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深低温处理脊髓缺血再灌注后Caspase12的表达情况 被引量:1
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作者 朱小兰 周正芳 +7 位作者 任琼 朱平 郭惠明 富旗 范小平 陈寄梅 庄建 范瑞新 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第2期208-210,共3页
目的:观察深低温对大鼠脊髓缺血再灌注的保护作用及对Caspase12表达的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分为3组:深低温18℃处理组(A组);常温手术对照组(B组);常温假手术组(C组)。每组分为6h、24h、1... 目的:观察深低温对大鼠脊髓缺血再灌注的保护作用及对Caspase12表达的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分为3组:深低温18℃处理组(A组);常温手术对照组(B组);常温假手术组(C组)。每组分为6h、24h、1周三个不同时间点取L2~L5段的脊髓,每个时间点5只大鼠,采用普通病理HE染色、Nissl染色、电镜从形态学上观察脊髓组织,免疫组化检测和RT—qPCR检测缺血再灌注后脊髓组织Caspase12蛋白和mRNA的表达变化。结果:组织形态学观察A、B组病理改变均较c组严重,且A组比B组轻.病理学累积评分A、c组明显低于B组(P〈0.01);免疫组化检测和RT-qPCR检测结果分别显示,Caspase12蛋白和mRNA在A、B组各时间段均高于C组,且A组升高程度比B组低(P〈0.05)。结论:深低温对大鼠脊髓缺血再灌注有保护作用。并且可能通过抑制Caspase12的表达而发挥其保护作用。 展开更多
关键词 低温 脊髓损伤 再灌注损伤 caspase12
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IGF-1R基因沉默对L02细胞过氧化损伤时Caspase12表达的影响 被引量:1
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作者 徐建华 卢绮萍 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期1871-1874,共4页
目的:成功构建稳定沉默表达IGF-1R基因质粒,并转染至L02细胞(人正常肝细胞),观察IGF-1R基因沉默对L02细胞过氧化损伤时经内质网途径特异性凋亡蛋白Caspase12表达的影响。方法:构建针对L02细胞IGF-1R基因的短发夹状RNA(shRNA),将4种不同... 目的:成功构建稳定沉默表达IGF-1R基因质粒,并转染至L02细胞(人正常肝细胞),观察IGF-1R基因沉默对L02细胞过氧化损伤时经内质网途径特异性凋亡蛋白Caspase12表达的影响。方法:构建针对L02细胞IGF-1R基因的短发夹状RNA(shRNA),将4种不同序列的Sh-H-IGF1R-1108、Sh-H-IGF1R-2797、Sh-H-IGF1R-3215、Sh-H-IGF1R-3787质粒(设为实验组)以及含与IGF-1R无关序列的Sh-H-IGF1R-V1质粒(设为阳性对照组)和空白质粒Sh-H-IGF1R-V2(设为阴性对照组)分别转染L02细胞,24 h后用RTPCR方法检测IGF-1R表达水平,筛选出稳定沉默IGF-1R基因的质粒。随后进行下一步实验分组:空白对照组(A组)、过氧化损伤组(B组)、阴性质粒转染组(C组)、目的基因转染组(D组)。12 h后收集细胞,采样待测,用Western Blot法检测各组Caspase12表达。结果:各实验组与Sh-H-IGF1R-V1组及Sh-H-IGF1R-V2组比较扩增倍数均降低(P<0.05),其中Sh-H-IGF1R-3215组(0.02±0.01)与Sh-H-IGF1R-3787(0.05±0.05)沉默效果最稳定,但后组重复性更好。B组(2.41±0.03)、C组(2.45±0.02)、D组(3.60±0.06)Caspase12表达均较A组(0.34±0.02)升高(P<0.01),C组较B组略升高(P>0.05),D组较B、C组显著升高(P<0.01)。结论:4种针对IGF-1R基因沉默质粒均构建成功,并成功转染至人L02细胞(人正常肝细胞),沉默效果最理想的质粒为Sh-H-IGF1R-3787。IGF-1R靶向shRNA质粒可通过沉默L02细胞IGF-1R表达加重细胞凋亡,间接验证了IGF-1/IGF-1R信号通路对L02细胞过氧化损伤时经内质网途经的细胞凋亡程序活化有一定的调控作用。 展开更多
关键词 质粒沉默 IGF-1R SHRNA caspase12
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独活和独活香豆素对帕金森病模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12表达的影响 被引量:6
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作者 裴媛 马进 +17 位作者 李姗 马贤德 王丽 肖潇雨 李昀泽 梁森 李辉 潘跃 曹佳妮 张帆 隋辰 郝靖萍 刘玥 李若冰 陈思佳 王超 梁静 国郑 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第11期2579-2582,共4页
目的:通过观察独活及独活香豆素对乳胞素(Lactacystin)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12表达水平的影响,探讨其与内质网应激的关系。方法:利用乳胞素(Lactacystin)脑黑质致密部注射建立PD大鼠模型,于第7、14、21、28天... 目的:通过观察独活及独活香豆素对乳胞素(Lactacystin)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12表达水平的影响,探讨其与内质网应激的关系。方法:利用乳胞素(Lactacystin)脑黑质致密部注射建立PD大鼠模型,于第7、14、21、28天进行阿扑吗啡(APO)检测,根据大鼠行为学异常程度,应用分层随机法将模型复制的大鼠随机分为模型对照组、吐温80组、独活香豆素组、独活颗粒剂组、独活复方颗粒剂组、塞来昔布组、美多芭组七组。另设假手术组和正常对照组,假手术组脑黑质致密部注射等量生理盐水。正常对照组、假手术组、模型对照组用生理盐水灌胃,其他组大鼠同时间予以等体积相应药物灌胃,共10周。给药后第14、28、42、56、70天分别进行APO检测,观察记录其旋转行为异常、旋转方向、旋转圈数。在进行最后一次APO检测后的次日,过量麻醉处死大鼠,断头,取左侧脑黑质,采用RT-PCR、Western-blot法,对大鼠脑黑质CHOP、Caspase12 mRNA及蛋白表达水平进行检测。结果:应用Lactacystin诱导的PD模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12的表达明显上调;予以药物干预后,独活香豆素、独活颗粒剂、独活复方颗粒剂、美多芭、塞来昔布组大鼠脑黑质CHOP和Caspase12的表达均有下降,以独活香豆素和或独活颗粒剂组最为显著。结论:独活和独活香豆素可能是通过抑制内质网应激对PD起到保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 内质网应激 独活香豆素 CHOP caspase12
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糖脂清对糖尿病大鼠海马内质网应激相关因子GRP78、CHOP、Caspase-12表达的影响 被引量:20
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作者 王旭 邵鑫 +3 位作者 许海燕 叶丽芳 徐奚如 杨晓青 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期73-77,共5页
目的通过观察糖脂清对糖尿病大鼠海马组织的内质网应激相关因子GPR78、CHOP、Caspase-12的影响,探讨其在改善糖尿病大鼠认知功能的作用机制。方法采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,并给予糖脂清高、... 目的通过观察糖脂清对糖尿病大鼠海马组织的内质网应激相关因子GPR78、CHOP、Caspase-12的影响,探讨其在改善糖尿病大鼠认知功能的作用机制。方法采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,并给予糖脂清高、中、低剂量组干预8周后,采用ELISA法检测血清空腹葡萄糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),计算稳态模型的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI);qPCR和Western blot法检测海马组织内质网应激相关因子GPR78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达水平。结果糖脂清各剂量组均能够显著降低FPG及HOMA-IR(P<0.01),除低剂量组外,糖脂清均可显著提高ISI(P<0.01),3组FINS水平无显著性差异(P>0.05)。与模型组比较,糖脂清低、中、高3个剂量组GRP78mRNA和蛋白相对表达均显著增加,CHOP、Caspase-12mRNA表达均减少(P<0.01),中、高剂量组CHOP、Caspase-12蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论糖脂清能够控制血糖,改善胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性,同时能够调节海马内质网应激相关因子GRP78、CHOP、Caspase-12mRNA和蛋白的表达。 展开更多
关键词 糖脂清 2型糖尿病 内质网应激 GRP78 CHOP caspase12
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高同型半胱氨酸血症经内质网途径影响ApoE-/-鼠肝细胞凋亡 被引量:5
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作者 王磊 田珏 +5 位作者 曹成建 杨程 蔡欣 周龙霞 杨晓玲 姜怡邓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期261-265,共5页
目的观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)对ApoE-/-鼠肝细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法 36只ApoE-/-小鼠随机分为3组,每组12只:①ApoE-/-对照组(ApoE-/-group):普通饮食饲养;②蛋氨酸饮食组(methionine diet group):普通饮食+1.7%蛋氨... 目的观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)对ApoE-/-鼠肝细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法 36只ApoE-/-小鼠随机分为3组,每组12只:①ApoE-/-对照组(ApoE-/-group):普通饮食饲养;②蛋氨酸饮食组(methionine diet group):普通饮食+1.7%蛋氨酸饲养;③干预组(treatment group):普通饮食+1.7%蛋氨酸+0.006%叶酸及0.0004%VitB12饲养。另取12只正常C57 BL/6J小鼠给予普通饮食,作为正常对照组(normal control group)。饲养20周后,ELISA测定血清同型半胱氨酸(Hcy)浓度和肝组织Caspase-12含量;全自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;DAPI染色法观察肝组织细胞核形态;电镜观察肝脏组织细胞超微结构。结果与正常对照组和ApoE-/-对照组相比,蛋氨酸饮食组Hcy浓度分别增高2.4倍(P<0.01)和2.5倍(P<0.01);ALT活性分别增高2.0倍(P<0.05)和1.2倍(P<0.05);各组AST活性无明显差异;肝组织切片DAPI染色及电镜结果显示,蛋氨酸饮食组小鼠肝细胞出现凋亡的形态学改变,蛋氨酸饮食组小鼠肝细胞线粒体肿胀、浓缩,内质网大量增生,可见细胞凋亡前体及凋亡小体;Caspase-12活性检测显示蛋氨酸饮食组较正常对照组增高(P<0.05)。与蛋氨酸饮食组比较,干预组小鼠血清Hcy浓度降低,Caspase-12活性下降,肝细胞病理变化减轻,血清ALT活性明显降低。结论 HHcy可能通过影响ApoE-/-鼠内质网功能改变,引起肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 ApoEI- -鼠 高同型半胱氨酸血症 内质网 肝细胞 凋亡 Caspase一12
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