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过表达DLL3促进人胃癌细胞的增殖 被引量:5
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作者 胡冰心 叶健斌 +7 位作者 邱晓媚 林彦青 吴丹琳 温俊杰 罗美群 宁立军 李妍 宁云山 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期14-19,共6页
目的构建人全长DLL3的真核表达质粒,并分析上调和下调DLL3对人胃癌细胞增殖的影响。方法采用PCR扩增人全长DLL3基因并克隆至真核表达载体pCMV-Tag4中,通过酶切及测序鉴定后,瞬时转染HEK293T细胞,并以转染pCMV-Tag4质粒和无转染HEK293T... 目的构建人全长DLL3的真核表达质粒,并分析上调和下调DLL3对人胃癌细胞增殖的影响。方法采用PCR扩增人全长DLL3基因并克隆至真核表达载体pCMV-Tag4中,通过酶切及测序鉴定后,瞬时转染HEK293T细胞,并以转染pCMV-Tag4质粒和无转染HEK293T细胞分别为阴性对照和空白对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot鉴定人全长DLL3基因的表达;进一步通过qRT-PCR和Western blot检测人DLL3在人正常口腔上皮细胞GES-1和AGS等3株胃癌细胞中的表达差异;当人DLL3/pCMV-Tag4瞬时转染3株胃癌细胞后,利用MTT检测DLL3过表达后胃癌细胞的增殖;同时,特异性人DLL3si RNA转染人胃癌细胞MGC803和MKN45,利用MTT检测DLL3下调后胃癌细胞的增殖。结果成功构建了人全长DLL3/pCMV-Tag4重组质粒,转染HEK293T细胞24 h后,qRT-PCR和Western blot表明DLL3在m RNA和蛋白水平上的表达显著高于对照组;MTT细胞增殖实验显示:过表达DLL3促进胃癌细胞的增殖,下调DLL3后抑制胃癌细胞的增殖。结论成功构建了人全长DLL3/pCMV-Tag4真核表达质粒并在HEK293T细胞中获得表达,过表达DLL3促进胃癌细胞的增殖,下调DLL3抑制胃癌细胞的增殖,本研究为以DLL3为新靶点对胃癌进行靶向治疗提供新思路。 展开更多
关键词 dll3 真核表达 胃癌细胞 增殖
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DLL3蛋白在人小细胞肺癌细胞中的功能及其机制 被引量:2
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作者 辜冲 王慧选 +3 位作者 李影 万玉峰 陈松 郑玉龙 《科学技术与工程》 北大核心 2019年第21期104-109,共6页
为探讨DLL3(human notch ligand delta-like 3)过表达对人小细胞肺癌细胞的影响及可能的作用机制,通过PCR方法扩增人DLL3基因全长序列,并克隆至慢病毒表达载体Lenti-EFS-FLAG-puro而构建人DLL3基因过表达慢病毒表达质粒,酶切及测序鉴定... 为探讨DLL3(human notch ligand delta-like 3)过表达对人小细胞肺癌细胞的影响及可能的作用机制,通过PCR方法扩增人DLL3基因全长序列,并克隆至慢病毒表达载体Lenti-EFS-FLAG-puro而构建人DLL3基因过表达慢病毒表达质粒,酶切及测序鉴定质粒正确。通过慢病毒包装及感染,构建DLL3稳定过表达的人小细胞肺癌细胞株,并通过Western blot验证DLL3蛋白的表达。采用CCK-8法检测DLL3过表达对人小细胞肺癌细胞的增殖的影响。采用平板克隆实验检测DLL3过表达对人小细胞肺癌细胞的克隆形成的影响。Western blot检测DLL3过表达对细胞周期相关蛋白CyclinD1,CyclinD3的表达水平的影响。结果表明:人DLL3过表达慢病毒表达质粒构建成功;CCK-8实验显示DLL3过表达促进人小细胞肺癌细胞的增殖。平板克隆实验显示DLL3过表达提高人小细胞肺癌细胞的克隆形成能力。Western blot结果表明DLL3过表达增加细胞周期蛋白CyclinD1,CyclinD3的表达水平。可见DLL3过表达对人小细胞肺癌细胞的增殖具有促进作用。 展开更多
关键词 dll3 慢病毒表达载体 小细胞肺癌 增殖
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中英文对照名词词汇
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《中国现代神经疾病杂志》 北大核心 2025年第2期160-160,共1页
血红素加氧酶‐1 heme oxygenase‐1(HO‐1)循环神经网络recurrent neural network(RNN)烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)Delta样蛋白3 delta‐like protein 3(DLL3)液相色谱‐质谱liquid c... 血红素加氧酶‐1 heme oxygenase‐1(HO‐1)循环神经网络recurrent neural network(RNN)烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)Delta样蛋白3 delta‐like protein 3(DLL3)液相色谱‐质谱liquid chromatography/mass spectrometry(LC/MS)医学路径语言模型medical pathways language model(Med‐PaLM). 展开更多
关键词 NADPH dll3 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 RNN 循环神经网络
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