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农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入烟草的研究 被引量:22
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作者 黄自然 徐飞 +5 位作者 庄楚雄 管志文 李乃坚 袁四清 崔植琳 戴冕 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1992年第4期1-5,共5页
柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能,对烟草等茄科作物的青枯病假单胞菌(Pseudomonassolanacearum)具有较强的杀菌效果。人工合成抗菌肽基因(122 bp)转入根癌农杆菌(Agrobnctcrium tumefaciena),感染烟草叶盘,诱导成苗。通过对卡那霉素敏感筛选... 柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能,对烟草等茄科作物的青枯病假单胞菌(Pseudomonassolanacearum)具有较强的杀菌效果。人工合成抗菌肽基因(122 bp)转入根癌农杆菌(Agrobnctcrium tumefaciena),感染烟草叶盘,诱导成苗。通过对卡那霉素敏感筛选,胭脂碱脱氢酶检定及抗菌肽片段探针杂交,确认抗菌肽基因已转入烟草。现正研究其在烟草中表达及抗青枯病的可能性。 展开更多
关键词 柞蚕抗菌肽 烟草 基因转导
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柞蚕抗菌肽的分离纯化及杀菌效应 被引量:12
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作者 邓小娟 黄自然 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期13-16,共4页
大肠杆菌 (E .coliK12 D3 1)诱导的柞蚕 (Antheraeapernyi)蛹血淋巴 ,经加热处理后 ,进行CM -Sepharose阳离子交换层析 ,FPLCPepRPC反相柱及HPLCHi-PoreC18反相柱层析 ,纯化得到一类抗菌肽 .SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其相对分子质量... 大肠杆菌 (E .coliK12 D3 1)诱导的柞蚕 (Antheraeapernyi)蛹血淋巴 ,经加热处理后 ,进行CM -Sepharose阳离子交换层析 ,FPLCPepRPC反相柱及HPLCHi-PoreC18反相柱层析 ,纯化得到一类抗菌肽 .SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其相对分子质量约为 2 4 0 0 ,氨基酸组成分析表明其富含赖氨酸、丙氨酸和甘氨酸 ,摩尔分数分别为 18 6 %、15 5 %和 13 6 % ,不含甲硫氨酸、半胱氨酸、酪氨酸和组氨酸 . 展开更多
关键词 柞蚕 抗菌肽 分离纯化 杀菌效应 革兰氏阴性细菌 阳性细菌
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柞蚕抗菌肽对水稻白叶枯病菌的抑制作用 被引量:6
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作者 董春 何汉生 +2 位作者 王润华 简玉瑜 黃自然 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1992年第4期58-62,共5页
柞蚕蛹诱导含抗菌肽的免疫血淋巴,对水稻白叶枯病病原细菌(X(?)(?)pv (?))有明显的抑菌作用,对中国白叶枯病菌Ⅳ群强致病力菌株(RX77)的抑菌圈直径达12mm。电镜观察抗菌肽作用于白叶枯病菌能使其细胞膜破坏,内容物渗出而致死亡。处理10... 柞蚕蛹诱导含抗菌肽的免疫血淋巴,对水稻白叶枯病病原细菌(X(?)(?)pv (?))有明显的抑菌作用,对中国白叶枯病菌Ⅳ群强致病力菌株(RX77)的抑菌圈直径达12mm。电镜观察抗菌肽作用于白叶枯病菌能使其细胞膜破坏,内容物渗出而致死亡。处理10~30min即有效果。将抗菌肽与白叶枯病菌按不同比例混合后接种于水稻秧苗及孕穗期的叶子上,20天后调查病斑平均长度,经方差分析认为抗菌肽对病菌致病力有显著的减弱作用。 展开更多
关键词 柞蚕抗菌肽 水稻 白叶枯病
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柞蚕核多角体病毒基因工程载体的研究——Ⅱ柞蚕核多角体蛋白基因的克隆、定位及部分DNA序列分析
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作者 庄楚雄 张秋福 +1 位作者 钟文彪 黄自然 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1990年第4期35-39,共5页
本文报道了柞蚕核型多角体病毒(Anlherdea peruyi Nuclear polybedrosis Virus,ApNPV)DNA的分离、纯化,ApNPV DNA用限制性内切酶PstI、BamHI酶解分别出现31、6个片段。用Southern转印杂交确定了核多角蛋白基因的大部分序列存在于BamHI-E... 本文报道了柞蚕核型多角体病毒(Anlherdea peruyi Nuclear polybedrosis Virus,ApNPV)DNA的分离、纯化,ApNPV DNA用限制性内切酶PstI、BamHI酶解分别出现31、6个片段。用Southern转印杂交确定了核多角蛋白基因的大部分序列存在于BamHI-E及PstI-C片段上,其大小分别为7.8Kb和6.7Kb.PstI-C片段经BamHI酶解后出现大小为4.0Kb和2.610的两个片段,将这两个片段克隆于Bluescript质粒中,并分析了4.0Kb片段其PstI端的部分DNA序列。 展开更多
关键词 柞蚕 核型多角体 病毒 基因工程
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柞蚕核多角体病毒基因工程载体的研究——Ⅱ.柞蚕核多角体病毒多角体蛋白基因的克隆、定位及部份DNA的序列分析
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作者 庄楚雄 张秋福 +1 位作者 钟文彪 黄自然 《广东蚕丝通讯》 1990年第1期29-35,共7页
本文报道了柞蚕多纲角体病毒(Anthesaea Pernyt Nmcleic polyhedrosis visus, ApNPV)DNA的分离、纯化,用限制性内切酶PstI、BamHI酶解分别切成引及6个DNA片段。用茴蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(AcNPV)DNA的多角体蛋白基因HindⅢ-Ⅴ片段作探... 本文报道了柞蚕多纲角体病毒(Anthesaea Pernyt Nmcleic polyhedrosis visus, ApNPV)DNA的分离、纯化,用限制性内切酶PstI、BamHI酶解分别切成引及6个DNA片段。用茴蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(AcNPV)DNA的多角体蛋白基因HindⅢ-Ⅴ片段作探针作Southevn转印杂交确定ApNPV多角体蛋白基因在BamHI-E及PstI-C片段之中,它们的大小分别为7.8kb及6.7kb。PstI-C片段用BamHI酶解后克隆于Bluscript质粒,扦入片段分别为4.0kb及2.7kb,与PstI-C片段的规格相同。分析了4.0kb片段的124bp的DNA核苷酸序列,初步确了ApNPV多角体蛋白基因的定位及方向。 展开更多
关键词 柞蚕核多角体病毒 限制性内切酶图谱 基因克隆
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柞蚕微孢子虫单克隆抗体的研制及诊断 被引量:5
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作者 唐啸尘 黄自然 +1 位作者 宁波 张春艳 《蚕业科学》 CAS CSCD 1999年第4期221-224,共4页
研究报告了柞蚕微孢子虫Nosemaantheraeae(简称N .a)单克隆抗体制备及免疫胶体金银染色法 (IGSS)诊断的结果。用抗N .a的单抗结合间接免疫胶体金银染色法 (IGSS)对 6种微孢子虫进行检测 ,在光学显微镜下柞蚕微孢子呈现特异的褐色 ,能与... 研究报告了柞蚕微孢子虫Nosemaantheraeae(简称N .a)单克隆抗体制备及免疫胶体金银染色法 (IGSS)诊断的结果。用抗N .a的单抗结合间接免疫胶体金银染色法 (IGSS)对 6种微孢子虫进行检测 ,在光学显微镜下柞蚕微孢子呈现特异的褐色 ,能与包括家蚕微孢子虫在内的其它 5种微孢子虫加以区别。 展开更多
关键词 柞蚕 微孢子虫 单克隆抗体 诊断 IGSS
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