体外筛选对鸡具有免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸 被引量：8

1

作者 朱鸿飞 朱建中 +4 位作者 李光富 卢春 邵国青 范红结 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期83-86,共4页

分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下... 分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下的转化效果 ,从而建立了适用于大批量筛选对鸡具有免疫刺激活性CpGODN的淋巴细胞转化方法。进一步用该方法筛选自行设计合成的 38条ODN。结果表明 ,用低速离心法分离的鸡PBMC ,在细胞含量为10 7mL-1、 37℃、 5 %CO2 条件下 ,经CpGODN刺激 6 4～ 6 6h后 ,可以得到稳定的高效转化 ;不含CpG模体的ODN不具有免疫刺激活性 ;CpGODN 10、 11和 14具有最佳的免疫刺激活性 ,刺激指数大于 10。 展开更多

关键词 鸡 cpg寡脱氧核苷酸 cpg模体 淋巴细胞转化 免疫刺激活性

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CpG寡脱氧核苷酸增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答(英文) 被引量：4

2

作者 秦卫兵 蒋建伟 +4 位作者 杨宁 陈巧儿 王一峰 韦相才 欧汝强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-650,共4页

目的 :探讨CpG寡脱氧核苷酸 (ODN)增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答效果。方法 :选用环磷酰胺 (CTX)所致免疫抑制模型小鼠 ,以乙肝疫苗和 2 0 μgCpGODN联合或单独左胫前肌肌注免疫C5 7BL/6小鼠。 2wk后以同样剂量加强免疫 1次 ,再... 目的 :探讨CpG寡脱氧核苷酸 (ODN)增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答效果。方法 :选用环磷酰胺 (CTX)所致免疫抑制模型小鼠 ,以乙肝疫苗和 2 0 μgCpGODN联合或单独左胫前肌肌注免疫C5 7BL/6小鼠。 2wk后以同样剂量加强免疫 1次 ,再过 3wk后摘除眼球取血 ,用ELISA法检测抗 HBsIgG抗体和IL 12的水平。同时 ,无菌取脾脏做HE染色 ,观察脾脏淋巴细胞的数量和细胞核的变化。结果 :CpGODN与疫苗联合注射组产生的绝对抗体量比单独注射疫苗组提高 1倍 ;注射组产生IL 12的水平较单独注射疫苗组也有明显升高。光镜下各组脾脏淋巴细胞的变化如下 :正常对照组脾脏可见大量的淋巴细胞 ;与正常对照组相比较 ,CTX组的淋巴细胞明显稀少 ;而CTX加CpG组的淋巴细胞数明显增多 ,细胞核也明显增大。结论 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸 免疫抑制小鼠 佐剂作用

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CpG基序的寡脱氧核苷酸对人轮状病毒乳鼠腹泻模型的保护作用 被引量：3

3

作者 徐志伟 李孟荣 +2 位作者 陈益平 石海矾 狄军波 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第9期1010-1016,共7页

目的:探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为4组:正常对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组、CpG ODN治... 目的:探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为4组:正常对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组。观察各组乳鼠的治疗反应和排毒情况;免疫组化法检测小肠组织Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)、IFN-γ的表达。结果:HRV感染组乳鼠的腹泻天数、排毒时间及重型腹泻发病率均高于CpG ODN预处理组和CpGODN治疗组(P<0.05);CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组TLR9、IFN-γ表达水平明显高于正常对照组和HRV感染组(P<0.01),并且两者存在正相关(P<0.05)。结论:CpG ODN预处理和治疗都能提高HRV感染乳鼠小肠组织TLR9、IFN-γ的表达,对HRV感染乳鼠有保护作用。 展开更多

关键词 cpg基序的寡脱氧核苷酸 轮状病毒 TOLL样受体9 IFN-Γ

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K型和D型CpG寡脱氧核苷酸对猪外周血单个核细胞免疫刺激活性的比较研究 被引量：2

4

作者 朱鸿飞 李光富 +3 位作者 朱建中 卢春 邵国清 张兆松 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期542-544,553,共4页

目的:比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异.方法:用人工合成的@K型和D型两类CpG 0DN和不含CpG基元的对照0DN D48分别刺激已分离的猪PBMC,3H-TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激... 目的:比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异.方法:用人工合成的@K型和D型两类CpG 0DN和不含CpG基元的对照0DN D48分别刺激已分离的猪PBMC,3H-TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激指数(SI).双抗体夹心ELISA法测定活化细胞上清中IFN-γ和IL-2表达水平.结果:D和K型CpGODN对猪PBMC增殖均具有较强刺激作用,K型的增殖效应高于D型.含'GTCGTT'基元的2006作用尤为显著,但不能有效刺激猪PBMC分泌IFN-γ和IL-2.D型刺激增殖效应低于K型,但能有效地促进猪PBMC分泌IFN-γ和IL-2.结论:K型和D型CpG 0DN在刺激猪PBMC增殖及其分泌IFN-γ、IL-2的水平有所不同. 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸 cpg基元 IFN—γ IL—2 猪

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TLR9在CpG寡脱氧核苷酸所致种属特异性免疫效应中的意义 被引量：3

5

作者 李宁 范学工 +1 位作者 汤参娥 朱才 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期533-535,共3页

目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN... 目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN-α,而对猕猴和小鼠却无明显的免疫刺激活性;TLR9在人PBMC中均有表达,并且在CpG-ODN介导激活的人PBMC中表达上调;TLR9在猕猴PBMC中不表达。结论:TLR9是构成CpG-ODN种属特异性的重要分子基础。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸 Α干扰素 TOLL样受体9 种属特异性

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CpG寡脱氧核苷酸联合IL-2刺激慢性淋巴细胞白血病细胞的细胞遗传学研究 被引量：4

6

作者 王冬梅 徐卫 +8 位作者 董华洁 方成 朱丹霞 曹鑫 朱华渊 庄芸 仇海荣 杨慧 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1114-1118,共5页

本研究探讨磷酸胞苷酰寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)和白介素-2(IL-2)联合刺激培养慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞的遗传学特征。对115例CLL患者的外周血(或骨髓)标本,应用CpG-ODN DSP30联合IL-2刺激培养CLL细胞72小时,常规收获细胞制备染色体并... 本研究探讨磷酸胞苷酰寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)和白介素-2(IL-2)联合刺激培养慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞的遗传学特征。对115例CLL患者的外周血(或骨髓)标本,应用CpG-ODN DSP30联合IL-2刺激培养CLL细胞72小时,常规收获细胞制备染色体并进行R显带分析,探讨CLL的染色体核型特征。结果表明:115例CLL患者中,染色体分析成功率(可分析分裂相≥20个)为74.8%,异常核型检出率为58.1%。检测出一种染色体异常21例(24.4%),2种染色体异常6例(7.0%),复杂核型23例(26.7%),其中高度复杂核型9例(10.5%)。在86例患者中共检出102种163个异常,其中数目异常116个(71.2%),结构异常47个(28.8%),最常见的染色体数目异常是+12(14.0%),结构异常是15q+(5.8%)。结论:大多数CLL患者具有细胞遗传学异常,其中染色体数目异常明显多于结构异常。采用DSP30联合IL-2可以有效的增加CLL细胞的分裂相,提高CLL细胞染色体异常检出率。 展开更多

关键词 慢性淋巴细胞白血病 细胞遗传学 cpg脱氧核苷酸 白介素-2

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CpG寡脱氧核苷酸的免疫刺激特性及应用研究进展 被引量：3

7

作者 司兴奎 陈建红 +1 位作者 张济培 顾万军 《动物医学进展》 CSCD 2008年第7期71-75,共5页

CpG基序是指含有非甲基化的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)二核苷酸为核心序列的基序为5′-R-D-CpG-Y-Y-3′的DNA或寡脱氧核苷酸序列,是DNA具有免疫刺激活性的结构基础。随着对CpG特性研究的不断深入,CpG寡脱氧核苷酸在激活先天性免疫、作为疫苗... CpG基序是指含有非甲基化的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)二核苷酸为核心序列的基序为5′-R-D-CpG-Y-Y-3′的DNA或寡脱氧核苷酸序列,是DNA具有免疫刺激活性的结构基础。随着对CpG特性研究的不断深入,CpG寡脱氧核苷酸在激活先天性免疫、作为疫苗佐剂、对变态反应进行免疫治疗、抗肿瘤应用及基因治疗等方面均显示出较广阔的应用前景。现就CpG寡脱氧核苷酸的免疫激活作用、细胞识别及结构特征、治疗疾病方面的应用及毒理作用加以探讨。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸 免疫刺激 结构特征

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长链CpG寡脱氧核苷酸DNA重组质粒对禽流感灭活疫苗免疫应答的影响 被引量：1

8

作者 司兴奎 陈建红 张济培 《中国家禽》 北大核心 2009年第24期29-31,35,共4页

为明确导入长链CpG寡脱氧核苷酸3个DNA重组质粒对禽流感H5亚型灭活疫苗的免疫应答的影响,将21日龄试验雏鸡随机分为6组,即健康对照组(A组)、疫苗对照组(B组)、空载体对照组(C组)、pUC26免疫促进组(D组)、pUC30免疫促进组(E组)及pUC44免... 为明确导入长链CpG寡脱氧核苷酸3个DNA重组质粒对禽流感H5亚型灭活疫苗的免疫应答的影响,将21日龄试验雏鸡随机分为6组,即健康对照组(A组)、疫苗对照组(B组)、空载体对照组(C组)、pUC26免疫促进组(D组)、pUC30免疫促进组(E组)及pUC44免疫促进组(F组),对6组雏鸡在首免后1～8周(WPI)检测其HI抗体水平并在1、4及8WPI测定脾脏、法氏囊及胸腺免疫器官指数。研究结果表明:在2WPI,D(P<0.01)、F(P<0.01)及E组(P<0.05)HI抗体水平极显著或显著高于C组;在3WPI,F组HI抗体水平分别显著高于B(P<0.05)、C(P<0.05)及E组(P<0.05);在5WPI,F(P<0.01)和D(P<0.05)组HI抗体水平极显著或显著高于C组;在6WPI,F组HI抗体水平显著高于C组(P<0.05);在8WPI,F组HI抗体水平极显著高于B(P<0.01)或C组(P<0.01)。在4WPI,A组胸腺指数极显著或显著高于C(P<0.05)及D组(P<0.01),E组胸腺指数显著高于D组(P<0.05);在8WPI,E组脾脏指数显著高于A组(P<0.05)。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸DNA重组质粒 禽流感灭活疫苗 免疫应答 免疫器官指数

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含CpG寡脱氧核苷酸对小鼠肝癌的生长抑制作用及造血功能的影响

9

作者 盛蓁 王先松 +2 位作者 官阳 杨木兰 阮幼冰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期456-459,共4页

目的　观察含CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对种植小鼠肝癌 (hepatoma 2 2 ,H2 2 )的生长抑制作用及对荷瘤小鼠造血功能的影响。方法　右股皮下接种H2 2 细胞后的BALB/C小鼠 ,随机分为 7组 ,包括生理盐水组、非CpGODN组、CpGODN组、5 氟尿... 目的　观察含CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对种植小鼠肝癌 (hepatoma 2 2 ,H2 2 )的生长抑制作用及对荷瘤小鼠造血功能的影响。方法　右股皮下接种H2 2 细胞后的BALB/C小鼠 ,随机分为 7组 ,包括生理盐水组、非CpGODN组、CpGODN组、5 氟尿嘧啶 (5 FU)组、白细胞介素 2 (IL 2 )组、CpGODN +5 FU组和IL 2 +5 FU组。皮下注射给药 ,给药期间鼠尾静脉采血观察骨髓抑制情况。用药 12天 ,于最后一次用药 2 4h后颈椎脱臼处死小鼠 ,剥离肿瘤 ,测量大小和称重。结果　单用CpGODN、CpGODN +5 FU、5 FU、IL 2 +5 FU的抑瘤率为 4 2 75 %、5 6 0 2 %、6 3 98%、5 7 91% (P <0 0 1) ,后两组不良反应明显 ,有显著骨髓抑制作用。结论　CpGODN对移植小鼠肝癌生长具有抑制作用 ,并能缓解化疗引起的骨髓抑制状态。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸 小鼠 肝癌 生长抑制作用 造血功能

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CpG寡脱氧核苷酸序列的设计与筛选

10

作者 郑梅珍 蒋建伟 +3 位作者 徐春光 曾耀英 狄静芳 刘誉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2004年第2期159-163,共5页

　目的:根据CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)的设计原则,设计和筛选对新生儿脐血单个核细胞免疫刺激作用较强的CpGODN;从中探求CpGODN的结构与免疫刺激活性之间的关系。方法:根据目前有关CpGODN免疫刺激活性的研究资料,设计合成15条不同结构特... 　目的:根据CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)的设计原则,设计和筛选对新生儿脐血单个核细胞免疫刺激作用较强的CpGODN;从中探求CpGODN的结构与免疫刺激活性之间的关系。方法:根据目前有关CpGODN免疫刺激活性的研究资料,设计合成15条不同结构特点的硫代及非硫代修饰的CpGODN,MTT法检测CpGODN对脐血中单个核细胞的刺激作用,分别筛选出作用较强的CpGODN,然后以CpG2006和T8为阳性对照,无关序列CpG17为阴性对照,再次比较这些CpGODN对单个核细胞的刺激增殖作用。结果:设计的2条CpGODN吸光度A值(CpG1:0 280±0 0612;CpG6:0 277±0 0562)高于T8(0 241±0 0438),而与CpG2006(0 283±0 0794)相当。结论:用MTT法筛选出了2条对新生儿免疫作用较强的CpGODN;CpGODN的结构与其免疫活性密切相关,这些关系特点利于指导CpGODN的设计。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸 单个核细胞 新生儿

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新型免疫佐剂-CpG寡脱氧核苷酸 被引量：2

11

作者 李娜 赵建增 +2 位作者 贺洪 王玉玲 曾亮明 《中国兽药杂志》 2008年第10期54-56,共3页

含未甲基化CpG基序的寡脱氧核苷酸能够直接刺激B细胞等抗原递呈细胞,提高Th1产量并促进细胞因子的产生及抗原递呈细胞的成熟和活化。这使CpG寡核苷酸具有良好的免疫佐剂活性,能够促进和提高抗原特异性免疫应答。本篇着重介绍了CpG寡核... 含未甲基化CpG基序的寡脱氧核苷酸能够直接刺激B细胞等抗原递呈细胞,提高Th1产量并促进细胞因子的产生及抗原递呈细胞的成熟和活化。这使CpG寡核苷酸具有良好的免疫佐剂活性,能够促进和提高抗原特异性免疫应答。本篇着重介绍了CpG寡核苷酸作为免疫佐剂的研究进展。 展开更多

关键词 佐剂 cpg 寡脱氧核苷酸

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含CpG寡聚脱氧核苷酸对肿瘤抗原肽P815AB的免疫佐剂效应研究 被引量：3

12

作者 赵建平 吴玉章 +4 位作者 万瑛 贾正才 周伟 邹丽云 刘月明 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第10期954-957,共4页

目的　以肿瘤抗原P815AB抗原肽为模式抗原 ,研究CpG寡聚脱氧核苷酸 (CpGODN)对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法　用 [3H ] TdR掺入法研究CpGODN体外刺激小鼠脾细胞增殖效应 ,用ELISPOT和 [3H] TdR释放法检测不同构成形式的疫苗... 目的　以肿瘤抗原P815AB抗原肽为模式抗原 ,研究CpG寡聚脱氧核苷酸 (CpGODN)对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法　用 [3H ] TdR掺入法研究CpGODN体外刺激小鼠脾细胞增殖效应 ,用ELISPOT和 [3H] TdR释放法检测不同构成形式的疫苗在体诱发特异性CTL应答的效应。结果　ODN182 6在体外可刺激小鼠脾细胞显著增殖。经 4次免疫 ,在“肽 +ODN182 6 +IFA”组中 ,4/6的小鼠体内出现了特异性CTL应答 ;在“肽 +ODN182 6 +PBS”组 ,有 3只小鼠在完成 4次免疫前先后死亡 ,余 3只中有 1只体内也可检测到相应CTL反应 ;而对照“肽 +IFA”组 ,6只小鼠体内均未诱发出特异性CTL应答。结论　CpGODN对P815AB表位肽有较为理想的免疫佐剂效应 ,但疫苗构成形式对其免疫效果有着决定性的作用 ,“肽 +ODN182 6 +IFA”是本研究中最有效的疫苗形式 。 展开更多

关键词 cpg寡聚脱氧核苷酸 多钛疫苗 肿瘤抗原肽

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CpG寡聚脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞在裸鼠体内的生长 被引量：2

13

作者 何威 周佩军 +1 位作者 沈周俊 马斌斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期930-933,共4页

目的:观察不同剂量的CpG ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较。方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型。将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小... 目的:观察不同剂量的CpG ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较。方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型。将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小剂量CpG ODN 1668组;(4)中等剂量CpG ODN 1668组;(5)大剂量CpG ODN 1668组。自肿瘤细胞接种后第1天起给药,共4次(第1、8、15、22天),在肿瘤周围多点注射相应药物(早期给药);同样方式另设5组动物,自肿瘤细胞接种后第7天起(第7、14、21、28天)于肿瘤周围多点注射相应药物(延迟给药)。观察肿瘤体积和裸鼠的生存率。结果:早期给药时,在CpG ODN 1668各剂量组和BCG组,肿瘤生长均被抑制,裸鼠的生存期得到延长。中等剂量和大剂量CpG ODN 1668组对肿瘤细胞生长的抑制作用强于BCG组。延迟给药时,CpG ODN 1668各剂量组肿瘤体积和裸鼠的生存率,与对照组和BCG组的差异无显著统计学意义。结论:CpG ODN 1668的早期应用,可抑制人膀胱癌细胞T24在裸鼠体内的生长,并表现为剂量依赖性;其抗肿瘤效应是非T细胞依赖的。当加大使用剂量时,CpG ODN 1668对膀胱癌细胞生长的抑制作用强于BCG。而当肿瘤负荷较大时,CpG ODN 1668和BCG的延迟使用对膀胱肿瘤细胞在裸鼠体内的生长无抑制作用。 展开更多

关键词 卡介苗 cpg寡聚脱氧核苷酸 人膀胱癌细胞 裸鼠

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CpG寡聚脱氧核苷酸抑制肾癌细胞增殖及肿瘤生长的体内外实验研究

14

作者 马斌斌 周佩军 +2 位作者 徐达 王祥慧 邵琨 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期763-768,共6页

目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)在体内外对肾癌细胞增殖及肿瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度CpG ODN1826和non-CpG ODN1982(ODN1982)干预对体外培养人肾透明细胞癌Caki-1细胞增殖的影响。24... 目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)在体内外对肾癌细胞增殖及肿瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度CpG ODN1826和non-CpG ODN1982(ODN1982)干预对体外培养人肾透明细胞癌Caki-1细胞增殖的影响。24只BALB/c裸鼠皮下接种Caki-1细胞建立荷瘤裸鼠模型,4d后根据每周1次的治疗方式随机分为对照组(PBS)、ODN1982组(50μg ODN1982)、小剂量CpG ODN1826组(25μgCpG ODN1826)和大剂量CpG ODN1826组(50μgCpG ODN1826),每组6只。于建模后35d处死动物,比较各组荷瘤裸鼠的肿瘤体积、质量及肿瘤组织学改变;体外分离各组荷瘤裸鼠脾淋巴细胞,乳酸脱氢酶释放法检测不同靶标比例(脾淋巴细胞:Caki-1细胞或脾淋巴细胞:小鼠淋巴瘤细胞YAC-1细胞)的荷瘤裸鼠脾淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果 ODN1982对Caki-1细胞的体外增殖活性无显著影响;500μg/mLCpG ODN1826干预可显著抑制Caki-1细胞增殖。至实验终止时点,小剂量和大剂量CpG ODN1826组荷瘤裸鼠的肿瘤体积显著小于ODN1982组和对照组(P<0.05);各组间肿瘤质量比较差异均具有统计学意义(P<0.05);组织学观察显示,小剂量和大剂量CpG ODN1826组肿瘤组织较多炎性细胞浸润。当靶标比例为50:1时,大剂量CpG ODN1826组裸鼠脾淋巴细胞对Caki-1细胞和YAC-1细胞的杀伤活性分别为(9.74±1.16)%和(79.65±5.23)%,显著高于对照组的(7.67±0.22)%和(10.12±3.03)%及ODN1982组的(7.66±0.93)%和(27.60±9.83)%(P<0.05)。结论 CpG ODN对体外肾癌细胞增殖及荷瘤裸鼠肿瘤组织生长均具有明显抑制作用,其机制可能与CpG ODN增强荷瘤裸鼠的固有免疫应答有关。 展开更多

关键词 cpg寡聚脱氧核苷酸 肾癌 固有免疫

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CpG寡聚脱氧核苷酸对变应性联合气道疾病气道重塑的影响研究

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作者 李洪涛 林煜森 +3 位作者 邹小玲 李文娟 孟平 张天托 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第26期3191-3197,共7页

背景激素是变应性联合气道疾病(ACAD)常用的治疗方法,但慢性ACAD出现气道重塑,可能影响其疗效,故有必要寻找与激素联合并有协同作用的新型免疫治疗。前期研究发现CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)抑制ACAD气道炎症,但对气道重塑的效果有待研... 背景激素是变应性联合气道疾病(ACAD)常用的治疗方法,但慢性ACAD出现气道重塑,可能影响其疗效,故有必要寻找与激素联合并有协同作用的新型免疫治疗。前期研究发现CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)抑制ACAD气道炎症,但对气道重塑的效果有待研究。目的探讨CpG-ODN对慢性ACAD小鼠模型气道重塑的影响。方法本研究时间为2016年4月-2018年3月。30只清洁级雌性BALB/c小鼠采用随机数字表法分为正常对照组(Control组)、ACAD组、变应性联合气道疾病CpG-ODN干预组(ACAD/CpG-ODN组)、变应性联合气道疾病布地奈德干预组(ACAD/BUD组)、变应性联合气道疾病CpG-ODN+BUD联合干预组(ACAD/CpG-ODN+BUD组)。实验动物腹腔卵清蛋白(OVA)或磷酸盐缓冲液(PBS)致敏,鼻腔OVA/PBS 3周激发,随之6周雾化气道激发。ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组和ACAD/CpG-ODN+BUD组分别给予CpG-ODN、BUD和CpG-ODN+BUD滴鼻,其他组给予PBS滴鼻。每次鼻腔或气道激发后10 min内,对小鼠抓鼻和喷嚏次数进行计数。HE和PAS染色观察小鼠鼻腔组织的病理特点。HE、AB-PAS和Masson’s染色观察小鼠肺组织病理变化,并行气道炎症评分。免疫组化检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),应用Image-Pro Plus图片分析软件定量评估,并进行症状评估。结果各组小鼠抓鼻次数和喷嚏次数比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中ACAD组抓鼻次数和喷嚏次数均多于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组抓鼻次数和喷嚏次数均少于ACAD组(P<0.05)。HE和PAS染色显示,ACAD/CpG-ODN组和ACAD/BUD组鼻黏膜病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/CpG-ODN+BUD组进一步减轻。HE、AB-PAS和Masson’s染色显示,ACAD/CpG-ODN组和ACAD/BUD组肺组织病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/CpG-ODN+BUD组进一步减轻。各组气道炎症评分比较,差异有统计学意义(P<0.01);其中ACAD组气道炎症评分高于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组气道炎症评分均低于ACAD组(P<0.05)。各组肺组织中TGF-β1和α-SMA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中ACAD组TGF-β1和α-SMA表达水平均高于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpGODN+BUD组均低于ACAD组(P<0.05)。结论CpG-ODN、布地奈德抑制慢性ACAD模型鼻部炎症和支气管肺组织气道重塑,两者可能具有协同作用。 展开更多

关键词 变应性联合气道疾病 气道重塑 cpg寡聚脱氧核苷酸 布地奈德 小鼠 鼻腔 支气管

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CpG-ODN纳米剂增强黏膜免疫及其对禽致病性大肠杆菌的保护效力

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作者 王艳萍 王文秀 +8 位作者 徐倩倩 王艳 莫玲 苗立中 董林 杨丽梅 郭时金 付石军 田风荣 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期11-18,共8页

为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)纳米剂,为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管(MWCNT)制备CpG-ODN纳米剂,经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ... 为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)纳米剂,为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管(MWCNT)制备CpG-ODN纳米剂,经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素18(IL-18)和Toll样受体21(TLR21)的mRNA转录水平。通过生存率、临床赋值评分和细菌接种评分评价CpG-ODN纳米剂对禽致病性大肠杆菌O2的攻毒保护效力。结果显示,制备的CpG-ODN纳米剂平均粒径为(72.30±9.54)nm,形态均一。与对照组比较,CpG-ODN组鸡只血清中IL-2和IFN-γ在12和24 h极显著升高(P<0.01);IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4和TLR21mRNA转录水平在12和24 h显著增加(P<0.05或P<0.01);IL-10 mRNA转录水平在6 h极显著增加(P<0.01),12 h显著增加(P<0.05);肠道sIgA在12和24 h显著升高(P<0.05),在48 h极显著升高(P<0.01)。与攻毒对照组相比,CpG-ODN组和抗生素组鸡只生存率均显著升高(P<0.05),临床赋值评分和细菌接种评分均显著降低(P<0.05)。结果表明,肺内给予CpG-ODN纳米剂可激活黏膜免疫反应,有效保护禽致病性大肠杆菌O2对试验鸡只的攻击,明显减轻临床症状并降低死亡率,显示良好的减抗和替抗前景。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸(cpg-ODN) 纳米剂 黏膜免疫 禽大肠杆菌 攻毒保护

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CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)协同促进脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞增殖与迁移 被引量：1

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作者 杨春秀 屈已白 闫征征 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期198-204,共7页

目的探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法使用1 mg/L LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞建立体外炎症细胞模型,采用CCK-8法检测CpG ODN(500 nmol/L)对LPS诱导的巨噬细胞增殖的影响,... 目的探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法使用1 mg/L LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞建立体外炎症细胞模型,采用CCK-8法检测CpG ODN(500 nmol/L)对LPS诱导的巨噬细胞增殖的影响,采用TranswellTM实验检测CpG ODN对细胞迁移能力的影响;采用Western blot法检测p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶(ERK)、核因子κBp65(NF-κB p65)的蛋白磷酸化水平,同时使用以上通路的抑制剂SB203580、SP600125、PD98059、BAY11-7082,探讨CpG ODN发挥效应的机制;采用实时定量PCR检测CpG ODN对LPS诱导产生的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、环加氧酶2(COX2)mRNA水平的影响。结果CpG ODN协同促进LPS诱导的巨噬细胞增殖与迁移,并促进COX2、MCP-1的转录,增强JNK、ERK信号通路蛋白的磷酸化水平,并且JNK与ERK信号通路激酶抑制剂可有效降低CpG ODN的协同效应。结论CpG ODN可通过JNK与ERK途径协同促进LPS诱导的巨噬细胞增殖与迁移并促进COX2、MCP-1的转录。 展开更多

关键词 cpg寡脱氧核苷酸(cpg ODN) 脂多糖(LPS) 细胞增殖 细胞迁移 RAW264.7巨噬细胞

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C型CpG单链寡核苷酸对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用 被引量：4

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作者 王学菊 王智博 +4 位作者 卫红飞 吴秀丽 王莉 于永利 王丽颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期338-340,342,共4页

目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用... 目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用,并对小鼠血清中抗HSP65-MUC1抗体的类型进行了初步鉴定。结果自行设计的CpG ODN BW005能刺激人PBMC和小鼠脾细胞增生,其刺激后的培养上清具有保护Vero E6细胞免受VSV感染的作用,属于新型C型CpG ODN。将BW005与HSP65-MUC1联合应用于C57BL/6小鼠后,MUC1阳性肿瘤的发生明显延缓(平均44.8d),其终末肿瘤发生率最低(33.33%);荷瘤小鼠的生存期明显延长(平均49.5d),其终末生存率最高(66.67%)。小鼠血清中抗HSP65和抗MUC1的IgG2a抗体水平增加。结论C型CpG ODN可以增强肿瘤疫苗HSP65-MUC1的抑瘤效果,考虑与小鼠体内Th1环境的形成有关。 展开更多

关键词 cpg ODN(单链寡脱氧核苷酸) HSP-MUC1融合蛋白 肿瘤免疫治疗

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CpG寡聚核苷酸的免疫激活机理及生物学活性

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作者 王沂蒙 刘艳 +2 位作者 窦新红 明双喜 江国托 《家禽科学》 2007年第1期43-46,共4页

脊椎动物能够识别入侵的微生物是基于病原体的特定分子结构，这些被认为是病原体相关分子模式（pathogen—associated molecular pattern，PAMP）的结构能够被宿主体内模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）所识别，从而... 脊椎动物能够识别入侵的微生物是基于病原体的特定分子结构，这些被认为是病原体相关分子模式（pathogen—associated molecular pattern，PAMP）的结构能够被宿主体内模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）所识别，从而产生免疫应答。细菌和病毒基因组中所携带的非甲基化CpG（胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸）至少是脊椎动物中的20倍，并且脊椎动物的DNA甲基化程度比较高。细菌和脊椎动物这种在DNA上的显著差别使得细菌基因组在进化过程中成为PAMP从而被脊椎动物识别为“危险的入侵信号”，并做出相应的免疫应答。 展开更多

关键词 免疫应答 生物学活性 寡聚核苷酸 激活机理 cpg DNA甲基化 细菌基因组 脊椎动物

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CpG-寡核苷酸免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病遗传学研究中的应用 被引量：1

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作者 买地娜·艾尔肯 刘虹 +15 位作者 王一林 王一淳 黄琴 王增胜 古再丽努尔 郎涛 聂玉玲 安利 阿孜古丽 木合塔拜尔 张晓燕 富玲 艾何买江 毛敏 王晓敏 李燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期470-475,共6页

目的:探索CpG-寡核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞染色体培养中的价值,对比国内外相关研究的差异,进一步提高CLL核型培养成功率及异常核型检出率。方法... 目的:探索CpG-寡核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞染色体培养中的价值,对比国内外相关研究的差异,进一步提高CLL核型培养成功率及异常核型检出率。方法:收集82例CLL患者的骨髓标本,分别应用植物血凝素(PHA)、CpG-寡核苷酸联合白介素-2(CpG-ODN DSP30+IL-2)刺激培养72 h后收获细胞,制备染色体,进行常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)分析。同时应用D13S25、Rb1、ATM、p53和CSP12探针进行间期荧光原位杂交(interphase fluorescence in situ hybridization,iFISH)检测。比较2种细胞刺激剂进行染色体培养及iFISH检测结果的差异性。结果:PHA与CpG-ODN DSP30+IL-22种免疫刺激法核型培养成功率(可分析分裂相t≥20个)分别为90.2%(74例)和68.3%(56例),异常核型检出率分别为13.5%(10例)和46.4%(26例)。PHA组核型培养成功率显著高于CpG-ODN DSP30+IL-2组(P=0.01),而CpG-ODN DSP30+IL-2组异常核型检出率显著高于PHA组(P=0.003)。iFISH异常核型检出率(74.4%,61例)显著高于CpG-ODN DSP30+IL-2组(P=0.000)。iFISH检测能验证CC分析检出的异常。结论:应用CpG-ODN DSP30+IL-2免疫刺激法培养CLL细胞,可提高异常核型检出率,特别是能检出提示预后差的各种易位。 展开更多

关键词 慢性淋巴细胞白血病 cpg一寡脱氧核苷酸 染色体 细胞遗传学 间期荧光原位杂交

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