期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
草鱼细胞系CIK酵母双杂交cDNA文库的构建及初步应用
1
作者
闫秀英
谢吉国
+4 位作者
李杰
丁燏
吴灶和
鲁义善
简纪常
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期128-133,共6页
旨在探索草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞蛋白质间的相互作用,运用SMART技术构建了草鱼肾组织细胞系CIK(Ctenopharyngodon idellus kidney)的酵母双杂交cDNA文库。提取CIK细胞总RNA后,分离纯化mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再...
旨在探索草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞蛋白质间的相互作用,运用SMART技术构建了草鱼肾组织细胞系CIK(Ctenopharyngodon idellus kidney)的酵母双杂交cDNA文库。提取CIK细胞总RNA后,分离纯化mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶作用下,通过长距离PCR,扩增双链cDNA。利用SMART技术,通过同源重组的方法,在酵母株Y187中构建了草鱼CIK细胞全长cDNA文库。经检测,未扩增文库的转化率为1.6×105,文库容量为2.4×106,插入的双链cDNA片段的长度为250-2 000 bp,文库滴度为7×107 CFU/mL,重组率为98%,此文库具有良好的cDNA片段多态性和完整性。利用构建的CIK酵母双杂交文库,以草鱼呼肠孤病毒的VP7和VP5蛋白作为诱饵进行筛选试验,得到VP7相互作用蛋白的阳性菌落,未得到VP5相互作用蛋白的阳性菌落。草鱼CIK细胞酵母双杂交cDNA文库的构建为研究草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞间的互作机制提供了重要研究工具。
展开更多
关键词
草鱼肾组织细胞系
酵母双杂交
CDNA文库
蛋白质互作
在线阅读
下载PDF
职称材料
绿色荧光蛋白在草鱼肾细胞中的表达
2
作者
郝贵杰
潘晓艺
+5 位作者
袁雪梅
姚嘉赟
徐洋
蔺凌云
尹文林
沈锦玉
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2013年第5期23-26,共4页
应用阳离子脂质体介导法,将含绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-N1转染到培养成单层的草鱼肾细胞(CIK)中,通过荧光倒置显微镜和特异性RT-PCR方法检测GFP的表达。在荧光倒置显微镜下可见CIK细胞的胞质和胞核均呈现绿色荧光,且细胞核的...
应用阳离子脂质体介导法,将含绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-N1转染到培养成单层的草鱼肾细胞(CIK)中,通过荧光倒置显微镜和特异性RT-PCR方法检测GFP的表达。在荧光倒置显微镜下可见CIK细胞的胞质和胞核均呈现绿色荧光,且细胞核的绿色荧光强度强于细胞质。转染细胞中的转录产物经RT-PCR扩增后,凝胶电泳鉴定出与GFP基因片段分子量大小一致的条带,经测序证明其为GFP基因序列。结果表明,GFP基因可以在草鱼CIK细胞内高效率成功表达,为构建以GFP为报告基因的真核重组质粒及研究草鱼出血病DNA疫苗奠定了重要的基础。
展开更多
关键词
绿色荧光蛋白
草鱼肾细胞
转染
草鱼出血病
在线阅读
下载PDF
职称材料
草鱼孕烷X受体与细胞色素P450 3A mRNA表达相关性初步研究
3
作者
符贵红
杨先乐
《海洋渔业》
CSCD
北大核心
2012年第1期76-82,共7页
根据GenBank中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)基因序列设计保守区域简并引物,通过PCR扩增获得草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA核苷酸序列片段为509 bp,经推导获取169 aa序...
根据GenBank中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)基因序列设计保守区域简并引物,通过PCR扩增获得草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA核苷酸序列片段为509 bp,经推导获取169 aa序列。对草鱼与其它物种PXR氨基酸序列进行同源性比较,用以鉴定其在物种中的进化。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测草鱼9种组织PXR和细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)基因mRNA相对含量,结果表明,其表达丰度依次为:前肠﹥肝脏﹥肾脏﹥鳃﹥肌肉﹥后肠﹥性腺﹥心脏﹥脾脏,CYP3A和PXR基因在草鱼组织中表达分布基本一致,在前肠、肝脏和肾脏高度表达,而在其它组织低度表达。为了进一步研究PXR和CYP3A基因表达相关性,通过细胞,特选用诱导剂利福平(rifampicin,RIF),最佳诱导浓度40μM,孵育1、2、4、6、8、10、12、24 h后,用qRT-PCR检测CYP3A-PXR基因动态表达过程。结果显示,诱导组CYP3A和PXR基因表达量均高于对照组,显示出显著诱导效应。
展开更多
关键词
草鱼
孕烷X受体
细胞色素P450
3A
草鱼肾细胞系
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
草鱼细胞系CIK酵母双杂交cDNA文库的构建及初步应用
1
作者
闫秀英
谢吉国
李杰
丁燏
吴灶和
鲁义善
简纪常
机构
广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省高等学校水产经济动物病害控制重点实验室
仲恺农业工程学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期128-133,共6页
基金
国家“973”计划项目(2009CB118704)
文摘
旨在探索草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞蛋白质间的相互作用,运用SMART技术构建了草鱼肾组织细胞系CIK(Ctenopharyngodon idellus kidney)的酵母双杂交cDNA文库。提取CIK细胞总RNA后,分离纯化mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶作用下,通过长距离PCR,扩增双链cDNA。利用SMART技术,通过同源重组的方法,在酵母株Y187中构建了草鱼CIK细胞全长cDNA文库。经检测,未扩增文库的转化率为1.6×105,文库容量为2.4×106,插入的双链cDNA片段的长度为250-2 000 bp,文库滴度为7×107 CFU/mL,重组率为98%,此文库具有良好的cDNA片段多态性和完整性。利用构建的CIK酵母双杂交文库,以草鱼呼肠孤病毒的VP7和VP5蛋白作为诱饵进行筛选试验,得到VP7相互作用蛋白的阳性菌落,未得到VP5相互作用蛋白的阳性菌落。草鱼CIK细胞酵母双杂交cDNA文库的构建为研究草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞间的互作机制提供了重要研究工具。
关键词
草鱼肾组织细胞系
酵母双杂交
CDNA文库
蛋白质互作
Keywords
ctenopharyngodon idellus kidney （ cik ）
Yeast two-hybrid
cDNA library
Protein interaction
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
绿色荧光蛋白在草鱼肾细胞中的表达
2
作者
郝贵杰
潘晓艺
袁雪梅
姚嘉赟
徐洋
蔺凌云
尹文林
沈锦玉
机构
浙江省淡水水产研究所
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2013年第5期23-26,共4页
基金
浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目(2012C12009-4)
浙江省公益技术研究农业项目(2012C22046)
+2 种基金
湖州市科技攻关计划项目(2011GG11)
宁波大学中央财政支持地方高校发展专项学科项目(xkc11010)
湖州市自然科学基金项目(2012YZ03)
文摘
应用阳离子脂质体介导法,将含绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-N1转染到培养成单层的草鱼肾细胞(CIK)中,通过荧光倒置显微镜和特异性RT-PCR方法检测GFP的表达。在荧光倒置显微镜下可见CIK细胞的胞质和胞核均呈现绿色荧光,且细胞核的绿色荧光强度强于细胞质。转染细胞中的转录产物经RT-PCR扩增后,凝胶电泳鉴定出与GFP基因片段分子量大小一致的条带,经测序证明其为GFP基因序列。结果表明,GFP基因可以在草鱼CIK细胞内高效率成功表达,为构建以GFP为报告基因的真核重组质粒及研究草鱼出血病DNA疫苗奠定了重要的基础。
关键词
绿色荧光蛋白
草鱼肾细胞
转染
草鱼出血病
Keywords
green fluorescent protein
ctenopharyngodon
idellus
kidney
cell（
cik
）
transfection
hemorrhage disease of grass carp
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
草鱼孕烷X受体与细胞色素P450 3A mRNA表达相关性初步研究
3
作者
符贵红
杨先乐
机构
中国水产科学研究院东海水产研究所
上海海洋大学水产与生命学院
出处
《海洋渔业》
CSCD
北大核心
2012年第1期76-82,共7页
基金
鱼虾用疫苗与药物研究开发(2011AA10A216)
现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-46)
文摘
根据GenBank中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)基因序列设计保守区域简并引物,通过PCR扩增获得草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA核苷酸序列片段为509 bp,经推导获取169 aa序列。对草鱼与其它物种PXR氨基酸序列进行同源性比较,用以鉴定其在物种中的进化。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测草鱼9种组织PXR和细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)基因mRNA相对含量,结果表明,其表达丰度依次为:前肠﹥肝脏﹥肾脏﹥鳃﹥肌肉﹥后肠﹥性腺﹥心脏﹥脾脏,CYP3A和PXR基因在草鱼组织中表达分布基本一致,在前肠、肝脏和肾脏高度表达,而在其它组织低度表达。为了进一步研究PXR和CYP3A基因表达相关性,通过细胞,特选用诱导剂利福平(rifampicin,RIF),最佳诱导浓度40μM,孵育1、2、4、6、8、10、12、24 h后,用qRT-PCR检测CYP3A-PXR基因动态表达过程。结果显示,诱导组CYP3A和PXR基因表达量均高于对照组,显示出显著诱导效应。
关键词
草鱼
孕烷X受体
细胞色素P450
3A
草鱼肾细胞系
Keywords
grass carp （
ctenopharyngodon
idellus
）
pregnane X receptor, PXR
cytochrome P450 3A,CYP3A
kidney
cell of Chinese idle,
cik
分类号
Q344 [生物学—遗传学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
草鱼细胞系CIK酵母双杂交cDNA文库的构建及初步应用
闫秀英
谢吉国
李杰
丁燏
吴灶和
鲁义善
简纪常
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
绿色荧光蛋白在草鱼肾细胞中的表达
郝贵杰
潘晓艺
袁雪梅
姚嘉赟
徐洋
蔺凌云
尹文林
沈锦玉
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2013
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
草鱼孕烷X受体与细胞色素P450 3A mRNA表达相关性初步研究
符贵红
杨先乐
《海洋渔业》
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
