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乳清蛋白肽的酶法制备、分离纯化及活性评价 被引量:8
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作者 任娇艳 赖婷 +3 位作者 江燕清 卢韵君 刘鹏 廖文镇 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期1-7,共7页
以抗氧化活性及蛋白质回收率为筛选指标对乳清蛋白肽酶解工艺进行优化,用层析柱对酶解液进行逐级分离纯化,并对其分子质量进行检测.研究结果表明:利用胰酶、复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解制备乳清蛋白肽,最佳用酶为碱性... 以抗氧化活性及蛋白质回收率为筛选指标对乳清蛋白肽酶解工艺进行优化,用层析柱对酶解液进行逐级分离纯化,并对其分子质量进行检测.研究结果表明:利用胰酶、复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解制备乳清蛋白肽,最佳用酶为碱性蛋白酶、最适底物含量为4.0%、最适加酶量为8000U/g、最佳酶解时间为4h;酶解液经DEAE-52纤维素层析后得到的A组分抗氧化活性最好,其还原力为0.320 0±0.004 1,DPPH自由基清除率为6.58%±0.36%;A组分再经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析柱分离纯化后得到组分G,其DPPH自由基清除率为6.73%±0.083%;组分G的主要成分为分子质量378 u的肽段,其一级氨基酸组成为赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)及丝氨酸(Ser). 展开更多
关键词 乳清蛋白 酶解 分离 纯化 活性评价 deae-52离子交换柱层析 SEPHADEX G-15葡聚糖凝胶柱层析
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鲍曼不动杆菌烈性噬菌体的分离与纯化 被引量:8
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作者 梁莉 杨洪江 金鑫 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期88-90,93,共4页
利用柱层析方法,纯化鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)烈性噬菌体AB1。首先采用聚乙二醇6000沉淀方法,初步分离裂解液中的噬菌体,噬菌体纯度由6.1×1010 pfu/mg提高到37×1010 pfu/mg,噬菌体回收率为58.8%,蛋白质去除率为... 利用柱层析方法,纯化鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)烈性噬菌体AB1。首先采用聚乙二醇6000沉淀方法,初步分离裂解液中的噬菌体,噬菌体纯度由6.1×1010 pfu/mg提高到37×1010 pfu/mg,噬菌体回收率为58.8%,蛋白质去除率为90.6%;噬菌体粗提样品经Sepharose 4B凝胶过滤层析柱进一步纯化,纯度提高到73×1010 pfu/mg,噬菌体回收率为95.7%,蛋白质去除率为48.1%;收集的噬菌体样品最后经DEAE-52阴离子交换层析柱处理,噬菌体纯度为40×1010 pfu/mg,回收率为50.8%,蛋白去除率15.6%。内毒素分析结果显示,Sepharose 4B凝胶过滤层析纯化的噬菌体样品中,内毒素含量为443.8 EU/mg,而DEAE-52阴离子交换层析纯化的噬菌体样品中,内毒素含量为544.4 EU/mg。实验结果显示,PEG沉淀方法与Sepharose 4B凝胶过滤方法能够有效地提高噬菌体纯度,而DEAE-52阴离子交换层析则不能提高噬菌体的纯度,也无法有效地去除样品中的内毒素。 展开更多
关键词 噬菌体 聚乙二醇6000 凝胶过滤 deae-52离子交换
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毛栓菌木聚糖酶的纯化
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作者 柏玉洁 朱启忠 +2 位作者 陈晚华 王旭 任延刚 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第19期7961-7962,7964,共3页
[目的]进一步研究毛栓菌木聚糖酶的酶学性质。[方法]对毛栓菌木聚糖酶的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析S、ephadexG100柱层析3步纯化,探讨木聚糖酶的产酶曲线及纯化方法。[结果]毛栓菌在最适培养基中培养时,木聚... [目的]进一步研究毛栓菌木聚糖酶的酶学性质。[方法]对毛栓菌木聚糖酶的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析S、ephadexG100柱层析3步纯化,探讨木聚糖酶的产酶曲线及纯化方法。[结果]毛栓菌在最适培养基中培养时,木聚糖酶活力从第2天迅速提升,第8天达高峰,随后下降。经饱和度为30%~70%的硫酸铵分级沉淀后,酶活力回收率为84.931%,蛋白质含量为粗酶液的24.640%,纯化倍数为3.445。经DEAE-纤维素离子交换层析后,酶活力回收率为44.345%,酶蛋白纯化倍数为11.772。经SephadexG100柱层析后,酶活力回收率为20.201%,酶蛋白纯化倍数为16.123。[结论]毛栓菌木聚糖酶的粗酶液经过3步纯化后,酶活力回收率达20.201%,酶蛋白纯化倍数达16.123。 展开更多
关键词 毛栓菌 木聚糖酶 纯化 硫酸铵分级沉淀 deae-纤维素离子交换柱层 SephadexG100柱层析
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