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O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒单抗制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立
1
作者
廖焕程
石正旺
+6 位作者
罗俊聪
王婉莹
冯露
周静
张帆
石鑫泰
田宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期4012-4020,共9页
本研究旨在纯化O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒抗原,并制备单克隆抗体,为口蹄疫新型Cathay毒株的研究提供生物材料。PEG沉淀法纯化O型口蹄疫Cathay毒株抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,用间接ELISA方法筛选阳性...
本研究旨在纯化O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒抗原,并制备单克隆抗体,为口蹄疫新型Cathay毒株的研究提供生物材料。PEG沉淀法纯化O型口蹄疫Cathay毒株抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,用间接ELISA方法筛选阳性细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得2株能够稳定分泌特异性针对O型口蹄疫Cathay株病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为10E6与11C7。叠加试验表明,两株单抗的叠加率为49.45%,识别不同的抗原表位。间接ELISA和IFA试验显示,两株单抗与O型口蹄疫Cathay株病毒具有良好的反应性。单抗特异性检测结果表明,2株单抗均能特异性识别Cathay株口蹄疫病毒,不与其他口蹄疫病毒毒株交叉反应。抗体亚型鉴定结果显示,10E6单抗的轻链为Kappa链,11C7单抗的轻链为Lamda链,两株单抗重链类型均为IgG2a。结果表明,本研究成功制备了两株特异性结合O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒的单克隆抗体,两株单抗均具有良好的反应性与特异性。应用两株单抗建立O型口蹄疫Cathay病毒的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为O型口蹄疫Cathay毒株的快速诊断防控与研究建立了基础。
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关键词
O
型
口蹄疫病毒
cathay拓扑型
杂交瘤细胞
单克隆抗体
ELISA
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职称材料
题名
O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒单抗制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立
1
作者
廖焕程
石正旺
罗俊聪
王婉莹
冯露
周静
张帆
石鑫泰
田宏
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期4012-4020,共9页
基金
2022甘肃省创新联合体-家畜重要疫病诊断研制与产业化(22ZD6NA012)
国家重点研发计划项目(2021YFD1800300)
+4 种基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助
国家生猪技术创新中心(NCTIP-XD/C03)
中国农业科学院创新计划(CAAS-CSLPDC-202302)
2023农业技术产业体系建设(CARS-35)
甘肃省科技重大专项计划(22ZD6NA001)。
文摘
本研究旨在纯化O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒抗原,并制备单克隆抗体,为口蹄疫新型Cathay毒株的研究提供生物材料。PEG沉淀法纯化O型口蹄疫Cathay毒株抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,用间接ELISA方法筛选阳性细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得2株能够稳定分泌特异性针对O型口蹄疫Cathay株病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为10E6与11C7。叠加试验表明,两株单抗的叠加率为49.45%,识别不同的抗原表位。间接ELISA和IFA试验显示,两株单抗与O型口蹄疫Cathay株病毒具有良好的反应性。单抗特异性检测结果表明,2株单抗均能特异性识别Cathay株口蹄疫病毒,不与其他口蹄疫病毒毒株交叉反应。抗体亚型鉴定结果显示,10E6单抗的轻链为Kappa链,11C7单抗的轻链为Lamda链,两株单抗重链类型均为IgG2a。结果表明,本研究成功制备了两株特异性结合O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒的单克隆抗体,两株单抗均具有良好的反应性与特异性。应用两株单抗建立O型口蹄疫Cathay病毒的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为O型口蹄疫Cathay毒株的快速诊断防控与研究建立了基础。
关键词
O
型
口蹄疫病毒
cathay拓扑型
杂交瘤细胞
单克隆抗体
ELISA
Keywords
foot-and-mouth disease virus type O
cathay
topotype
hybridoma cells
monoclonal antibody
ELISA
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒单抗制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立
廖焕程
石正旺
罗俊聪
王婉莹
冯露
周静
张帆
石鑫泰
田宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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已选择
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