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负压渗透处理对花粉管加载荧光染料的影响
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作者 李坤 王永章 屈海泳 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2138-2147,共10页
该研究采用负压渗透技术,以正常培养2h的丰水梨花粉为实验材料,探索负压渗透条件下,花粉管中加载Ca^(2+)荧光探针(Fluo-4/AM)的方法。结果显示:(1)将花粉及花粉管进行负压处理2h,花粉萌发率及花粉管的活性没有受到影响。(2)对培养2h后... 该研究采用负压渗透技术,以正常培养2h的丰水梨花粉为实验材料,探索负压渗透条件下,花粉管中加载Ca^(2+)荧光探针(Fluo-4/AM)的方法。结果显示:(1)将花粉及花粉管进行负压处理2h,花粉萌发率及花粉管的活性没有受到影响。(2)对培养2h后的花粉管进行不同条件下的负压渗透处理,辅助荧光探针Fluo-4/AM进入花粉管;激光共聚焦显微镜观察发现,在低温(4℃)条件下,负压(-80kPa)渗透加载荧光探针30min,花粉管尖端可以观察到明显的Ca^(2+)梯度。(3)抑制花粉管外Ca^(2+)内流或降低花粉管外Ca^(2+)浓度,花粉管中荧光密度也显著降低。研究认为,负压渗透辅助加载的方法可以有效促进荧光探针进入花粉管细胞内与Ca^(2+)结合。 展开更多
关键词 Ca^2+荧光探针 Ca^2+梯度 花粉管 激光共聚焦 负压渗透
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