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体外筛选对鸡具有免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸 被引量:8
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作者 朱鸿飞 朱建中 +4 位作者 李光富 卢春 邵国青 范红结 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期83-86,共4页
分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下... 分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对SPF鸡全血 ,经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞 ,用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激 ,用3 H TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下的转化效果 ,从而建立了适用于大批量筛选对鸡具有免疫刺激活性CpGODN的淋巴细胞转化方法。进一步用该方法筛选自行设计合成的 38条ODN。结果表明 ,用低速离心法分离的鸡PBMC ,在细胞含量为10 7mL-1、 37℃、 5 %CO2 条件下 ,经CpGODN刺激 6 4~ 6 6h后 ,可以得到稳定的高效转化 ;不含CpG模体的ODN不具有免疫刺激活性 ;CpGODN 10、 11和 14具有最佳的免疫刺激活性 ,刺激指数大于 10。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 cpg模体 淋巴细胞转化 免疫刺激活性
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CpG寡脱氧核苷酸增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答(英文) 被引量:4
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作者 秦卫兵 蒋建伟 +4 位作者 杨宁 陈巧儿 王一峰 韦相才 欧汝强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-650,共4页
目的 :探讨CpG寡脱氧核苷酸 (ODN)增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答效果。方法 :选用环磷酰胺 (CTX)所致免疫抑制模型小鼠 ,以乙肝疫苗和 2 0 μgCpGODN联合或单独左胫前肌肌注免疫C5 7BL/6小鼠。 2wk后以同样剂量加强免疫 1次 ,再... 目的 :探讨CpG寡脱氧核苷酸 (ODN)增强免疫抑制小鼠对乙肝疫苗的免疫应答效果。方法 :选用环磷酰胺 (CTX)所致免疫抑制模型小鼠 ,以乙肝疫苗和 2 0 μgCpGODN联合或单独左胫前肌肌注免疫C5 7BL/6小鼠。 2wk后以同样剂量加强免疫 1次 ,再过 3wk后摘除眼球取血 ,用ELISA法检测抗 HBsIgG抗体和IL 12的水平。同时 ,无菌取脾脏做HE染色 ,观察脾脏淋巴细胞的数量和细胞核的变化。结果 :CpGODN与疫苗联合注射组产生的绝对抗体量比单独注射疫苗组提高 1倍 ;注射组产生IL 12的水平较单独注射疫苗组也有明显升高。光镜下各组脾脏淋巴细胞的变化如下 :正常对照组脾脏可见大量的淋巴细胞 ;与正常对照组相比较 ,CTX组的淋巴细胞明显稀少 ;而CTX加CpG组的淋巴细胞数明显增多 ,细胞核也明显增大。结论 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 免疫抑制小鼠 佐剂作用
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CpG基序的寡脱氧核苷酸对人轮状病毒乳鼠腹泻模型的保护作用 被引量:3
3
作者 徐志伟 李孟荣 +2 位作者 陈益平 石海矾 狄军波 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第9期1010-1016,共7页
目的:探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为4组:正常对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组、CpG ODN治... 目的:探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为4组:正常对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组。观察各组乳鼠的治疗反应和排毒情况;免疫组化法检测小肠组织Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)、IFN-γ的表达。结果:HRV感染组乳鼠的腹泻天数、排毒时间及重型腹泻发病率均高于CpG ODN预处理组和CpGODN治疗组(P<0.05);CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组TLR9、IFN-γ表达水平明显高于正常对照组和HRV感染组(P<0.01),并且两者存在正相关(P<0.05)。结论:CpG ODN预处理和治疗都能提高HRV感染乳鼠小肠组织TLR9、IFN-γ的表达,对HRV感染乳鼠有保护作用。 展开更多
关键词 cpg基序的寡脱氧核苷 轮状病毒 TOLL样受体9 IFN-Γ
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K型和D型CpG寡脱氧核苷酸对猪外周血单个核细胞免疫刺激活性的比较研究 被引量:2
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作者 朱鸿飞 李光富 +3 位作者 朱建中 卢春 邵国清 张兆松 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期542-544,553,共4页
目的:比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异.方法:用人工合成的@K型和D型两类CpG 0DN和不含CpG基元的对照0DN D48分别刺激已分离的猪PBMC,3H-TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激... 目的:比较K、D两型CpG寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)对猪外周血单个核细胞(PBMC)免疫刺激活性的差异.方法:用人工合成的@K型和D型两类CpG 0DN和不含CpG基元的对照0DN D48分别刺激已分离的猪PBMC,3H-TdR掺入法测定每分闪烁次数(cpm)值,计算刺激指数(SI).双抗体夹心ELISA法测定活化细胞上清中IFN-γ和IL-2表达水平.结果:D和K型CpGODN对猪PBMC增殖均具有较强刺激作用,K型的增殖效应高于D型.含'GTCGTT'基元的2006作用尤为显著,但不能有效刺激猪PBMC分泌IFN-γ和IL-2.D型刺激增殖效应低于K型,但能有效地促进猪PBMC分泌IFN-γ和IL-2.结论:K型和D型CpG 0DN在刺激猪PBMC增殖及其分泌IFN-γ、IL-2的水平有所不同. 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 cpg基元 IFN—γ IL—2
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TLR9在CpG寡脱氧核苷酸所致种属特异性免疫效应中的意义 被引量:3
5
作者 李宁 范学工 +1 位作者 汤参娥 朱才 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期533-535,共3页
目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN... 目的:探讨TLR9在CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)种属特异性免疫效应中的意义。方法:CpG-ODN体外刺激人、猕猴、小鼠外周血单个核细胞(PBMC),ELISA测培养液IFN-α含量;RT-PCR检测PBMC中TLR9的表达水平。结果:CpG-ODN2216有效诱导人PBMC分泌IFN-α,而对猕猴和小鼠却无明显的免疫刺激活性;TLR9在人PBMC中均有表达,并且在CpG-ODN介导激活的人PBMC中表达上调;TLR9在猕猴PBMC中不表达。结论:TLR9是构成CpG-ODN种属特异性的重要分子基础。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 Α干扰素 TOLL样受体9 种属特异性
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CpG寡脱氧核苷酸的免疫刺激特性及应用研究进展 被引量:3
6
作者 司兴奎 陈建红 +1 位作者 张济培 顾万军 《动物医学进展》 CSCD 2008年第7期71-75,共5页
CpG基序是指含有非甲基化的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)二核苷酸为核心序列的基序为5′-R-D-CpG-Y-Y-3′的DNA或寡脱氧核苷酸序列,是DNA具有免疫刺激活性的结构基础。随着对CpG特性研究的不断深入,CpG寡脱氧核苷酸在激活先天性免疫、作为疫苗... CpG基序是指含有非甲基化的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)二核苷酸为核心序列的基序为5′-R-D-CpG-Y-Y-3′的DNA或寡脱氧核苷酸序列,是DNA具有免疫刺激活性的结构基础。随着对CpG特性研究的不断深入,CpG寡脱氧核苷酸在激活先天性免疫、作为疫苗佐剂、对变态反应进行免疫治疗、抗肿瘤应用及基因治疗等方面均显示出较广阔的应用前景。现就CpG寡脱氧核苷酸的免疫激活作用、细胞识别及结构特征、治疗疾病方面的应用及毒理作用加以探讨。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 免疫刺激 结构特征
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脂质体介导寡脱氧核糖核苷酸转染人视网膜色素上皮细胞的转染率及分布测定 被引量:2
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作者 李晓青 曾水清 徐莉莉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第6期1111-1114,共4页
目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布。方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转... 目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布。方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转入人RPE细胞中,荧光显微镜下观察转染后20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h其在细胞内的分布,流式细胞仪检测其在RPE细胞中的转染效率;并用MTT法检测脂质体处理组、脂质体-ODNs复合物处理组和正常对照组的细胞增生活性,观察脂质体的毒性。结果:LipofectamineTM 2000能迅速将FAM-ODNs转入人RPE细胞的胞质和胞核内,4~6 h达高峰,转染效率高达(85.85±5.75)%,与其他时点比较差异有统计学意义(P<0.05),24 h后其转染率还有(70.11±5.81)%;且脂质体对RPE细胞无明显细胞毒性,3组间细胞增生活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LipofectamineTM 2000能有效地将FAM-ODNs转入人RPE细胞中,可作为一种安全有效的基因转移载体用于基因治疗。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 基因转移 寡脱氧核糖核苷 视网膜色素上皮细胞
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长链CpG寡脱氧核苷酸DNA重组质粒对禽流感灭活疫苗免疫应答的影响 被引量:1
8
作者 司兴奎 陈建红 张济培 《中国家禽》 北大核心 2009年第24期29-31,35,共4页
为明确导入长链CpG寡脱氧核苷酸3个DNA重组质粒对禽流感H5亚型灭活疫苗的免疫应答的影响,将21日龄试验雏鸡随机分为6组,即健康对照组(A组)、疫苗对照组(B组)、空载体对照组(C组)、pUC26免疫促进组(D组)、pUC30免疫促进组(E组)及pUC44免... 为明确导入长链CpG寡脱氧核苷酸3个DNA重组质粒对禽流感H5亚型灭活疫苗的免疫应答的影响,将21日龄试验雏鸡随机分为6组,即健康对照组(A组)、疫苗对照组(B组)、空载体对照组(C组)、pUC26免疫促进组(D组)、pUC30免疫促进组(E组)及pUC44免疫促进组(F组),对6组雏鸡在首免后1~8周(WPI)检测其HI抗体水平并在1、4及8WPI测定脾脏、法氏囊及胸腺免疫器官指数。研究结果表明:在2WPI,D(P<0.01)、F(P<0.01)及E组(P<0.05)HI抗体水平极显著或显著高于C组;在3WPI,F组HI抗体水平分别显著高于B(P<0.05)、C(P<0.05)及E组(P<0.05);在5WPI,F(P<0.01)和D(P<0.05)组HI抗体水平极显著或显著高于C组;在6WPI,F组HI抗体水平显著高于C组(P<0.05);在8WPI,F组HI抗体水平极显著高于B(P<0.01)或C组(P<0.01)。在4WPI,A组胸腺指数极显著或显著高于C(P<0.05)及D组(P<0.01),E组胸腺指数显著高于D组(P<0.05);在8WPI,E组脾脏指数显著高于A组(P<0.05)。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷DNA重组质粒 禽流感灭活疫苗 免疫应答 免疫器官指数
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含CpG寡脱氧核苷酸对小鼠肝癌的生长抑制作用及造血功能的影响
9
作者 盛蓁 王先松 +2 位作者 官阳 杨木兰 阮幼冰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期456-459,共4页
目的 观察含CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对种植小鼠肝癌 (hepatoma 2 2 ,H2 2 )的生长抑制作用及对荷瘤小鼠造血功能的影响。方法 右股皮下接种H2 2 细胞后的BALB/C小鼠 ,随机分为 7组 ,包括生理盐水组、非CpGODN组、CpGODN组、5 氟尿... 目的 观察含CpG寡脱氧核苷酸 (CpGODN)对种植小鼠肝癌 (hepatoma 2 2 ,H2 2 )的生长抑制作用及对荷瘤小鼠造血功能的影响。方法 右股皮下接种H2 2 细胞后的BALB/C小鼠 ,随机分为 7组 ,包括生理盐水组、非CpGODN组、CpGODN组、5 氟尿嘧啶 (5 FU)组、白细胞介素 2 (IL 2 )组、CpGODN +5 FU组和IL 2 +5 FU组。皮下注射给药 ,给药期间鼠尾静脉采血观察骨髓抑制情况。用药 12天 ,于最后一次用药 2 4h后颈椎脱臼处死小鼠 ,剥离肿瘤 ,测量大小和称重。结果 单用CpGODN、CpGODN +5 FU、5 FU、IL 2 +5 FU的抑瘤率为 4 2 75 %、5 6 0 2 %、6 3 98%、5 7 91% (P <0 0 1) ,后两组不良反应明显 ,有显著骨髓抑制作用。结论 CpGODN对移植小鼠肝癌生长具有抑制作用 ,并能缓解化疗引起的骨髓抑制状态。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 小鼠 肝癌 生长抑制作用 造血功能
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CpG寡脱氧核苷酸序列的设计与筛选
10
作者 郑梅珍 蒋建伟 +3 位作者 徐春光 曾耀英 狄静芳 刘誉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第2期159-163,共5页
 目的:根据CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)的设计原则,设计和筛选对新生儿脐血单个核细胞免疫刺激作用较强的CpGODN;从中探求CpGODN的结构与免疫刺激活性之间的关系。方法:根据目前有关CpGODN免疫刺激活性的研究资料,设计合成15条不同结构特...  目的:根据CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)的设计原则,设计和筛选对新生儿脐血单个核细胞免疫刺激作用较强的CpGODN;从中探求CpGODN的结构与免疫刺激活性之间的关系。方法:根据目前有关CpGODN免疫刺激活性的研究资料,设计合成15条不同结构特点的硫代及非硫代修饰的CpGODN,MTT法检测CpGODN对脐血中单个核细胞的刺激作用,分别筛选出作用较强的CpGODN,然后以CpG2006和T8为阳性对照,无关序列CpG17为阴性对照,再次比较这些CpGODN对单个核细胞的刺激增殖作用。结果:设计的2条CpGODN吸光度A值(CpG1:0 280±0 0612;CpG6:0 277±0 0562)高于T8(0 241±0 0438),而与CpG2006(0 283±0 0794)相当。结论:用MTT法筛选出了2条对新生儿免疫作用较强的CpGODN;CpGODN的结构与其免疫活性密切相关,这些关系特点利于指导CpGODN的设计。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷 单个核细胞 新生儿
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新型免疫佐剂-CpG寡脱氧核苷酸 被引量:2
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作者 李娜 赵建增 +2 位作者 贺洪 王玉玲 曾亮明 《中国兽药杂志》 2008年第10期54-56,共3页
含未甲基化CpG基序的寡脱氧核苷酸能够直接刺激B细胞等抗原递呈细胞,提高Th1产量并促进细胞因子的产生及抗原递呈细胞的成熟和活化。这使CpG寡核苷酸具有良好的免疫佐剂活性,能够促进和提高抗原特异性免疫应答。本篇着重介绍了CpG寡核... 含未甲基化CpG基序的寡脱氧核苷酸能够直接刺激B细胞等抗原递呈细胞,提高Th1产量并促进细胞因子的产生及抗原递呈细胞的成熟和活化。这使CpG寡核苷酸具有良好的免疫佐剂活性,能够促进和提高抗原特异性免疫应答。本篇着重介绍了CpG寡核苷酸作为免疫佐剂的研究进展。 展开更多
关键词 佐剂 cpg 寡脱氧核苷
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CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)协同促进脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞增殖与迁移 被引量:1
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作者 杨春秀 屈已白 闫征征 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期198-204,共7页
目的探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法使用1 mg/L LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞建立体外炎症细胞模型,采用CCK-8法检测CpG ODN(500 nmol/L)对LPS诱导的巨噬细胞增殖的影响,... 目的探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法使用1 mg/L LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞建立体外炎症细胞模型,采用CCK-8法检测CpG ODN(500 nmol/L)对LPS诱导的巨噬细胞增殖的影响,采用TranswellTM实验检测CpG ODN对细胞迁移能力的影响;采用Western blot法检测p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶(ERK)、核因子κBp65(NF-κB p65)的蛋白磷酸化水平,同时使用以上通路的抑制剂SB203580、SP600125、PD98059、BAY11-7082,探讨CpG ODN发挥效应的机制;采用实时定量PCR检测CpG ODN对LPS诱导产生的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、环加氧酶2(COX2)mRNA水平的影响。结果CpG ODN协同促进LPS诱导的巨噬细胞增殖与迁移,并促进COX2、MCP-1的转录,增强JNK、ERK信号通路蛋白的磷酸化水平,并且JNK与ERK信号通路激酶抑制剂可有效降低CpG ODN的协同效应。结论CpG ODN可通过JNK与ERK途径协同促进LPS诱导的巨噬细胞增殖与迁移并促进COX2、MCP-1的转录。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷(cpg ODN) 脂多糖(LPS) 细胞增殖 细胞迁移 RAW264.7巨噬细胞
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C型CpG单链寡核苷酸对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用 被引量:4
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作者 王学菊 王智博 +4 位作者 卫红飞 吴秀丽 王莉 于永利 王丽颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期338-340,342,共4页
目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用... 目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用,并对小鼠血清中抗HSP65-MUC1抗体的类型进行了初步鉴定。结果自行设计的CpG ODN BW005能刺激人PBMC和小鼠脾细胞增生,其刺激后的培养上清具有保护Vero E6细胞免受VSV感染的作用,属于新型C型CpG ODN。将BW005与HSP65-MUC1联合应用于C57BL/6小鼠后,MUC1阳性肿瘤的发生明显延缓(平均44.8d),其终末肿瘤发生率最低(33.33%);荷瘤小鼠的生存期明显延长(平均49.5d),其终末生存率最高(66.67%)。小鼠血清中抗HSP65和抗MUC1的IgG2a抗体水平增加。结论C型CpG ODN可以增强肿瘤疫苗HSP65-MUC1的抑瘤效果,考虑与小鼠体内Th1环境的形成有关。 展开更多
关键词 cpg ODN(单链寡脱氧核苷) HSP-MUC1融合蛋白 肿瘤免疫治疗
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细胞周期素D1反义脱氧寡核苷酸对A549细胞增殖及凋亡的调控作用 被引量:3
14
作者 蒋力 闵家新 +1 位作者 李学昌 姚珂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1069-1071,共3页
提要:目的探讨脂质体转染细胞周期素D1(cyclinD1)反义脱氧寡核苷酸链(antisenseoligodeoxynucleotide,ASON)对A549细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用脂质体转染技术将cyclinD1ASON转入A549细胞培养,用MTT法检测细胞生长状况,应用流式... 提要:目的探讨脂质体转染细胞周期素D1(cyclinD1)反义脱氧寡核苷酸链(antisenseoligodeoxynucleotide,ASON)对A549细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用脂质体转染技术将cyclinD1ASON转入A549细胞培养,用MTT法检测细胞生长状况,应用流式细胞术(FACS)、检测细胞DNA梯形带等方法观察细胞凋亡及RT PCR法检测cyclinD1蛋白的表达。结果脂质体转染cyclinD1ASON组和单纯cyclinD1ASON组的A549细胞存活率较对照组显著降低(P<0.01)。脂质体转染cyclinD1ASON组cyclinD1表达水平(32%)较对照组(83%)明显减低(P<0.01),并能检测出DNA断裂。结论脂质体转染cyclinD1ASON能在体外明显抑制肺腺癌细胞的生长,且有诱导细胞凋亡、抑制细胞内cyclin D1合成的作用,可能会成为基因治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白D1 脂质体 转染 反义寡脱氧核糖核苷 细胞凋亡
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CpG-ODN纳米剂增强黏膜免疫及其对禽致病性大肠杆菌的保护效力
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作者 王艳萍 王文秀 +8 位作者 徐倩倩 王艳 莫玲 苗立中 董林 杨丽梅 郭时金 付石军 田风荣 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期11-18,共8页
为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)纳米剂,为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管(MWCNT)制备CpG-ODN纳米剂,经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ... 为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)纳米剂,为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管(MWCNT)制备CpG-ODN纳米剂,经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素18(IL-18)和Toll样受体21(TLR21)的mRNA转录水平。通过生存率、临床赋值评分和细菌接种评分评价CpG-ODN纳米剂对禽致病性大肠杆菌O2的攻毒保护效力。结果显示,制备的CpG-ODN纳米剂平均粒径为(72.30±9.54)nm,形态均一。与对照组比较,CpG-ODN组鸡只血清中IL-2和IFN-γ在12和24 h极显著升高(P<0.01);IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4和TLR21mRNA转录水平在12和24 h显著增加(P<0.05或P<0.01);IL-10 mRNA转录水平在6 h极显著增加(P<0.01),12 h显著增加(P<0.05);肠道sIgA在12和24 h显著升高(P<0.05),在48 h极显著升高(P<0.01)。与攻毒对照组相比,CpG-ODN组和抗生素组鸡只生存率均显著升高(P<0.05),临床赋值评分和细菌接种评分均显著降低(P<0.05)。结果表明,肺内给予CpG-ODN纳米剂可激活黏膜免疫反应,有效保护禽致病性大肠杆菌O2对试验鸡只的攻击,明显减轻临床症状并降低死亡率,显示良好的减抗和替抗前景。 展开更多
关键词 cpg寡脱氧核苷(cpg-ODN) 纳米剂 黏膜免疫 禽大肠杆菌 攻毒保护
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CpG-寡核苷酸免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病遗传学研究中的应用 被引量:1
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作者 买地娜·艾尔肯 刘虹 +15 位作者 王一林 王一淳 黄琴 王增胜 古再丽努尔 郎涛 聂玉玲 安利 阿孜古丽 木合塔拜尔 张晓燕 富玲 艾何买江 毛敏 王晓敏 李燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期470-475,共6页
目的:探索CpG-寡核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞染色体培养中的价值,对比国内外相关研究的差异,进一步提高CLL核型培养成功率及异常核型检出率。方法... 目的:探索CpG-寡核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞染色体培养中的价值,对比国内外相关研究的差异,进一步提高CLL核型培养成功率及异常核型检出率。方法:收集82例CLL患者的骨髓标本,分别应用植物血凝素(PHA)、CpG-寡核苷酸联合白介素-2(CpG-ODN DSP30+IL-2)刺激培养72 h后收获细胞,制备染色体,进行常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)分析。同时应用D13S25、Rb1、ATM、p53和CSP12探针进行间期荧光原位杂交(interphase fluorescence in situ hybridization,iFISH)检测。比较2种细胞刺激剂进行染色体培养及iFISH检测结果的差异性。结果:PHA与CpG-ODN DSP30+IL-22种免疫刺激法核型培养成功率(可分析分裂相t≥20个)分别为90.2%(74例)和68.3%(56例),异常核型检出率分别为13.5%(10例)和46.4%(26例)。PHA组核型培养成功率显著高于CpG-ODN DSP30+IL-2组(P=0.01),而CpG-ODN DSP30+IL-2组异常核型检出率显著高于PHA组(P=0.003)。iFISH异常核型检出率(74.4%,61例)显著高于CpG-ODN DSP30+IL-2组(P=0.000)。iFISH检测能验证CC分析检出的异常。结论:应用CpG-ODN DSP30+IL-2免疫刺激法培养CLL细胞,可提高异常核型检出率,特别是能检出提示预后差的各种易位。 展开更多
关键词 慢性淋巴细胞白血病 cpg寡脱氧核苷 染色体 细胞遗传学 间期荧光原位杂交
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反义寡聚脱氧核苷酸体外对乙型肝炎病毒基因表达的抑制作用
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作者 吴庆 张在和 《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第5期395-395,共1页
关键词 乙型肝炎病毒 反义寡脱氧核糖核苷 基因表达 基因调控
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IGF-IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡的病理学研究 被引量:6
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作者 牛朝诗 罗其中 +1 位作者 徐纪文 沈建康 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2001年第5期422-426,共5页
目的 :探讨IGF IR基因的反义硫代磷酸型寡核苷酸对胶质瘤细胞的形态学影响。方法 :根据IGF IRcDNA序列设计正义、反义寡核苷酸片段 ,并对其部分碱基进行硫代磷酸修饰。体外培养的胶质瘤细胞分别经正义寡核苷酸和反义寡核苷酸处理 ,应用... 目的 :探讨IGF IR基因的反义硫代磷酸型寡核苷酸对胶质瘤细胞的形态学影响。方法 :根据IGF IRcDNA序列设计正义、反义寡核苷酸片段 ,并对其部分碱基进行硫代磷酸修饰。体外培养的胶质瘤细胞分别经正义寡核苷酸和反义寡核苷酸处理 ,应用倒置显微镜活细胞观察、HE染色光镜观察、透射电镜及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法研究IGF IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡作用。结果 :经反义寡核苷酸转染的胶质瘤细胞中 ,呈现典型的凋亡形态学改变。凋亡细胞最早期表现为细胞体积、容量减少 ,染色质凝聚 ,继之染色质集聚于核膜下成新月状或块状 ;细胞核内染色质可完全固缩成团呈“黑洞”样或萎缩的核破裂形成一些较小的膜包绕的球体位于胞质内 ,最后出泡形成凋亡小体。DNA琼脂糖凝胶电泳分析经反义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞DNA降解片段 ,可见有明显的小分子量DNA梯状条带 ,而野生型和正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞未见DNA梯状条带。结论 :IGF IR所介导的分泌环路IGF I/IGF IR ,在胶质瘤细胞增殖和维持恶性表型中起重要作用 ;IGF IR反义硫代磷酸型寡核苷酸能诱导胶质瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 受体 胰岛素样生长因子Ⅰ 神经胶质瘤 凋良心 反义寡脱氧核糖核苷
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血管内皮生长因子反义寡核苷酸体外抑制皮肤血管瘤内皮细胞的增殖 被引量:2
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作者 雷水生 涂亚庭 +2 位作者 张端莲 胡志国 刘平 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期336-340,共5页
目的观察血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对皮肤血管瘤内皮细胞体外增殖及生物学特性的影响,并探讨其机制。方法体外培养皮肤血管瘤内皮细胞;脂质体介导VEGF反义寡核苷酸进行转染;MTT法观察其对内皮细胞生长的抑制;免疫细胞化学技... 目的观察血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对皮肤血管瘤内皮细胞体外增殖及生物学特性的影响,并探讨其机制。方法体外培养皮肤血管瘤内皮细胞;脂质体介导VEGF反义寡核苷酸进行转染;MTT法观察其对内皮细胞生长的抑制;免疫细胞化学技术检测VEGF的蛋白表达;流式细胞仪分析细胞周期变化。结果VEGF反义寡核苷酸作用后的内皮细胞生长明显受到抑制,作用后48hVEGF蛋白表达明显下降,细胞周期中S期细胞数明显减少,并于72h后抑制效应逐渐减弱。结论VEGF反义寡核苷酸能显著抑制皮肤血管瘤内皮细胞的生长,其机制是抑制细胞的增殖,而不是促进其凋亡。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 寡脱氧核糖核苷 反义 血管瘤 内皮细胞 细胞凋亡
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Toll样受体9配体CpG-ODN鼻内应用对变应性联合气道疾病炎性反应的影响 被引量:5
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作者 李洪涛 陈壮桂 +4 位作者 叶进 刘慧 邹小玲 杨海玲 张天托 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1830-1836,共7页
目的:探讨免疫刺激序列Cp G寡聚脱氧核苷酸(Cp G-ODN)鼻内应用与皮下注射对变应性联合气道疾病(ACAD)模型小鼠下气道炎性反应的影响。方法:30只清洁级雌性BALB/c鼠随机分为正常对照组(control组)、变应性鼻炎组(AR组)、变应性联合气道... 目的:探讨免疫刺激序列Cp G寡聚脱氧核苷酸(Cp G-ODN)鼻内应用与皮下注射对变应性联合气道疾病(ACAD)模型小鼠下气道炎性反应的影响。方法:30只清洁级雌性BALB/c鼠随机分为正常对照组(control组)、变应性鼻炎组(AR组)、变应性联合气道疾病组(ACAD组)、变应性联合气道疾病Cp G-ODN鼻内滴入组(Cp G i.n.组)和变应性联合气道疾病Cp G-ODN皮下注射组(Cp G i.d.组)。实验组动物依次进行腹腔卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝凝胶基础致敏和3次鼻腔激发,此后OVA或生理盐水(NS)雾化气道激发,正常对照组则给予NS。Cp G i.n.组和Cp G i.d.组分别给予10.0μg Cp G-ODN滴鼻和皮下注射,其它组给予NS滴鼻或皮下注射。观察Cp GODN干预后对鼻腔及下气道病理变化及评分,并对支气管肺泡灌洗液(BALF)行白细胞分类及嗜酸性粒细胞计数,ELISA法测定BALF和脾脏中细胞因子IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ,以及血清OVA特异性Ig E。结果:炎症细胞浸润评分示ACAD组小鼠肺部的病理改变程度高于control组和AR组(P<0.01);Cp G i.n.组炎症评分较ACAD组下降,差异有统计学显著性(P<0.05),而Cp G i.d.组炎症评分较ACAD组略有下降,但差异无统计学意义。Cp G i.n.组BALF中的白细胞总数、EOS绝对值计数、EOS百分比、BALF和脾脏淋巴细胞上清液中Th2细胞因子较ACAD组降低,差异具有统计学显著性(P<0.01)。Cp G i.d.组上述指标略低于ACAD组,但差异无统计学显著性。Cp G i.n.组血清的OVA特异性Ig E较ACAD组下降,差异有统计学显著性(P<0.05),而Cp G i.d.组与ACAD组比较有所下降,但差异无统计学显著性。结论:Cp G-ODN可通过抑制变应性鼻炎而抑制变应性联合气道疾病小鼠的下气道炎性反应,鼻内应用可能较皮下注射更有效。 展开更多
关键词 支气管哮喘 变应性鼻炎 cpg寡脱氧核糖核苷酸
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