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豆豉纤溶酶Subtilisin FS33的提取纯化与鉴定 被引量:7
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作者 王成涛 籍保平 +2 位作者 曹雁平 孙宝国 张慧 《中国酿造》 CAS 北大核心 2009年第2期29-33,共5页
探讨了凝胶层析法提取纯化新型纤溶酶Subtilisin FS33的方法。芽胞杆菌(Bacillus subtilis)DC33发酵液或固态豆豉抽提液在30%~65%硫酸铵饱和度下分段盐析沉淀,再经DEAE-Sepharose FF、Phenyl Sepharose 6FF、Sephadex G-50连续凝胶层... 探讨了凝胶层析法提取纯化新型纤溶酶Subtilisin FS33的方法。芽胞杆菌(Bacillus subtilis)DC33发酵液或固态豆豉抽提液在30%~65%硫酸铵饱和度下分段盐析沉淀,再经DEAE-Sepharose FF、Phenyl Sepharose 6FF、Sephadex G-50连续凝胶层析纯化,得到电泳纯纤溶酶Subtilisin FS33,其最终纯化倍数和回收率分别达到34.6倍和13.0%,酶蛋白比活力达到15495U/mg。该酶在还原和非还原条件下SDS-PAGE电泳分析均呈现单一条带,分子量为30kDa;活性电泳FS33凝胶条带在纤维蛋白平板上也表现出强烈纤溶活性。 展开更多
关键词 纤溶酶 芽胞杆菌dc33 凝胶层析 电泳 纯化 纤溶活性
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正交旋转组合设计优化豆豉纤溶酶Subtilisin FS33的培养条件
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作者 王成涛 籍保平 +2 位作者 孙宝国 曹雁平 李涛 《中国调味品》 CAS 北大核心 2009年第6期50-53,共4页
从中国传统豆豉中分离筛选出一株高产纤溶酶菌株Bacillus subtilis DC33,并研究营养和环境因素条件对DC33产酶的影响。在单因素水平试验基础上,选择对DC33产纤溶酶影响较大的聚蛋白胨、半乳糖、硫酸镁、硫酸锂和吐温80五因素,通过正交... 从中国传统豆豉中分离筛选出一株高产纤溶酶菌株Bacillus subtilis DC33,并研究营养和环境因素条件对DC33产酶的影响。在单因素水平试验基础上,选择对DC33产纤溶酶影响较大的聚蛋白胨、半乳糖、硫酸镁、硫酸锂和吐温80五因素,通过正交旋转组合设计得到DC33产酶活力与营养因素水平的回归方程,极值分析得DC33优化发酵培养基(g/L):聚蛋白胨22,半乳糖1.56,硫酸镁0.5,硫酸锂0.01,K2HPO42.0,NaH2PO41.0,CaCO32.0,吐温80 0.33 mL。在此条件下,DC33产纤溶酶达到780 U/mL,较优化前提高86.7%。 展开更多
关键词 豆豉纤溶酶 BACILLUS SUBTILIS dc33 正交旋转组合设计 发酵培养基优化
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