洋 谭群英 廖力 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期39-42,46,共5页

本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取... 本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取。利用复合PCR法可在同一反应管中同步检测 35S、NOS及CP4-EPSPS基因 ,明显提高了检测效率。应用本试验建立的DNA快速提取 -复合PCR扩增 -银染检测技术可在 6小时内得出结果 ,达到了快速、简便、灵敏、可靠的检测目的。 展开更多

关键词 转基因植物 快速检测方法 dna快速提取法 复合PCR 银染

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一种简便快速制备水稻PCR模板的方法及其应用 被引量：6

13

作者 杨杰 仲维功 +4 位作者 王才林 陈志德 赵凌 朱镇 张亚东 《江西农业学报》 CAS 2005年第4期75-78,共4页

关键词 水稻基因组 PCR模板 分子标记辅助选择育种 dna提取方法 应用 快速制备 简便 种子纯度鉴定 SSR标记 生物学实验

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SSR技术在玉米种子纯度鉴定上的应用(上) 被引量：17

14

作者 辛景树 郭景伦 贾希海 《种子科技》 2005年第3期155-157,共3页

在对玉米种子纯度检测方法进行了广泛的调研与比较后,选定SSR方法进行优化研究,建立了新的玉米单株幼苗DNA提取方法,优化了操作系统,验证了技术的成熟性,筛选出了8对核心引物,用于192个杂交玉米组合的纯度检测工作,探索出了一套玉米种... 在对玉米种子纯度检测方法进行了广泛的调研与比较后,选定SSR方法进行优化研究,建立了新的玉米单株幼苗DNA提取方法,优化了操作系统,验证了技术的成熟性,筛选出了8对核心引物,用于192个杂交玉米组合的纯度检测工作,探索出了一套玉米种子纯度快速检测新方法。 展开更多

关键词 种子纯度鉴定 SSR技术 dna提取方法 应用 检测方法 优化研究 操作系统 检测工作 杂交玉米 快速检测 成熟性 幼苗 单株

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福建省农业科学院茶叶研究所发明专利介绍(五)

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《茶叶学报》 2017年第2期92-92,共1页

1.一种快速鉴定茶树种质乌龙茶适制性的分子标记方法 授权编号：ZL201510339164.1 本发明提供一种快速鉴定茶树种质乌龙茶适制性的分子标记方法,包括以下步骤：（1）待鉴定茶树种质基因组DNA提取;（2）特定的SSR荧光标记引物合成;（3... 1.一种快速鉴定茶树种质乌龙茶适制性的分子标记方法 授权编号：ZL201510339164.1 本发明提供一种快速鉴定茶树种质乌龙茶适制性的分子标记方法,包括以下步骤：（1）待鉴定茶树种质基因组DNA提取;（2）特定的SSR荧光标记引物合成;（3）以待鉴定茶树种质基因组DNA为模板,利用特定的SSR荧光标记引物进行PCR扩增。 展开更多

关键词 茶叶研究所 农业科学院 专利介绍 发明 基因组dna提取 福建省 分子标记方法 快速鉴定

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