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鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达被引量：9: 1; 作者胡敬东崔治中赵宏坤《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期264-268,共5页; 运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的Ch... 展开更多; 关键词 IL-18 克隆 DNA GST 诱导编码区白细胞介素18 高效表达原核表达质粒 IPTG; 在线阅读下载PDF 职称材料

海兰鸡白细胞介素-18全基因的克隆与序列分析被引量：9: 2; 作者陈红英崔保安 +2 位作者黄青云李新生王学斌《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期48-50,共3页; 白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子,在调节Thl型细胞免疫应答中起重要作用。根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计一对引物,经植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾淋巴细胞后,提取其... 展开更多; 关键词鸡IL-18基因克隆序列测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

NDV F基因真核表达质粒的构建及其与鸡IL-18基因联合免疫的初步研究被引量：3: 3; 作者陈红英崔沛 +4 位作者李新生崔保安段廷云陈果李成《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期511-516,共6页; 为了探索鸡新城疫病毒(NDV)F蛋白的免疫原性及鸡白细胞介素-18(IL-18)的免疫增强作用,通过PCR和酶切方法将NDV F基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达质粒pcDNA-F。用质粒pcDNA-F单独或与鸡IL-18重组真核表达质粒pIL-18联合... 展开更多; 关键词鸡新城疫病毒 F基因真核表达鸡白细胞介素-18; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡IL-18成熟蛋白基因原核表达载体的构建及多克隆抗体的制备被引量：2: 4; 作者刘一尘张春杰 +4 位作者程相朝张谦李银聚吴庭才赵战勤《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第2期110-113,共4页; 应用RT-PCR技术得到鸡IL-18成熟蛋白基因(chicken mature interleukin-18),将克隆片段与原核表达载体pET28a+连接,构建了重组表达载体pET28a+-ChMIL18,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞,获得重组表达菌株。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析后,... 展开更多; 关键词鸡IL-18成熟蛋白基因原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

海兰鸡IL-18全基因的克隆与序列分析被引量：3: 5; 作者陈红英崔保安 +4 位作者黄青云魏战勇王学斌方丽云陈泽贵《动物医学进展》 CSCD 2005年第11期49-52,共4页; IL-18是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子,在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计一对引物,经植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾淋巴细胞后,提取其总RNA,经反转录-聚合酶链反应(RT... 展开更多; 关键词鸡IL-18基因克隆序列测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

NDV F与ChIL-18融合基因“自杀性”质粒的构建: 6; 作者刘勤妮聂奎《安徽农学通报》 2008年第5期21-24,共4页; 根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamHⅠ位点、下游引入SalⅠ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入SalⅠ位点、下游引入HindⅢ、Bam... 展开更多; 关键词鸡新城疫病毒F基因鸡源性白细胞介素18 甲病毒载体核酸疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

固始鸡白细胞介素18全基因的克隆与序列分析被引量：5: 7; 作者陈红英崔保安 +3 位作者金钺贾艳艳刘金朋段志刚《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期478-481,共4页; 根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计1对引物,应用RT-PCR技术,无需用非特异性免疫原如ConA,PHA等刺激分离的脾淋巴细胞,直接提取总RNA,扩增固始鸡IL-18基因,并进行克隆和测序.测序结果:获得了固始鸡IL-18基因全序列,其大小为... 展开更多; 关键词鸡IL-18基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达鸡白细胞介素18重组禽痘病毒的构建及其表达产物生物学活性的检测: 8; 作者陈红英黄青云 +3 位作者崔保安李新生管倩刘金朋《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期6-10,共5页; 为构建表达鸡IL-18的重组禽痘病毒,将含痘病毒启动子LP2EP2驱动的鸡IL-18基因插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681/ChIL-18。将pSY681/ChIL-18转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维... 展开更多; 关键词鸡IL-18基因重组禽痘病毒构建生物学活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立: 9; 作者苏倩倩李恩扩 +2 位作者张海滨周霞胡敬东《山东农业科学》 2012年第4期5-9,共5页; 将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chicken interleukin 18 mature protein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶... 展开更多; 关键词鸡白细胞介素 18成熟蛋白(mChIL-18) 原核表达蛋白纯化间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达被引量：9: 1; 作者胡敬东崔治中赵宏坤; 机构山东农业大学山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期264-268,共5页; 文摘运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的ChIL 18 cDNA与国外报道的完全一致,包括终止密码子在内其编码区的长度为510bp,编码169个氨基酸残基的蛋白质。将ChIL 18 成熟肽段编码区定向克隆到原核表达载体 pGEX 6P 1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建成原核表达质粒 pGEX ChIL18。该质粒的 BL21(DE3)LysS转化菌在 IPTG的诱导下可高效表达GST ChIL18基因融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的32%。; 关键词 IL-18 克隆 DNA GST 诱导编码区白细胞介素18 高效表达原核表达质粒 IPTG; Keywords chicken interleukin-18 mature protein cloning prokaryotic expression; 分类号 S858 [农业科学—临床兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海兰鸡白细胞介素-18全基因的克隆与序列分析被引量：9: 2; 作者陈红英崔保安黄青云李新生王学斌; 机构河南农业大学牧医工程学院华南农业大学兽医学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期48-50,共3页; 文摘白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子,在调节Thl型细胞免疫应答中起重要作用。根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计一对引物,经植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾淋巴细胞后,提取其总RNA,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行了T-A克隆、测序,获得了中国海兰鸡IL-18基因全序列,其大小为597 bp,与在GenBank中查得的鸡IL-18基因进行比较发现,中国海兰鸡IL-18基因与Schneider报道的鸡IL-18基因序列完全一致,为进一步研究鸡IL-18基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。; 关键词鸡IL-18基因克隆序列测定; Keywords chicken interleukin-18 gene cloning sequencing; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NDV F基因真核表达质粒的构建及其与鸡IL-18基因联合免疫的初步研究被引量：3: 3; 作者陈红英崔沛李新生崔保安段廷云陈果李成; 机构河南农业大学牧医工程学院河南省动物疫病预防控制中心漯河出入境检验检疫局; 出处《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期511-516,共6页; 基金国家"十一五"科技支撑计划专项(2006BAD06A08); 文摘为了探索鸡新城疫病毒(NDV)F蛋白的免疫原性及鸡白细胞介素-18(IL-18)的免疫增强作用,通过PCR和酶切方法将NDV F基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达质粒pcDNA-F。用质粒pcDNA-F单独或与鸡IL-18重组真核表达质粒pIL-18联合免疫14日龄SPF鸡。首免后每周采取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和MTT法分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免后第14 d用NDV强毒F48E9株进行攻击。结果表明,质粒pcDNA-F与pIL-18联合免疫显著提高鸡体的细胞免疫水平,并且提供了50%免疫保护,这为ND的防治开辟了新的途径。; 关键词鸡新城疫病毒 F基因真核表达鸡白细胞介素-18; Keywords newcastle disease virus F gene eukaryotic expression chicken interleukin-18; 分类号 Q352 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡IL-18成熟蛋白基因原核表达载体的构建及多克隆抗体的制备被引量：2: 4; 作者刘一尘张春杰程相朝张谦李银聚吴庭才赵战勤; 机构河南科技大学动物科技学院郑州后羿集团; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第2期110-113,共4页; 文摘应用RT-PCR技术得到鸡IL-18成熟蛋白基因(chicken mature interleukin-18),将克隆片段与原核表达载体pET28a+连接,构建了重组表达载体pET28a+-ChMIL18,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞,获得重组表达菌株。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析后,用含有融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳颗粒免疫家兔,制备兔抗鸡IL-18多克隆抗体,Western-Blot检测抗体效价和特异性。结果表明,鸡IL-18在BL21中得到了表达,相对分子质量约为23kD,获得了具有较高效价的特异性多克隆抗体。为进一步研究鸡IL-18成熟蛋白的生物学活性和作用机制奠定了基础。; 关键词鸡IL-18成熟蛋白基因原核表达多克隆抗体; Keywords chicken mature interleukin - 18 gene Prokaryon expression Polyclonal antibody; 分类号 S831 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海兰鸡IL-18全基因的克隆与序列分析被引量：3: 5; 作者陈红英崔保安黄青云魏战勇王学斌方丽云陈泽贵; 机构河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室华南农业大学兽医学院重庆市永川农业行政执法大队; 出处《动物医学进展》 CSCD 2005年第11期49-52,共4页; 文摘 IL-18是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子,在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计一对引物,经植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾淋巴细胞后,提取其总RNA,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行了T-A克隆、测序,获得了中国海兰鸡IL-18基因全序列,其大小为597 bp,与GenBank中查得的鸡IL-18基因进行比较发现,中国海兰鸡IL-18基因与Schneider报道的鸡IL-18基因序列完全一致,为进一步研究鸡IL-18基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。; 关键词鸡IL-18基因克隆序列测定; Keywords chicken interleukin-18 gene cloning sequence analysis; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NDV F与ChIL-18融合基因“自杀性”质粒的构建: 6; 作者刘勤妮聂奎; 机构西南大学动物科技学院; 出处《安徽农学通报》 2008年第5期21-24,共4页; 文摘根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamHⅠ位点、下游引入SalⅠ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入SalⅠ位点、下游引入HindⅢ、BamHⅠ位点。以鸡新城疫病毒Lasota株RNA为模板RT-PCR扩增其F基因,将F基因插入pMD18-T的BamHⅠ与SalⅠ位点中。同时扩增上游带有SalⅠ位点、下游带有HindⅢ、BamHⅠ位点的ChIL-18基因,并将其插入到含有F基因的pMD18-T质粒的SalⅠ、HindⅢ位点之间,从而使NDV F基因与ChIL-18基因形成具有一个完整阅读框的融合基因,然后将融合基因片段定向克隆到pSFV单一启动子(CMV)下游,构建成F-ChIL-18融合基因重组"自杀性"质粒pSFV-F-ChIL-18。; 关键词鸡新城疫病毒F基因鸡源性白细胞介素18 甲病毒载体核酸疫苗; Keywords F gene of Newcastle disease virus Alphavirus vector chicken interleukin -18 DNA vaccine; 分类号 Q933 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名固始鸡白细胞介素18全基因的克隆与序列分析被引量：5: 7; 作者陈红英崔保安金钺贾艳艳刘金朋段志刚; 机构河南农业大学牧医工程学院; 出处《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期478-481,共4页; 基金国家“十一五”科技支撑计划专项(2006BAD06A08); 文摘根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计1对引物,应用RT-PCR技术,无需用非特异性免疫原如ConA,PHA等刺激分离的脾淋巴细胞,直接提取总RNA,扩增固始鸡IL-18基因,并进行克隆和测序.测序结果:获得了固始鸡IL-18基因全序列,其大小为597 bp;序列比较分析发现,克隆的固始鸡IL-18基因与Schneider报道的鸡IL-18基因序列核苷酸同源性为99.8%,有1个碱基发生非同义变异,氨基酸同源性为99.5%;固始鸡与人和其他动物的IL-18基因序列分析和系统进化分析表明,IL-18基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高.; 关键词鸡IL-18基因克隆序列分析; Keywords chicken interleukin-18 gene cloning sequence analysis; 分类号 S851.31 [农业科学—预防兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达鸡白细胞介素18重组禽痘病毒的构建及其表达产物生物学活性的检测: 8; 作者陈红英黄青云崔保安李新生管倩刘金朋; 机构河南农业大学牧医工程学院华南农业大学兽医学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期6-10,共5页; 基金国家“十一五”科技支撑计划专项(2006BAD06A08); 文摘为构建表达鸡IL-18的重组禽痘病毒,将含痘病毒启动子LP2EP2驱动的鸡IL-18基因插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681/ChIL-18。将pSY681/ChIL-18转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达鸡IL-18的重组禽痘病毒rFPV-ChIL-18。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选后,对重组病毒rFPV-ChIL-18又进行了多次蚀斑克隆。以重组禽痘病毒DNA为模板,利用鸡IL-18基因特异引物进行PCR,扩增出1条约0.6 kb的带。收集含鸡IL-18蛋白的细胞上清液进行MTT试验,表达的产物能明显提高鸡淋巴细胞的转化率。; 关键词鸡IL-18基因重组禽痘病毒构建生物学活性; Keywords chicken interleukin-18 gene Recombinant fowlpox virus Construction Biologic activity; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立: 9; 作者苏倩倩李恩扩张海滨周霞胡敬东; 机构山东农业大学动物医学院/山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室; 出处《山东农业科学》 2012年第4期5-9,共5页; 基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2006BS06015) 山东省自然科学基金(Y2008D12)资助; 文摘将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chicken interleukin 18 mature protein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶标二抗稀释倍数,建立检测ChIL-18成熟蛋白抗体的间接ELISA方法。经方阵滴定结果确定最佳抗原包被质量浓度为4μg/ml,阳性血清稀释比例为1∶104,羊抗鼠IgG辣根过氧化物酶结合物最佳稀释比例为1∶12 000,抗原抗体最佳结合时间是1.5 h,血清与二抗最适反应时间为1 h。阴性、阳性血清的判定标准为:被检样本的OD值是一组阴性样本OD值的2或3倍且OD450≥0.5,即为阳性,比值以P/N表示1,.5<P/N<2.0为可疑,P/N<1.5为阴性。本试验结果证明该方法具有良好的稳定性、重复性和特异性,为下一步单抗的筛选鉴定奠定了必要的基础。; 关键词鸡白细胞介素 18成熟蛋白(mChIL-18) 原核表达蛋白纯化间接ELISA; Keywords chicken interleukin 18 mature protein Prokaryotic expression Protein purification Indi- rect ELISA; 分类号 Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达	胡敬东崔治中赵宏坤	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	海兰鸡白细胞介素-18全基因的克隆与序列分析	陈红英崔保安黄青云李新生王学斌	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	NDV F基因真核表达质粒的构建及其与鸡IL-18基因联合免疫的初步研究	陈红英崔沛李新生崔保安段廷云陈果李成	《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鸡IL-18成熟蛋白基因原核表达载体的构建及多克隆抗体的制备	刘一尘张春杰程相朝张谦李银聚吴庭才赵战勤	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	海兰鸡IL-18全基因的克隆与序列分析	陈红英崔保安黄青云魏战勇王学斌方丽云陈泽贵	《动物医学进展》 CSCD	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	NDV F与ChIL-18融合基因“自杀性”质粒的构建	刘勤妮聂奎	《安徽农学通报》	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	固始鸡白细胞介素18全基因的克隆与序列分析	陈红英崔保安金钺贾艳艳刘金朋段志刚	《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料
8	表达鸡白细胞介素18重组禽痘病毒的构建及其表达产物生物学活性的检测	陈红英黄青云崔保安李新生管倩刘金朋	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立	苏倩倩李恩扩张海滨周霞胡敬东	《山东农业科学》	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料