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猪囊尾蚴cDNA表达文库构建及抗原基因筛选
被引量：
12
1
作者
沈斌
高荣
+2 位作者
朱锦
魏竹波
刘世贵
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第6期57-59,共3页
采用Ｑｕｉｃｋ Ｐｒｅｐ ｍ ＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 试剂盒提取猪囊尾蚴ｍ ＲＮＡ；Ｔｉｍ ｅ－ Ｓａｖｅｒ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒反转录合成双链ｃＤＮＡ，并在末端加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩａｄａｐｔｏｒ，...
采用Ｑｕｉｃｋ Ｐｒｅｐ ｍ ＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 试剂盒提取猪囊尾蚴ｍ ＲＮＡ；Ｔｉｍ ｅ－ Ｓａｖｅｒ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒反转录合成双链ｃＤＮＡ，并在末端加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩａｄａｐｔｏｒ，修饰后的ｃＤＮＡ 与λｇｔｌｌＥｃｏＲＩ臂连接，体外包装为λ噬菌体颗粒；感染Ｅ．ｃｏｌｉＹ１０９０ 构建成功库容量为２×１０６、重组率为８０％ 的ｃＤＮＡ表达文库。利用兔抗猪囊尾蚴虫体抗原和囊液抗原血清分别对一部分文库进行免疫印迹筛选，分别获得８ 个阳性克隆。提取阳性克隆ＤＮＡ，利用ＰＣＲ法从重组噬菌体ＤＮＡ中扩增出ｃＤＮＡ片段，长度自４００—９００ｂｐ。本文工作为研制猪囊尾蚴核酸疫苗打下了基础。
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关键词
猪囊尾蚴
cdna
表达文库
抗原基因
筛选
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职称材料
从大肠癌组织cDNA表达文库筛选肿瘤抗原基因
被引量：
6
2
作者
何敬东
周高速
+4 位作者
肖冰
李旭
刘宇虎
张振书
南清振
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期382-384,共3页
目的利用肿瘤患者血清筛选大肠癌cDNA噬菌体表达文库,寻找肿瘤特异性抗原基因。方法采用SMART技术构建中国人大肠癌cDNA噬菌体表达文库。用SEREX方法筛选中国人大肠癌组织cDNA噬菌体表达文库。对获得的阳性克隆片段进行测序、鉴定和BLAS...
目的利用肿瘤患者血清筛选大肠癌cDNA噬菌体表达文库,寻找肿瘤特异性抗原基因。方法采用SMART技术构建中国人大肠癌cDNA噬菌体表达文库。用SEREX方法筛选中国人大肠癌组织cDNA噬菌体表达文库。对获得的阳性克隆片段进行测序、鉴定和BLAST同源性比较,并对其生物信息进行分析。结果成功地构建了大肠癌cDNA噬菌体表达文库,原始文库含2.39×106个重组子,重组率达到97.5%,文库扩增后滴度达到4.1×1010pfu/ml。插入外源性cDNA片段的大小为0.5～4.0kb。SEREX筛选共获得16个阳性克隆,代表12个不同抗原基因,其中10个基因片段为已知抗原基因,如IFITM1、CD24、Survivin、KLK6等,2个为未知EST片段。根据序列分析,筛选出的抗原基因有结构基因、调节基因、代谢相关基因等。结论利用SEREX方法筛选出大肠肿瘤相关抗原基因并获得2个肿瘤抗原候选基因。
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关键词
结直肠肿瘤
SEREX抗原基因
cdna
表达文库
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职称材料
题名
猪囊尾蚴cDNA表达文库构建及抗原基因筛选
被引量：
12
1
作者
沈斌
高荣
朱锦
魏竹波
刘世贵
机构
四川大学草原生防工程国家实验室
四川省凉山州兽医防疫站
出处
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第6期57-59,共3页
文摘
采用Ｑｕｉｃｋ Ｐｒｅｐ ｍ ＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 试剂盒提取猪囊尾蚴ｍ ＲＮＡ；Ｔｉｍ ｅ－ Ｓａｖｅｒ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒反转录合成双链ｃＤＮＡ，并在末端加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩａｄａｐｔｏｒ，修饰后的ｃＤＮＡ 与λｇｔｌｌＥｃｏＲＩ臂连接，体外包装为λ噬菌体颗粒；感染Ｅ．ｃｏｌｉＹ１０９０ 构建成功库容量为２×１０６、重组率为８０％ 的ｃＤＮＡ表达文库。利用兔抗猪囊尾蚴虫体抗原和囊液抗原血清分别对一部分文库进行免疫印迹筛选，分别获得８ 个阳性克隆。提取阳性克隆ＤＮＡ，利用ＰＣＲ法从重组噬菌体ＤＮＡ中扩增出ｃＤＮＡ片段，长度自４００—９００ｂｐ。本文工作为研制猪囊尾蚴核酸疫苗打下了基础。
关键词
猪囊尾蚴
cdna
表达文库
抗原基因
筛选
Keywords
cysticercus
cellulasae
\
cdna
expression
library
\
antigenic
genes
分类号
R383.34 [医药卫生—医学寄生虫学]
R532.330.1 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
从大肠癌组织cDNA表达文库筛选肿瘤抗原基因
被引量：
6
2
作者
何敬东
周高速
肖冰
李旭
刘宇虎
张振书
南清振
机构
南方医科大学南方医院消化内科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期382-384,共3页
基金
国家自然科学基金资助课题(编号30171053)
文摘
目的利用肿瘤患者血清筛选大肠癌cDNA噬菌体表达文库,寻找肿瘤特异性抗原基因。方法采用SMART技术构建中国人大肠癌cDNA噬菌体表达文库。用SEREX方法筛选中国人大肠癌组织cDNA噬菌体表达文库。对获得的阳性克隆片段进行测序、鉴定和BLAST同源性比较,并对其生物信息进行分析。结果成功地构建了大肠癌cDNA噬菌体表达文库,原始文库含2.39×106个重组子,重组率达到97.5%,文库扩增后滴度达到4.1×1010pfu/ml。插入外源性cDNA片段的大小为0.5～4.0kb。SEREX筛选共获得16个阳性克隆,代表12个不同抗原基因,其中10个基因片段为已知抗原基因,如IFITM1、CD24、Survivin、KLK6等,2个为未知EST片段。根据序列分析,筛选出的抗原基因有结构基因、调节基因、代谢相关基因等。结论利用SEREX方法筛选出大肠肿瘤相关抗原基因并获得2个肿瘤抗原候选基因。
关键词
结直肠肿瘤
SEREX抗原基因
cdna
表达文库
Keywords
colorectal neoplasms
SEREX (serological identification of antigens by recombinant
expression
cloning)
antigenic
gene
cdna
expression
library
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪囊尾蚴cDNA表达文库构建及抗原基因筛选
沈斌
高荣
朱锦
魏竹波
刘世贵
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999
12
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
从大肠癌组织cDNA表达文库筛选肿瘤抗原基因
何敬东
周高速
肖冰
李旭
刘宇虎
张振书
南清振
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
6
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