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低温和低pH胁迫下青贮乳酸菌OL77的内参基因筛选及CspP基因的表达模式分析
1
作者
柴继宽
琚泽亮
赵桂琴
《草业学报》
CSCD
北大核心
2023年第5期147-158,共12页
为了明确低温青贮中筛选出的优异耐低温乳酸菌菌株戊糖片球菌OL77在低温和低pH胁迫下的基因表达情况,探讨其耐低温机理,本研究通过同源克隆获得了OL77的CspP基因,运用GeNorm,NormFinder,BestKeeper和RefFinder程序,基于SYBR-Green的实...
为了明确低温青贮中筛选出的优异耐低温乳酸菌菌株戊糖片球菌OL77在低温和低pH胁迫下的基因表达情况,探讨其耐低温机理,本研究通过同源克隆获得了OL77的CspP基因,运用GeNorm,NormFinder,BestKeeper和RefFinder程序,基于SYBR-Green的实时荧光定量PCR(RT-qPCR)筛选OL77在低温和低pH胁迫条件下表达稳定的内参基因,并利用其研究了CspP基因的低温表达模式。结果表明:OL77在受到外界低温和低pH胁迫时表达较稳定的内参基因为Ldh、tufA和6PGDH,而GAPDH和GyrA是表达较不稳定的内参基因。采用同源克隆获得OL77的CspP基因片段,以Ldh和6PGDH为内参基因,对25、15和5℃下培养0、1、3、6、12、24 h的OL77中CspP基因的相对表达量进行分析,发现低温条件下CspP基因瞬时表达量激增,在5℃下上调86倍,这可能是OL77耐低温的主要原因,OL77对低温的适应性部分来自其较强的冷休克蛋白表达能力。CspP基因可用作OL77低温适应性的指示基因。
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关键词
低温
低PH
内参
基因
cspp基因
表达模式
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题名
低温和低pH胁迫下青贮乳酸菌OL77的内参基因筛选及CspP基因的表达模式分析
1
作者
柴继宽
琚泽亮
赵桂琴
机构
甘肃农业大学草业学院
出处
《草业学报》
CSCD
北大核心
2023年第5期147-158,共12页
基金
国家自然科学基金(32160810)
财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系(CARS-07-C-1)资助。
文摘
为了明确低温青贮中筛选出的优异耐低温乳酸菌菌株戊糖片球菌OL77在低温和低pH胁迫下的基因表达情况,探讨其耐低温机理,本研究通过同源克隆获得了OL77的CspP基因,运用GeNorm,NormFinder,BestKeeper和RefFinder程序,基于SYBR-Green的实时荧光定量PCR(RT-qPCR)筛选OL77在低温和低pH胁迫条件下表达稳定的内参基因,并利用其研究了CspP基因的低温表达模式。结果表明:OL77在受到外界低温和低pH胁迫时表达较稳定的内参基因为Ldh、tufA和6PGDH,而GAPDH和GyrA是表达较不稳定的内参基因。采用同源克隆获得OL77的CspP基因片段,以Ldh和6PGDH为内参基因,对25、15和5℃下培养0、1、3、6、12、24 h的OL77中CspP基因的相对表达量进行分析,发现低温条件下CspP基因瞬时表达量激增,在5℃下上调86倍,这可能是OL77耐低温的主要原因,OL77对低温的适应性部分来自其较强的冷休克蛋白表达能力。CspP基因可用作OL77低温适应性的指示基因。
关键词
低温
低PH
内参
基因
cspp基因
表达模式
Keywords
low temperature
low pH
internal reference gene
cspp
gene
expression pattern
分类号
S816.53 [农业科学—饲料科学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
低温和低pH胁迫下青贮乳酸菌OL77的内参基因筛选及CspP基因的表达模式分析
柴继宽
琚泽亮
赵桂琴
《草业学报》
CSCD
北大核心
2023
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