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题名定点突变提高D-氨甲酰水解酶的可溶性表达
被引量：1
- 1
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作者
袁野
蔡渊恒
姜世民
姜卫红
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机构
吉林大学畜牧兽医学院
中科院植物生理生态研究所
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期94-98,共5页
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基金
中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-YW-G-018)
国家重点基础发展研究计划(2007CB707803)
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文摘
采用定点突变的方法对皮氏伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pickettii)来源的D-氨甲酰水解酶(D-carbamoylase,DCase)编码基因的3个位点A18、Y30、K34进行突变,并将获得的突变体基因片段构建入高表达载体pET-28b中,转化E.coliBL21(DE3),获得带有组合三突变(A18E/Y30D/K34E)的DCase-SM表达菌株BL21/pET-DCSM。当以IPTG诱导目的蛋白表达时,发现突变菌株(DCase-SM)与出发菌株(DCase)菌株相比,目的蛋白的可溶性表达显著提高,其可溶蛋白比例约为64%;与出发菌株相比,其单位菌体酶活增加427%;另外,与本实验室前期构建的高可溶性三叠加突变体菌株DCase-M3相比,单位菌体酶活亦增加7.9%。
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关键词
d-氨甲酰水解酶
定点突变
诱导表达
可溶性
酶活
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Keywords
d-carbamoylase Site-directed mutagenesis Induced expression Solubility Enzyme activity
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名微生物酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展
被引量：6
- 2
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作者
李业英
阚振荣
朱宝成
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机构
河北大学生命科学学院微生物学
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出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2003年第6期11-13,F003,共4页
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文摘
D_对羟基苯甘氨酸 (D_p_HPG)是半合成青霉素和头孢霉素的重要前体。综述了微生物酶法生产D_对羟基苯甘氨酸的方法种类及其优缺点并对酶的来源即菌种的选育方法做了总结。此外 。
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关键词
d-对羟基苯甘氨酸
d-海因酶
d-氨甲酰水解酶
hyu基因族
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Keywords
d-hydroxyphenylglycine
d-hydantoinase
d-carbamoylase
hyu gene clusters
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分类号
Q814
[生物学—生物工程]
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题名酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展
被引量：3
- 3
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作者
阚振荣
李业英
朱宝成
周海霞
梁利华
张金平
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机构
河北大学生命科学学院
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出处
《河北大学学报（自然科学版）》
CAS
2004年第2期207-211,共5页
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文摘
介绍了酶法生产D -对羟基苯甘氨酸的研究现状 .综述了酶法生产D -对羟基苯甘氨酸的方法种类及其优缺点并对酶的来源即菌种的筛选方法做了总结 .此外 ,还简介了基因工程领域内的研究状况 .
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关键词
d-对羟基苯甘氨酸
d-海因酶
d-氨甲酰水解酶
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Keywords
d-p-HPG
d-Hydantoinase
d-Carbamoylase
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分类号
Q936
[生物学—微生物学]
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题名D-对羟基苯甘氨酸生产菌株的选育方法探讨
被引量：1
- 4
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作者
李业英
阚振荣
朱宝成
张金平
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机构
河北大学生命科学学院
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出处
《河北大学学报（自然科学版）》
CAS
2004年第5期521-525,共5页
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文摘
利用国际上通用的以底物———对羟基苯海因(HPH)为惟一氮源的培养基从69个土壤样品和3个水样中初步分离出238个菌株,然后利用双层琼脂法和微孔快速筛选法对分离到的菌株和实验室保藏的220多株菌进行反复筛选,最终获得D＿海因酶阳性菌株54株.用茚三酮显色法及纸层析法从这54株菌中筛选到2株产N＿氨甲酰水解酶的阳性菌株,从而获得了可同时产生D＿海因酶(DHase)和D＿氨甲酰水解酶(DCase)的菌株.
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关键词
d-海因酶
d-氨甲酰水解酶
DL-对羟基苯海因
d-对羟基苯甘氨酸
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Keywords
DHase
DCase
DL_HPH
D_p_HPG
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分类号
Q933
[生物学—微生物学]
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