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Ⅱ型鲤疱疹病毒研究进展
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作者 林润鑫 李活 +1 位作者 郑佩明 张婧 《黑龙江水产》 2025年第3期271-275,共5页
鲫(Cyprinus auratus)作为重要的水产养殖品种,近年来因Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirusⅡ, CyHV-Ⅱ)引发的造血器官坏死病面临严重威胁,其暴发可导致80%~90%的死亡率,对产业造成巨大经济损失。文章系统综述了CyHV-Ⅱ的病原学特性... 鲫(Cyprinus auratus)作为重要的水产养殖品种,近年来因Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirusⅡ, CyHV-Ⅱ)引发的造血器官坏死病面临严重威胁,其暴发可导致80%~90%的死亡率,对产业造成巨大经济损失。文章系统综述了CyHV-Ⅱ的病原学特性、传播机制、宿主免疫应答及防控策略的研究进展,以期为该病的综合防控提供理论依据。CyHV-Ⅱ属异样疱疹病毒科,为双链DNA病毒,直径约90 nm~120 nm,表面含gB、gL等关键膜糖蛋白。病毒通过水平(水体)和垂直(亲代至子代)传播扩散,其中gB蛋白与宿主鳃组织Nectin受体结合是其入侵宿主细胞的关键步骤。病毒在宿主细胞内利用DNA聚合酶完成复制,并通过出芽释放新病毒粒子。研究发现,30 d龄异育银鲫感染后致死率高达90%~100%,而180 d龄个体则表现为典型病理症状,如肝组织黄化、体表充血等。宿主免疫机制方面,鲫通过先天性免疫(Toll样受体识别病毒DNA、干扰素通路激活)和适应性免疫(T/B淋巴细胞介导的抗体产生及细胞凋亡)双重途径抵御感染。然而,黑鲫等品种因炎症因子表达不足导致免疫应答延迟,易感性较高。针对病毒免疫逃逸,研究鉴定出ORF92、ORF25等8种免疫原性蛋白,为疫苗研发提供了靶点。检测技术方面,基于ELISA和PCR的方法已广泛应用。巢式PCR技术灵敏度达3×10~2 bp/μL,可实现早期快速诊断。防控策略以免疫增强剂和疫苗为核心:甘露寡糖、紫锥菊提取物等通过激活Toll样受体通路提升宿主免疫力;灭活疫苗、重组口服疫苗(如展示ORF132的酵母疫苗)可使存活率提升至64%~71.4%。药物治疗中,穿心莲、黄芪等中草药及小檗碱通过调节免疫显著降低死亡率,其中穿心莲定制饲料投喂60 d后存活率达85%。未来研究需聚焦以下方向:1)解析CyHV-Ⅱ基因组特性及进化规律,比较不同毒株遗传差异;2)探究水质、温度等环境因子对病毒传播及宿主免疫的影响;3)开发高灵敏度检测技术;4)优化疫苗设计以提高保护效价。通过多学科交叉攻关,有望为鲫鱼健康养殖及CyHV-Ⅱ的精准防控提供新思路。 展开更多
关键词 鲫(Cyprinus auratus) 型鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirus cyhv-) 造血器官坏死病 免疫机制 疫苗开发 综合防控
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鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4基因的克隆、表达与免疫学检测方法 被引量:12
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作者 周勇 范玉顶 +4 位作者 徐进 马杰 江南 刘文枝 曾令兵 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2017年第1期61-65,共5页
根据鲤疱疹病毒II型(Cyprinid herpesvirus Ⅱ,Cy HV-2)ORF 4基因序列(Gen Bank:JQ815364.1)设计特异性引物,PCR扩增得到ORF 4基因编码框全长序列1 041 bp,将其克隆至原核表达载体p ET-32a(+)中,构建了重组原核表达载体p ET-32a-ORF 4。... 根据鲤疱疹病毒II型(Cyprinid herpesvirus Ⅱ,Cy HV-2)ORF 4基因序列(Gen Bank:JQ815364.1)设计特异性引物,PCR扩增得到ORF 4基因编码框全长序列1 041 bp,将其克隆至原核表达载体p ET-32a(+)中,构建了重组原核表达载体p ET-32a-ORF 4。将p ET-32a-ORF 4重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到融合表达的重组蛋白,融合表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,其分子质量约为57 ku,与预期大小一致。将纯化的重组蛋白免疫日本大耳兔,制备了多克隆抗体,ELISA检测抗体效价大于1∶50 000,Western blot检测显示该抗体可以特异性识别重组蛋白。间接免疫荧光检测结果表明:该多克隆抗体可与由Cy HV-2感染引起细胞病变的异育银鲫脑组织细胞(GICB)发生特异性的结合。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒 ORF4 原核表达 多克隆抗体 免疫荧光检测
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异育银鲫造血器官坏死症病鱼体内鲤疱疹病毒Ⅱ型的电镜观察与超微病理学特征 被引量:6
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作者 林秀秀 叶元土 +9 位作者 吴萍 腾峰 王敏 蒋蓉 段荣会 陈卓 高李松 刘进 蔡春芳 罗其刚 《水产学杂志》 CAS 2016年第1期17-23,共7页
为分析患鲫造血器官坏死症异育银鲫Carassius auratus gibelio体内不同器官组织中鲤疱疹病毒(CyHV-2)粒子的形态结构、分布和发生过程,采集患病异育银鲫体肾、脾脏、头肾、肝胰脏、肠道、鳃各组织样本,利用透射电镜观察疱疹病毒和组... 为分析患鲫造血器官坏死症异育银鲫Carassius auratus gibelio体内不同器官组织中鲤疱疹病毒(CyHV-2)粒子的形态结构、分布和发生过程,采集患病异育银鲫体肾、脾脏、头肾、肝胰脏、肠道、鳃各组织样本,利用透射电镜观察疱疹病毒和组织细胞超微病理学。在所采集器官组织中均观察到鲤疱疹病毒Ⅱ型的DNA内核、空衣壳、实心核衣壳、含包膜成熟病毒共4种不同成熟时期的病毒粒子,不同时期的病毒粒子直径分别为65-90nm、90-180nm、90-180nm、170-220nm;体肾和脾脏中含有大量的Cy HV-2病毒,而头肾、肝胰脏、肠道和鳃中病毒粒子较少;CyHV-2病毒主要感染体肾、头肾、脾脏的吞噬细胞,导致机体免疫机能改变;组织细胞病理学观察发现吞噬细胞核边缘化,核内染色质变性,核膜溶解,线粒体嵴断裂,出现空泡,个别细胞溶解坏死。通过PCR检测和电镜观察病毒粒子结构特征,确诊异育银鲫感染Cy HV-2病毒,主要器官组织细胞中均有CyHV-2病毒,且在细胞核中完成复制和组装,在细胞质中获得外膜。感染Cy HV-2病毒的异育银鲫主要器官组织均受到一定的损伤。 展开更多
关键词 异育银鲫 鲤疱疹型病毒(cyhv-2) 鲤出血病 超微结构
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鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其免疫原性分析
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作者 孟少东 姜新宇 +4 位作者 葛恒 胡光耀 杨大佐 张家林 李强 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期393-398,共6页
为进一步研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF4蛋白的功能,通过PCR扩增CyHV-2 ORF4基因,并构建重组穿梭质粒pFastBac HTA-ORF4,将其转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞后获得重组杆粒Bacmid-ORF4;采用脂质体法转染Sf9... 为进一步研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF4蛋白的功能,通过PCR扩增CyHV-2 ORF4基因,并构建重组穿梭质粒pFastBac HTA-ORF4,将其转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞后获得重组杆粒Bacmid-ORF4;采用脂质体法转染Sf9细胞后,利用间接免疫荧光法(IFA)和Western blot鉴定重组蛋白,采用His亲和层析柱纯化重组蛋白,并通过小鼠免疫试验分析其免疫原性。结果表明:转染72 h后Sf9细胞逐渐呈现出细胞变圆、细胞核明显增大的形态变化;间接免疫荧光结果显示,重组杆状病毒感染的Sf9细胞中出现了明显的绿色荧光;Western blot结果显示,纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能够与抗His单抗发生特异性反应;小鼠免疫试验显示,纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能诱导小鼠产生特异性免疫反应。研究表明,本研究中获得的CyHV-2 ORF4蛋白有较好的免疫原性,为CyHV-2 ORF4蛋白的功能解析提供了良好材料。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒型(cyhv-2) 杆状病毒表达 ORF4蛋白 免疫原性
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