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猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测
被引量：
4
1
作者
郑仲华
李东升
+6 位作者
姚俊庸
常艳
勾红潮
刘文俊
赵明秋
毛晶丹
陈金顶
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第5期12-16,共5页
本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒(CSFV)C株E2基因的主要抗原片段A/D区549bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB...
本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒(CSFV)C株E2基因的主要抗原片段A/D区549bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序。将测序正确的菌液划板,挑菌培养并用IPTG进行诱导表达。得到的蛋白进行SDS-PAGE,在约39ku位置有蛋白条带。将蛋白纯化后,分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Western blotting检测,可见在39ku处有单一条带,表明表达的蛋白具有免疫原性。本试验结果为下一步ELSIA试剂盒的组装奠定基础,方便对猪场免疫猪群猪瘟抗体水平进行监控。
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关键词
猪瘟病毒C株
A
d主要抗原区
截短表达
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职称材料
题名
猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测
被引量：
4
1
作者
郑仲华
李东升
姚俊庸
常艳
勾红潮
刘文俊
赵明秋
毛晶丹
陈金顶
机构
华南农业大学兽医学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第5期12-16,共5页
基金
公益性行业(农业)科研专项(201203056)
国家基金面上项目(31172321)
广东省高等学校科技创新(重点)项目(2012CXZD0013)
文摘
本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒(CSFV)C株E2基因的主要抗原片段A/D区549bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序。将测序正确的菌液划板,挑菌培养并用IPTG进行诱导表达。得到的蛋白进行SDS-PAGE,在约39ku位置有蛋白条带。将蛋白纯化后,分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Western blotting检测,可见在39ku处有单一条带,表明表达的蛋白具有免疫原性。本试验结果为下一步ELSIA试剂盒的组装奠定基础,方便对猪场免疫猪群猪瘟抗体水平进行监控。
关键词
猪瘟病毒C株
A
d主要抗原区
截短表达
Keywords
classical swine fever virus （CSFV） C strain
A/
d
antigen
d
omains
truncate
d
expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测
郑仲华
李东升
姚俊庸
常艳
勾红潮
刘文俊
赵明秋
毛晶丹
陈金顶
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
4
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