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改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA
被引量:
6
1
作者
蔡翠霞
肖维威
+4 位作者
康文杰
周琳华
吴永彬
郑远金
马文丽
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期210-214,共5页
旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,...
旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。
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关键词
chelex-
100
法
ctab
法
dna
提取
pcr
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职称材料
改良CTAB法提取鸢尾属植物DNA
被引量:
9
2
作者
李承哲
刘占林
+2 位作者
杨红超
黄安玲
刘芳
《现代农业科技》
2011年第8期31-31,34,共2页
鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取...
鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取时间。所提取的DNA纯度高,可满足以PCR扩增为基础的试验需要。
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关键词
鸢尾属
dna
提取
改良
ctab
法
pcr
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职称材料
小麦基因组DNA改良提取方法的探讨
被引量:
17
3
作者
思彬彬
张超
+2 位作者
徐如宏
任明见
张庆勤
《山地农业生物学报》
2005年第2期142-145,共4页
以标准SDS法、CTAB法、改良SDS法、CTAB法对小麦基因组DNA提取质量进行了比较研究。结果表明,标准方法所提DNA浓度和纯度都较好,但耗时、设备条件要求高;改良方法所提DNA浓度和纯度虽不如标准法,但依然符合实验要求,而且省时、经济、易...
以标准SDS法、CTAB法、改良SDS法、CTAB法对小麦基因组DNA提取质量进行了比较研究。结果表明,标准方法所提DNA浓度和纯度都较好,但耗时、设备条件要求高;改良方法所提DNA浓度和纯度虽不如标准法,但依然符合实验要求,而且省时、经济、易操作。改良CTAB法提取DNA质量好于改良SDS法,改良方法尤其改良CTAB法是一种适合小麦基因组DNA提取的方法。此方法可用于教学实验和科研中对大量材料DNA的提取,其质量可满足对DNA质量要求较高的实验需要,如AFLP技术。
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关键词
小麦
基因组
dna
ctab
法
SDS法
pcr
扩增
提取方法
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职称材料
黄连木叶片基因组DNA提取方法
被引量:
2
4
作者
程世平
施江
+3 位作者
史国安
李亚杰
宋程威
尹小芳
《河南科技大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2010年第3期71-73,共3页
黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的...
黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的质量。结果表明:改良CTAB法提取的DNA电泳条带清晰无RNA等污染,OD260和OD280比值在1.8左右,RAPD扩增条带清晰、无弥散现象、亮度均一。说明改良CTAB法提取的DNA纯度较高,适用于PCR扩增反应。
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关键词
黄连木
基因组
dna
提取
改良
ctab
法
电泳
pcr
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职称材料
提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究
被引量:
8
5
作者
李丽婷
许文涛
+2 位作者
郭星
姚业成
黄昆仑
《中国粮油学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期122-127,共6页
通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道菌群的真实情况。采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内。通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR...
通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道菌群的真实情况。采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内。通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR,变性梯度凝胶电泳(DGGE)对改进方法及两种试剂盒法提取DNA的结果进行比较,评价了所建立的高效提取方法。与试剂盒相比,改进的方法DNA得率较高,简便快速,成本低廉。同时后续的PCR鉴定及DGGE菌群多样性分析显示,改进的方法可以更好地揭示鼠肠道菌群分布和特性。
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关键词
鼠肠道微生物
dna
提取方法
ctab
/SDS实时定量
pcr
变性梯度凝胶电泳
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职称材料
白砂糖DNA提取方法的比较
6
作者
齐玲倩
刘秀
+3 位作者
丁梦璇
李静媛
刘远远
尹建军
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期244-248,共5页
为了得到高效的白砂糖DNA提取方法,以5种白砂糖为研究对象,从前处理方法、裂解液成分及DNA纯化方法等方面对传统CTAB法进行改良,并比较了CTAB法和改良CTAB法的提取效果,结果表明:改良CTAB法提取的白砂糖DNA浓度都在2.60μg/m L以上,纯度...
为了得到高效的白砂糖DNA提取方法,以5种白砂糖为研究对象,从前处理方法、裂解液成分及DNA纯化方法等方面对传统CTAB法进行改良,并比较了CTAB法和改良CTAB法的提取效果,结果表明:改良CTAB法提取的白砂糖DNA浓度都在2.60μg/m L以上,纯度在1.8左右,且通过实时荧光定量PCR能扩增出18Sr DNA基因的对应荧光信号。因此,改良CTAB法能够高效地提取白砂糖的DNA,可为后续的分子检测奠定基础。
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关键词
白砂糖
dna
提取
改良
ctab
法
实时荧光定量
pcr
(real-time
FLUORESCENCE
quantification
pcr
q
pcr
)
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职称材料
题名
改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA
被引量:
6
1
作者
蔡翠霞
肖维威
康文杰
周琳华
吴永彬
郑远金
马文丽
机构
南方医科大学基因工程研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期210-214,共5页
基金
国家公益性行业科研专项(200910265)
广东省科技计划项目(2008B080701027)
文摘
旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。
关键词
chelex-
100
法
ctab
法
dna
提取
pcr
Keywords
chelex-100 method ctab method dna extraction pcr
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
改良CTAB法提取鸢尾属植物DNA
被引量:
9
2
作者
李承哲
刘占林
杨红超
黄安玲
刘芳
机构
西北大学生命科学学院
出处
《现代农业科技》
2011年第8期31-31,34,共2页
基金
陕西省教育厅项目(2010JK861)
文摘
鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取时间。所提取的DNA纯度高,可满足以PCR扩增为基础的试验需要。
关键词
鸢尾属
dna
提取
改良
ctab
法
pcr
Keywords
Iris
dna
extraction
modified
ctab
method
pcr
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
S682.1 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
小麦基因组DNA改良提取方法的探讨
被引量:
17
3
作者
思彬彬
张超
徐如宏
任明见
张庆勤
机构
贵州大学麦作研究中心
贵州大学农学院
出处
《山地农业生物学报》
2005年第2期142-145,共4页
基金
国家自然科学基金(3935001
39570455
+2 种基金
39960048)
贵州省小麦"十五"攻关资助项目(15001A5-2
15001A-9)
文摘
以标准SDS法、CTAB法、改良SDS法、CTAB法对小麦基因组DNA提取质量进行了比较研究。结果表明,标准方法所提DNA浓度和纯度都较好,但耗时、设备条件要求高;改良方法所提DNA浓度和纯度虽不如标准法,但依然符合实验要求,而且省时、经济、易操作。改良CTAB法提取DNA质量好于改良SDS法,改良方法尤其改良CTAB法是一种适合小麦基因组DNA提取的方法。此方法可用于教学实验和科研中对大量材料DNA的提取,其质量可满足对DNA质量要求较高的实验需要,如AFLP技术。
关键词
小麦
基因组
dna
ctab
法
SDS法
pcr
扩增
提取方法
Keywords
wheat
genome
dna
ctab
SDS
pcr
amplification
extraction
method
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
Q523 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
黄连木叶片基因组DNA提取方法
被引量:
2
4
作者
程世平
施江
史国安
李亚杰
宋程威
尹小芳
机构
河南科技大学洛阳市牡丹生物学重点实验室
出处
《河南科技大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2010年第3期71-73,共3页
基金
国家自然科学青年基金项目(30700078)
河南科技大学博士启动基金项目(09001062)
河南科技大学SRTP资助项目(2009130)
文摘
黄连木叶片中酚类化合物、色素、多糖和其它次生代谢物质含量较高,这给黄连木基因组DNA提取带来困难。为了从黄连木叶片中提取高质量基因组DNA,本文运用CTAB法和改良CTAB法提取黄连木基因组DNA,通过定性、定量及PCR分析检测所提取DNA的质量。结果表明:改良CTAB法提取的DNA电泳条带清晰无RNA等污染,OD260和OD280比值在1.8左右,RAPD扩增条带清晰、无弥散现象、亮度均一。说明改良CTAB法提取的DNA纯度较高,适用于PCR扩增反应。
关键词
黄连木
基因组
dna
提取
改良
ctab
法
电泳
pcr
Keywords
Pistacia chinesis Bunge
dna
extraction
Improved
ctab
method
Gelelectrophoresis
pcr
分类号
Q949.93 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究
被引量:
8
5
作者
李丽婷
许文涛
郭星
姚业成
黄昆仑
机构
中国农业大学食品科学与营养工程学院
农业部转基因产品检验监督测试中心
出处
《中国粮油学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期122-127,共6页
基金
国家高技术研究发展计划863项目(2006AA10Z440)
国家自然科学基金项目(2007-Z8)
文摘
通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道菌群的真实情况。采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内。通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR,变性梯度凝胶电泳(DGGE)对改进方法及两种试剂盒法提取DNA的结果进行比较,评价了所建立的高效提取方法。与试剂盒相比,改进的方法DNA得率较高,简便快速,成本低廉。同时后续的PCR鉴定及DGGE菌群多样性分析显示,改进的方法可以更好地揭示鼠肠道菌群分布和特性。
关键词
鼠肠道微生物
dna
提取方法
ctab
/SDS实时定量
pcr
变性梯度凝胶电泳
Keywords
rat intestinal microflora,
dna
extraction
method
,
ctab
/SDS, real- time quantitative
pcr
, DGGE
分类号
Q-33 [生物学]
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职称材料
题名
白砂糖DNA提取方法的比较
6
作者
齐玲倩
刘秀
丁梦璇
李静媛
刘远远
尹建军
机构
中国食品发酵工业研究院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期244-248,共5页
文摘
为了得到高效的白砂糖DNA提取方法,以5种白砂糖为研究对象,从前处理方法、裂解液成分及DNA纯化方法等方面对传统CTAB法进行改良,并比较了CTAB法和改良CTAB法的提取效果,结果表明:改良CTAB法提取的白砂糖DNA浓度都在2.60μg/m L以上,纯度在1.8左右,且通过实时荧光定量PCR能扩增出18Sr DNA基因的对应荧光信号。因此,改良CTAB法能够高效地提取白砂糖的DNA,可为后续的分子检测奠定基础。
关键词
白砂糖
dna
提取
改良
ctab
法
实时荧光定量
pcr
(real-time
FLUORESCENCE
quantification
pcr
q
pcr
)
Keywords
white granulated sugar
dna
extraction
the modified
ctab
method
real -time fluorescence quanti-fication
pcr
(q
pcr
)
分类号
TS241 [轻工技术与工程—制糖工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA
蔡翠霞
肖维威
康文杰
周琳华
吴永彬
郑远金
马文丽
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
6
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职称材料
2
改良CTAB法提取鸢尾属植物DNA
李承哲
刘占林
杨红超
黄安玲
刘芳
《现代农业科技》
2011
9
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职称材料
3
小麦基因组DNA改良提取方法的探讨
思彬彬
张超
徐如宏
任明见
张庆勤
《山地农业生物学报》
2005
17
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职称材料
4
黄连木叶片基因组DNA提取方法
程世平
施江
史国安
李亚杰
宋程威
尹小芳
《河南科技大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2010
2
在线阅读
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职称材料
5
提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究
李丽婷
许文涛
郭星
姚业成
黄昆仑
《中国粮油学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010
8
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职称材料
6
白砂糖DNA提取方法的比较
齐玲倩
刘秀
丁梦璇
李静媛
刘远远
尹建军
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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职称材料
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