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Al/Ca(IO_(3))_(2 )/PVDF基高能杀菌“三明治”结构薄膜的构建及其燃烧性能机理 被引量:1
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作者 陈苏杭 唐魁 +5 位作者 谢晓 唐振华 柯香 秦钊 徐抗震 赵凤起 《火炸药学报》 北大核心 2025年第1期78-87,I0006,共11页
为了提高杀菌高能薄膜的燃烧性能和碘含量,使用Al/Ca(IO_(3))_(2)/30%PVDF膜(30PVDF)封装39%Al/Ca(IO_(3))/(5%或10%)PVDF铝热剂(5PVDF或10PVDF)得到“三明治”结构的3、5、7和9层薄膜,并通过燃速和火焰温度测试以及DSC-TG热分析研究了... 为了提高杀菌高能薄膜的燃烧性能和碘含量,使用Al/Ca(IO_(3))_(2)/30%PVDF膜(30PVDF)封装39%Al/Ca(IO_(3))/(5%或10%)PVDF铝热剂(5PVDF或10PVDF)得到“三明治”结构的3、5、7和9层薄膜,并通过燃速和火焰温度测试以及DSC-TG热分析研究了铝热剂层活性及其分布结构(层数和厚度)对“三明治”结构薄膜燃烧性能和释能效应的影响规律,同时探究了薄膜各组分间的反应温度和反应机理。结果表明,封装39%5PVDF铝热剂“三明治”结构薄膜比封装10PVDF的燃速高18%~35%,表现出更好的燃烧性能,其中5层薄膜具有最大燃速,二者分别为10.2 cm/s和8.6 cm/s,综合了30PVDF膜层的厚度、低燃速和膜-铝热剂层在界面的传质传热效率的影响;并且多层薄膜的平均火焰温度随着铝热剂厚度的减小而增加。DSC-TG结果表明,Al/Ca(IO_(3))_(2)/PVDF基多层薄膜主要在330~410℃发生Al-Ca(IO_(3))_(2)-PVDF释碘放热反应,Ca(IO_(3))_(2)/PVDF(质量为1.55∶1)在320~350℃的剧烈放热反应和燃烧产物中的AlF 3、CaF 2、CaO等进一步证实了该反应的发生。 展开更多
关键词 物理化学 杀菌多层薄膜 静电喷雾沉积 燃烧性能调控 Al/ca(IO_(3))_(2)/PVDF “三明治”结构 铝热剂
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Ca^(2+)及钙结合蛋白与植物耐盐性关系的研究进展 被引量:1
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作者 李程 杜春艳 +5 位作者 崔现芬 李延璨 李景娟 宋杰 崔冰 高建伟 《山东农业科学》 北大核心 2025年第4期163-170,共8页
土壤盐渍化会严重影响作物产量。Ca^(2+)是植物细胞的第二信使,在应对盐胁迫中发挥关键作用。植物的钙结合蛋白通过结合Ca^(2+)来响应外界信号。钙结合蛋白属于一个庞大的基因超家族,包含四个亚家族,分别是钙依赖蛋白激酶(CDPKs)及其相... 土壤盐渍化会严重影响作物产量。Ca^(2+)是植物细胞的第二信使,在应对盐胁迫中发挥关键作用。植物的钙结合蛋白通过结合Ca^(2+)来响应外界信号。钙结合蛋白属于一个庞大的基因超家族,包含四个亚家族,分别是钙依赖蛋白激酶(CDPKs)及其相关蛋白激酶(CRKs)、钙调蛋白(CaM)、类钙调蛋白(CMLs)和类钙调磷酸酶B蛋白(CBL)及CBL相互作用蛋白激酶(CIPK)。植物在应对盐胁迫时,钙结合蛋白扮演重要角色。本文综述了Ca^(2+)及钙结合蛋白在植物耐盐中的研究进展,主要探讨了Ca^(2+)对盐胁迫作物的调节作用,以及钙结合蛋白在作物耐盐机制中的功能,最后对钙结合蛋白的研究及应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 ca^(2+) 钙结合蛋白 盐胁迫 耐盐机制
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冷等离子体/N_(2)O反应模式-ICP-MS/MS测定碘对比剂中Ca的含量
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作者 倪碧玉 陈林 +2 位作者 郑超 黄建华 谢文 《中国无机分析化学》 北大核心 2025年第9期1472-1479,共8页
碘对比剂(ICM)作为CT诊断的必要用剂,在影像学检查中占有非常重要的地位。药用包装容器与ICM相互作用会导致包装材料中的金属离子迁移进入ICM中,对ICM产生潜在的安全性风险。为满足ICM分析测试的需求,确保药品质量和用药安全,提出电感... 碘对比剂(ICM)作为CT诊断的必要用剂,在影像学检查中占有非常重要的地位。药用包装容器与ICM相互作用会导致包装材料中的金属离子迁移进入ICM中,对ICM产生潜在的安全性风险。为满足ICM分析测试的需求,确保药品质量和用药安全,提出电感耦合等离子体串联质谱(ICP-MS/MS)测定碘对比剂中Ca含量的新策略。碘对比剂样品经2%的硝酸稀释后采用ICP-MS/MS直接测定,在冷等离子体条件下,通过低温抑制等离子气Ar的电离,减少Ar^(+)的形成,在MS/MS模式下采用N_(2)O为反应气,基于Ca^(+)与N_(2)O发生O原子转移反应生成CaO^(+),而其他干扰离子与N_(2)O不发生O原子转移反应,利用质量转移法消除质谱干扰,通过分析标准参考物质并进行加标回收评价方法的准确可靠性和精密度。^(40)Ca的检出限(LOD)低至0.13 ng/L,相对标准偏差(RSD)≤3.2%,加标回收率在96.4%~102%。ICP-MS/MS精准定量碘对比剂中挑战性元素Ca的系统方法,可拓展应用于其他领域,具有极大的借鉴价值。 展开更多
关键词 碘对比剂 电感耦合等离子体串联质谱 ca 冷等离子体 N_(2)O反应模式
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氨氯地平通过抑制足细胞的Ca^(2+)内流促进细胞自噬 被引量:1
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作者 赵韦 徐德苹 +3 位作者 廖开楠 蔡春林 臧丹丹 周海胜 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1179-1186,共8页
目的探究降血压药物氨氯地平对足细胞内Ca^(2+)内流及其自噬的影响。方法体外常规培养永生化的人足细胞(HPC),使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及L型Ca^(2+)阻断剂氨氯地平单独或者联合处理HPC细胞,Ca^(2+)成像系统实时检测药物处理后HPC细胞... 目的探究降血压药物氨氯地平对足细胞内Ca^(2+)内流及其自噬的影响。方法体外常规培养永生化的人足细胞(HPC),使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及L型Ca^(2+)阻断剂氨氯地平单独或者联合处理HPC细胞,Ca^(2+)成像系统实时检测药物处理后HPC细胞内Ca^(2+)通量的瞬时变化;Western blot法检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值变化、Beclin-1、P62和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平;流式细胞术检测488 nm处Fluo-4AM的阳性细胞数以分析HPC细胞内Ca^(2+)内流水平;Lyso-Tracker Green活细胞染色分析溶酶体荧光强度;流式细胞术检测HPC细胞凋亡率。结果与对照组比较,AngⅡ组Ca^(2+)瞬时通量和Fluo-4AM阳性细胞数显著增加(P<0.001)、自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.001)和Beclin-1的蛋白表达(P<0.01)均降低、P62的表达升高(P<0.01)、溶酶体荧光强度减弱(P<0.05)、细胞凋亡率升高(P<0.0001)、凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01)、Bax蛋白升高(P<0.001)。与对照组比较,氨氯地平组Fluo-4AM阳性细胞数显著降低(P<0.001)、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.001)和Beclin-1的蛋白表达(P<0.001)均升高、P62蛋白表达降低(P<0.05)、溶酶体荧光强度增强(P<0.01)、细胞凋亡率降低(P<0.01)、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.001)、Bax蛋白降低(P<0.001)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+氨氯地平组Fluo-4AM阳性细胞数显著降低(P<0.001)、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.01)以及Beclin-1的蛋白表达升高(P<0.05)、P62蛋白降低(P<0.01)、溶酶体荧光强度增加(P<0.05)、细胞凋亡率降低(P<0.001)、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.001)、Bax蛋白表达降低(P<0.001)。结论氨氯地平抑制足细胞内Ca^(2+)内流,促进足细胞自噬、抑制凋亡,对于预防高血压肾病发生具有一定的作用。 展开更多
关键词 足细胞 氨氯地平 血管紧张素Ⅱ 自噬 ca^(2+) 细胞凋亡
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提拉法生长Ca(BO_(2))_(2)晶体的包裹体缺陷研究
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作者 黎诗锋 杨金凤 +4 位作者 黄云棋 张博 刘子琦 孙军 潘世烈 《人工晶体学报》 北大核心 2025年第9期1501-1508,共8页
偏硼酸钙(Ca(BO_(2))_(2))晶体的紫外透过截止边短,紫外波段透过率高,且具有较大的双折射率,是一种具有巨大发展潜力和广阔应用前景的深紫外双折射晶体,但目前生长的晶体易产生包裹体缺陷,严重影响其应用。本文采用提拉法生长Ca(BO_(2))... 偏硼酸钙(Ca(BO_(2))_(2))晶体的紫外透过截止边短,紫外波段透过率高,且具有较大的双折射率,是一种具有巨大发展潜力和广阔应用前景的深紫外双折射晶体,但目前生长的晶体易产生包裹体缺陷,严重影响其应用。本文采用提拉法生长Ca(BO_(2))_(2)晶体并制备测试样品,利用偏光显微镜、扫描电子显微镜、拉曼光谱等手段对包裹体的形貌、尺寸、分布和成分进行检测,结合晶体生长的过程,分析了包裹体的形成机制,并提出了其消除策略。研究表明,Ca(BO_(2))_(2)晶体中的包裹体为气相包裹体,来源于熔体中溶解的气体分子,在晶体中以“球形”、“线状”与“蝌蚪状”形貌出现;其形成是由晶体生长速率和气泡扩散速率共同决定,通过对熔体进行过热处理、提高生长界面的温度梯度、降低生长速率、提高晶体生长旋转速度等方式可以完全消除晶体中包裹体缺陷。 展开更多
关键词 ca(BO_(2))_(2)晶体 提拉法 包裹体 生长速率 温度梯度 溶质边界层
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CRISPR/Cas9介导的CD71基因编辑IPI-2I细胞系的建立
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作者 聂雨欣 袁茂莎 +4 位作者 王婉洁 王楠 孙亚茹 刘志国 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4527-4537,共11页
【目的】通过CRISPR/Cas9技术获得分化抗原71(cluster of differentiation 71,CD71)基因编辑的猪回肠上皮(immortalized porcine intestinal-2I,IPI-2I)细胞系,为进一步在细胞水平上研究CD71基因功能及其在猪传染性胃肠炎病毒(Transmiss... 【目的】通过CRISPR/Cas9技术获得分化抗原71(cluster of differentiation 71,CD71)基因编辑的猪回肠上皮(immortalized porcine intestinal-2I,IPI-2I)细胞系,为进一步在细胞水平上研究CD71基因功能及其在猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染中的作用提供材料。【方法】针对CD71基因第3外显子及其相邻内含子区域设计5条sgRNAs,并将其连接至pX458-GFP载体;在猪胎儿成纤维(porcine embryonic fibroblast,PEF)细胞中通过T7E1酶切试验对不同sgRNA载体进行活性检测;选择切割效率较高的2个sgRNAs载体质粒分别电转染至IPI-2I细胞中,48 h后通过流式细胞仪收集带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的单个细胞至96孔细胞培养板中扩大培养,筛选单克隆细胞;通过PCR扩增和TA克隆技术对单克隆细胞进行基因型鉴定,获得CD71基因编辑的IPI-2I细胞系。【结果】质粒测序结果表明,5条sgRNAs均成功连接至pX458-GFP载体;T7E1酶切结果显示,转染的5个sgRNAs质粒组均产生了切割,其中,pX458-sgRNA1和pX458-sgRNA4切割效率较高,分别为35.8%和44.1%。流式细胞术分选结果显示,转染pX458-sgRNA1和pX458-sgRNA4的阳性细胞比例分别为29.8%和25.7%;PCR扩增结果显示,获得的65株单克隆细胞中有14株细胞发生了基因编辑,编辑效率为22%;TA克隆结果显示,14株基因编辑细胞中有5株为单等位基因编辑,9株为双等位基因编辑。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了CD71基因编辑的IPI-2I细胞系,获得了CD71基因单等位基因编辑和双等位基因编辑细胞。试验结果为明确CD71基因功能及其介导TGEV感染的作用机制提供了良好的细胞模型。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9 CD71基因 IPI-2I细胞
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油酸钠体系中Ca^(2+)和Mg^(2+)对黄铁矿浮选行为的影响
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作者 张永志 唐云 +2 位作者 邓政斌 杨勇 杨叶艳 《黄金科学技术》 北大核心 2025年第2期360-368,共9页
为了探究Ca^(2+)和Mg^(2+)对黄铁矿浮选行为的影响,采用单矿物试验、浮选溶液化学计算、接触角、SEM、FTIR和XPS分析等方法,考察了油酸钠体系中Ca^(2+)和Mg^(2+)对黄铁矿浮选的影响规律及机理。单矿物浮选试验结果表明:在油酸钠体系中,C... 为了探究Ca^(2+)和Mg^(2+)对黄铁矿浮选行为的影响,采用单矿物试验、浮选溶液化学计算、接触角、SEM、FTIR和XPS分析等方法,考察了油酸钠体系中Ca^(2+)和Mg^(2+)对黄铁矿浮选的影响规律及机理。单矿物浮选试验结果表明:在油酸钠体系中,Ca^(2+)和Mg^(2+)的存在对黄铁矿的浮选行为产生活化,改善其浮选效果,但是随着pH值的增大,离子对黄铁矿的活化效果不断减弱;pH值较低时,钙和镁主要以Ca^(2+)和Mg^(2+)的形式吸附在黄铁矿表面,增加了黄铁矿表面对溶液中油酸钠的吸附量,且Ca^(2+)和Mg^(2+)会与油酸钠发生化学反应,生成油酸钙和油酸镁吸附在黄铁矿表面,使黄铁矿表面接触角增大从而改变了其表面疏水性;随着pH值的不断增大,黄铁矿表面的Fe-S键会断裂生成Fe(OH)_(3),阻碍离子吸附,且Ca^(2+)和Mg^(2+)的形态随着pH值的增大发生变化,起活化作用的Ca^(2+)和Mg^(2+)浓度不断降低,离子活化效果减弱。研究结果对使用油酸钠反浮选分离卡林型金矿中的黄铁矿和碳酸盐矿物具有一定指导意义。 展开更多
关键词 浮选 黄铁矿 ca^(2+) Mg^(2+) 油酸钠 离子活化 接触角
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基于线粒体cox2基因的细粒棘球绦虫RPA-CRISPR/Cas12a检测方法的建立
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作者 周愉乐 唐文强 +5 位作者 李鑫 石斌 赵霞玲 马艳 炊文婷 黄福强 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第6期606-613,共8页
为建立灵敏、特异的细粒棘球绦虫即时核酸检测方法,本研究结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和CRISPR/Cas12a系统,以细粒棘球绦虫线粒体细胞色素c氧化酶亚基2(cox2)基因为靶标,设计5条RPA正向引物和5条反向引物,并根据确定的原间隔相邻基序... 为建立灵敏、特异的细粒棘球绦虫即时核酸检测方法,本研究结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和CRISPR/Cas12a系统,以细粒棘球绦虫线粒体细胞色素c氧化酶亚基2(cox2)基因为靶标,设计5条RPA正向引物和5条反向引物,并根据确定的原间隔相邻基序(PAM)设计合成7条CRISPR RNA(crRNA:cox2-1/2/3/4/5/6/7),初步建立了细粒棘球绦虫RPA-CRISPR/Cas12a单管检测方法,并通过荧光结果筛选出最佳RPA扩增引物及最佳crRNA。利用建立的方法分别检测细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、带状泡尾绦虫、贝氏莫尼茨绦虫、犬复孔绦虫、犬弓首蛔虫和肝片吸虫共7种寄生虫DNA,评估该方法的特异性,结果显示,该方法仅可特异性检测细粒棘球绦虫DNA,其他寄生虫DNA检测结果均为阴性,且可在20 min内得到检测结果;将重组质粒标准品稀释至1000拷贝/μL、500拷贝/μL、100拷贝/μL、50拷贝/μL、10拷贝/μL、1拷贝/μL,分别作为模板经建立的方法检测,结果显示,该方法对重组质粒标准品的检测限可达50拷贝/μL;以检测限浓度的质粒标准品为模板,采用所建立的方法于不同时间检测,每次做两组平行对照,共做3次,评估该方法的重复性,结果显示,6组试验的荧光值差异较小。表明本研究建立的方法特异性强、敏感性高、重复性好。利用该方法对62份临床犬粪便样品检测,结果显示细粒棘球绦虫的阳性率约为0.16%(1/62),与qPCR的检测结果相符。本研究建立了RPA-CRISPR/Cas12a单管检测方法,并对次优PAM和次优结构的crRNA进行了优化,该方法可在短时间内完成特异、灵敏地检测,有望成为细粒棘球绦虫终末宿主现场筛查的新型替代检测工具。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 核酸扩增检测 重组酶聚合酶扩增技术 CRISPR/cas12a crRNA cox2基因
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基于cGAS-STING信号通路探讨川芎嗪抑制Ca^(2+)浓度保护膝骨关节炎大鼠软骨的作用机制研究
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作者 施蕾 廖太阳 +4 位作者 刘德仁 刘江宇 王培民 吴鹏 茆军 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第16期1201-1210,共10页
目的:探讨川芎嗪能否通过cGAS-STING通路抑制Ca^(2+)浓度,进而保护KOA大鼠软骨的机制研究。方法:采用前交叉韧带离断法复制KOA模型,将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、川芎嗪组(20、40、80 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组8只。... 目的:探讨川芎嗪能否通过cGAS-STING通路抑制Ca^(2+)浓度,进而保护KOA大鼠软骨的机制研究。方法:采用前交叉韧带离断法复制KOA模型,将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、川芎嗪组(20、40、80 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组8只。提取雄性SD大鼠膝关节的软骨细胞,分为对照组,IL-1β组,川芎嗪组(100、200μmol/L)和H^(-1)51组(STING通路抑制剂)。用IL^(-1)β诱导软骨细胞24 h建立KOA模型,川芎嗪和H^(-1)51干预24 h。CCK-8法检测川芎嗪对细胞活力的影响;采用番红-固绿染色法观察软骨组织以及软骨细胞的病理变化;免疫组化法检测组织cGAS、STING蛋白表达;RT-qPCR检测组织cGAS、STING、Calmodulin、Calpain、NF-κB mRNA水平;采用流式细胞术检测细胞Ca^(2+)浓度;Western blot检测细胞和组织cGAS、STING、Calmodulin、Calpain蛋白表达以及细胞p-IRF3蛋白相对表达。结果:CCK-8检测结果显示川芎嗪在浓度为0~400μmol/L范围内对细胞活力无显著影响。与模型组相比,川芎嗪干预后,番红-固绿染色的结果显示各组的软骨组织损伤得到了改善;免疫组化法检测软骨组织的cGAS、STING蛋白阳性区域比例明显降低;cGAS、STING、Calmodulin、Calpain、NF-κB mRNA的相对表达水平也呈下降趋势。此外,体外实验也再次验证,相较于IL^(-1)β组,川芎嗪组的软骨细胞Ca^(2+)浓度降低;cGAS、STING、Calmodulin、Calpain、p-IRF3蛋白的相对表达减少。结论:川芎嗪可以通过cGAS-STING通路从而抑制Ca^(2+)浓度保护KOA大鼠的软骨。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 软骨 cGAS-STING信号通路 ca^(2+)
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大麦PYL、PP2CA和SnRK2家族基因鉴定及盐胁迫下的表达分析
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作者 孙成群 张萌娜 +4 位作者 洪益 张宇航 李璐飞 许如根 朱娟 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第6期735-748,共14页
脱落酸(abscisic acid,ABA)在植物生长、发育、衰老及胁迫响应等方面均发挥重要作用,其核心信号转导通路由PYL-PP2CA-SnRK2组成。为探究大麦PYL、PP2CA和SnRK2蛋白功能特征、表达模式及进化关系,本研究利用生物信息学方法对大麦PYL、PP... 脱落酸(abscisic acid,ABA)在植物生长、发育、衰老及胁迫响应等方面均发挥重要作用,其核心信号转导通路由PYL-PP2CA-SnRK2组成。为探究大麦PYL、PP2CA和SnRK2蛋白功能特征、表达模式及进化关系,本研究利用生物信息学方法对大麦PYL、PP2CA和SnRK2家族成员进行了全基因组鉴定,并分析其成员的基因结构、染色体定位、蛋白理化性质、启动子区顺式作用元件、组织表达以及逆境胁迫下的转录组表达量等。结果在大麦中共鉴定到10个HvPYL、13个HvPP2CA及9个HvSnRK2基因。HvPYLs和HvPP2CAs分布在1H~5H和7H,HvSnRK2s分布在1H~5H;HvPYLs和HvPP2CAs主要定位叶绿体,HvSnRK2s主要定位在细胞质中。三个家族成员的motif均具有高度的保守性,氨基酸数均小于500,启动子上含有大量响应激素元件。三个家族的基因在根、茎、花序和种子中表达量存在显著差异,HvPYL2在根部表达量最高,HvPYL9在种皮表达量最高;HvPP2C-A1~10在花序表达量较高;HvSnRK2.5、HvSnRK2.7、HvSnRK2.8在种皮表达量较高。对一对耐盐性差异显著的近等基因系在盐胁迫下48 h和60 h的转录组数据分析,结果显示,HvPP2C-A2、HvPP2C-A4、HvPP2C-A6、HvPP2C-A9、HvPP2C-A10和HvSnRK2.4受盐胁迫诱导显著上调表达,而HvPYL6和HvPYL7显著下调表达。实时荧光定量PCR验证结果与转录组数据一致。综合来看,PYL,PP2CA和SnRK2家族基因在大麦响应盐胁迫过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 大麦 PYL PP2ca SnRK2 生物信息学 盐胁迫
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钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ质粒的构建和表达及其与Ca_(V)1.2通道结合的鉴定
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作者 王红梅 王祥卉 +4 位作者 张文竹 何蕊 廖天佐 高青华 郝丽英 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第1期1-4,11,共5页
目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙... 目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,促进GST融合蛋白的表达。采用DTT联合超声破碎法,谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B(GS-4B)分离、纯化GST-CaMKⅡ长片段后,经过PreScission蛋白酶处理,切除GST标签,得到CaMKⅡ长片段蛋白。采用15%SDS-PAGE鉴定CaMKⅡ长片段蛋白的分子量和相对纯度;采用Bradford方法测定纯化后蛋白的浓度;采用pull-down结合Western blotting鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合能力。结果测序结果表明,CaMKⅡ长片段构建成功。通过DTT联合超声破碎法,得到了较高纯度和浓度的长片段CaMKⅡ蛋白,并能够与心肌Ca_(V)1.2钙通道末端CT1蛋白结合。结论本研究成功构建了CaMKⅡ长片段钙调蛋白激酶融合蛋白质粒,提取、纯化了能够与Ca_(V)1.2通道蛋白结合并具有生物活性的CaMKⅡ长片段蛋白,为深入研究CaMKⅡ蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 质粒构建 分离 纯化 pull-down
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利用Ca^(2+)流速表征鳗草种子活力的可行性
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作者 郝紫冰 高亚平 +7 位作者 蒋增杰 袁明军 王嘉琪 焦明蕙 李伟伟 王静 隋海东 张义涛 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第6期203-212,共10页
种子活力状态评价是包括鳗草(Zostera marina)在内的人工培育植物苗种的重要环节。本研究在采用不同干燥时间处理(0、1、2、4、8 h)来形成同批次鳗草种子活力差异的基础上,测定萌发率、相对电导率、含水率以及过氧化氢酶(CAT)活性和丙二... 种子活力状态评价是包括鳗草(Zostera marina)在内的人工培育植物苗种的重要环节。本研究在采用不同干燥时间处理(0、1、2、4、8 h)来形成同批次鳗草种子活力差异的基础上,测定萌发率、相对电导率、含水率以及过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量的同时,利用非损伤微测技术(non-invasive micro-test technology,NMT)对种子的Ca^(2+)流速进行了测定,并探究了鳗草种子活力与Ca^(2+)流速之间的关系。结果显示,随着干燥处理时间的增加,含水率、萌发率逐渐降低,相对电导率上升。干燥处理4 h后的种子比未经处理的种子萌发率降低了12%,处理8 h后的萌发率显著降低,比未经处理的种子萌发率降低了68.7%。MDA含量逐渐上升,CAT活性也随着干燥处理时间的增加先上升后下降;Ca^(2+)呈现外流现象,外流速率随着干燥处理时间的增加不断加大,且萌发率与Ca^(2+)外流流速呈显著负相关(y=–0.1922x+94.09,R^(2)=0.8606)。本研究表明,Ca^(2+)流速与鳗草种子活力具有很强的相关性,具有发展成为快速无损伤评估鳗草种子活力方法的潜力。 展开更多
关键词 鳗草种子 干燥处理 种子活力 ca^(2+)流速 非损伤微测技术
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基于FeCo_(2)O_(4)/g-C_(3)N_(4)/CA的光电协同去除小球藻影响因素研究
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作者 张甲 王晓波 +4 位作者 赵文静 陈田田 田立平 李晓晨 姜瑞雪 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期110-118,共9页
有害藻华的频繁爆发会对水生态、水环境和人类健康构成严重威胁,传统的除藻技术存在一定的局限性,而光电协同催化是一种光催化和电氧化高效结合的新型技术,可弥补传统除藻技术的不足。本文以小球藻为模式生物,采用光电协同催化技术进行... 有害藻华的频繁爆发会对水生态、水环境和人类健康构成严重威胁,传统的除藻技术存在一定的局限性,而光电协同催化是一种光催化和电氧化高效结合的新型技术,可弥补传统除藻技术的不足。本文以小球藻为模式生物,采用光电协同催化技术进行藻类去除试验。考察了FeCo_(2)O_(4)不同掺杂比、电流密度、电解质浓度、催化剂投加量和藻生物量对叶绿素a去除率的影响。结果表明:电流密度越高、电解质浓度越大、催化剂投加量越多和藻生物量越低时除藻效果最好。当电流密度为2.0 mA/cm^(2)、电解质浓度为0.10 M和催化剂投加量为0.30 g时,对藻生物量(6.0×10^(6)cells/mL)的去除率达到93.71%。因此,本研究可以为水体富营养化和藻类爆发的管理和控制提供科学依据。 展开更多
关键词 光电协同 小球藻 叶绿素A 钴酸铁/石墨相氮化碳/醋酸纤维素
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黑果枸杞花青素提取物对八眉三元猪心脏Ca^(2+)稳态途径及血液学参数的影响
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作者 王文胜 吴华 +5 位作者 李金铭 陈自鑫 刘嘉逸 许恩榕 陈林 郑润韬 《饲料工业》 北大核心 2025年第8期124-131,共8页
试验旨在探究黑果枸杞花青素提取物(anthocyanin extract of Lycium ruthenicum Murr,AEL)通过调控八眉三元猪血常规、血气参数及Ca^(2+)稳态途径对心脏的保护作用。选择初始体重为(7.82±0.59) kg的八眉三元猪48头,随机分为4组,对... 试验旨在探究黑果枸杞花青素提取物(anthocyanin extract of Lycium ruthenicum Murr,AEL)通过调控八眉三元猪血常规、血气参数及Ca^(2+)稳态途径对心脏的保护作用。选择初始体重为(7.82±0.59) kg的八眉三元猪48头,随机分为4组,对照组(CON组)饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加5(L-AEL组)、10(M-AEL组)、15 g/kg(H-AEL组)的AEL,饲养35 d。试验结束后分析各组血液学参数变化,利用qRT-PCR、Western blot检测Ca^(2+)稳态途径相关因子基因转录和蛋白表达水平。结果显示:(1)与CON组相比,添加AEL能够显著提高血常规参数红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(HCT)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、平均血红蛋白量(MCH),显著降低血小板(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)(P<0.05);显著提高血气参数酸碱度(pH)、血氧分压(PO_(2))、血氧饱和度(SO_(2))、Na^(+)含量,显著降低K^(+)、Ca^(2+)、二氧化碳总量(TCO_(2))、阴离子间隙(AG)(P<0.05);(2)与CON组相比,添加AEL能够显著上调肌浆网钙ATP酶(SERCA)活性,显著降低猪心肌组织Ca^(2+)水平(P<0.05),显著下调钙敏感受体(CASR)、钙调蛋白(CaM)的基因转录和蛋白表达水平,显著上调质膜Ca^(2+)-ATP酶(PMCA)、SERCA的基因转录和蛋白表达水平(P<0.05)。综上所述,AEL通过调节八眉三元猪血常规及血气参数,提高其机体在低氧环境的携氧运输能力,有效改善高海拔低氧环境引起的八眉三元猪心肌组织中Ca^(2+)稳态失衡,发挥心脏保护作用,且添加量为10 g/kg时效果显著。 展开更多
关键词 高海拔 黑果枸杞花青素提取物 低氧保护 血液学参数 ca^(2+)稳态途径
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Ca^(2+)对盐胁迫下萝卜种子萌发和幼苗生长的影响
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作者 郑露燕 徐高峰 史建磊 《安徽农学通报》 2025年第18期42-45,共4页
本研究以优选浙大长萝卜为试验材料,以清水处理为对照(CK),测定CaCl_(2)处理(B0~B4分别为0、5、10、20和40 mmol/L)下的盐胁迫(NaCl)种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数,幼苗胚根长、下胚轴长、鲜重和MDA含量,研究不同浓度CaCl_(2... 本研究以优选浙大长萝卜为试验材料,以清水处理为对照(CK),测定CaCl_(2)处理(B0~B4分别为0、5、10、20和40 mmol/L)下的盐胁迫(NaCl)种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数,幼苗胚根长、下胚轴长、鲜重和MDA含量,研究不同浓度CaCl_(2)处理对盐胁迫下萝卜种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,NaCl处理对萝卜种子萌发及幼苗生长具有明显的抑制作用,CaCl_(2)处理可明显缓解萝卜种子萌发及幼苗生长中的盐胁迫效应,且在一定范围内缓解作用与其浓度成正比。其中,B2处理的萝卜种子发芽势、发芽率和活力指数较B0处理分别提高了28、29个百分点和182.1%,胚根长和下胚轴鲜重较B0处理分别提高了94.5%和19.0%,MDA含量较B0处理降低了20.9%;B1处理的下胚轴长、发芽指数较B0处理分别增加4.8%、60.4%;B3处理的胚根鲜重最高,较B0处理提高了36.0%。综上,5~20 mmol/L CaCl_(2)处理对萝卜种子的活力指数和幼苗的胚根长的盐胁迫缓解效应较明显,对种子发芽势、发芽率和发芽指数也有一定的缓解作用,而对下胚轴长缓解效应不明显。本文为萝卜新品种引进、开发和配套栽培技术研究提供参考。 展开更多
关键词 ca^(2+) 盐胁迫 萝卜 种子萌发 幼苗生长
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Ca^(2+)信号对植物氮利用调控影响的研究进展
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作者 李翠萍 李晓薇 +4 位作者 李昀潼 吴源源 冯小琴 张汉马 秦小健 《贵州农业科学》 2025年第4期35-44,共10页
氮为植物生长发育的重要元素,研究植物如何感知、传递氮信号及Ca^(2+)如何参与氮利用调控,对促进植物生长、提高作物产质量以及实现减肥增效具有重要意义。为提高作物氮利用效率提供新的策略和方法,综述Ca^(2+)如何参与植物硝酸盐信号... 氮为植物生长发育的重要元素,研究植物如何感知、传递氮信号及Ca^(2+)如何参与氮利用调控,对促进植物生长、提高作物产质量以及实现减肥增效具有重要意义。为提高作物氮利用效率提供新的策略和方法,综述Ca^(2+)如何参与植物硝酸盐信号转导、铵态氮摄取及Ca^(2+)信号网络与其他调控通路间的关系和植物氮吸收转运通路、氮代谢途径调控及Ca^(2+)信号与植物激素互作调控氮利用通路等方面的研究现状,并从Ca^(2+)信号与其他信号通路的交互作用、环境因子对Ca^(2+)信号的影响及利用分子技术揭示Ca^(2+)信号的复杂性等方面展望其研究方向。 展开更多
关键词 植物 钙离子 氮利用 信号通路 氮代谢 植物激素
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芪黄健脾滋肾颗粒可改善小鼠系统性红斑狼疮血小板减少:基于Ca^(2+)/CaMKK2/AMPK/mTOR信号通路介导的自噬
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作者 李云飞 庞利君 +2 位作者 束龙武 李明 黄传兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2327-2334,共8页
目的基于Ca^(2+)/CaMMK2/AMPK/mTOR信号通路介导的自噬探讨芪黄健脾滋肾颗粒(QJZG)对小鼠系统性红斑狼疮血小板减少的影响。方法将24只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、QJZG组、醋酸泼尼松(Pred)组、CaMKK2激活剂组,6只/组;另将6只C57B... 目的基于Ca^(2+)/CaMMK2/AMPK/mTOR信号通路介导的自噬探讨芪黄健脾滋肾颗粒(QJZG)对小鼠系统性红斑狼疮血小板减少的影响。方法将24只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、QJZG组、醋酸泼尼松(Pred)组、CaMKK2激活剂组,6只/组;另将6只C57BL/6小鼠设为正常对照(Control)组。Control组、模型组:予10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃;QJZG组:芪黄健脾滋肾颗粒+生理盐水配成0.39 g/mL溶液灌胃,剂量3.9 g/(kg·d);Pred组:予小鼠醋酸泼尼松片加生理盐水配成0.273 mg/mL的溶液灌胃,剂量2.73 mg/(kg·d);激活剂组:予10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,另将小鼠腹腔注射CaMKK2激活剂,5 mg/kg,2次/周。检测血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV);ELISA法检测血清血小板生成素(TPO)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)水平;流式细胞术检测钙离子荧光强度;Real-time PCR法检测血小板CaMKK2、AMPK2α、mTOR、Beclin1、p62 mRNA表达水平;Western blotting检测血小板CaMKK2、p-CaMKK2、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、LC3、Beclin1、P62蛋白表达水平。结果与Control组相比,模型组PLT、PCT、IL-10、mTOR、p62 mRNA、p-mTOR、P62水平降低(P<0.01),PDW、MPV、TPO、IL-6、TNF-α、IFN-γ、CaMKK2、AMPK、Bcl-1 mRNA、p-CaMKK2、p-AMPK及血小板自噬蛋白(LC3Ⅱ蛋白、Beclin1蛋白)在血小板内表达量升高(P<0.01)。与模型组比较,QJZG组及Pred组PLT、IL-10、mTOR、p62 mRNA、p-mTOR、P62水平升高(P<0.01),MPV、TPO、IL-6、TNF-α、IFN-γ、CaMKK2、AMPK、Bcl-1 mRNA、p-CaMKK2、p-AMPK及血小板自噬蛋白(LC3Ⅱ蛋白、Beclin1蛋白)在血小板内表达量降低(P<0.05);CaMKK2激活剂组PLT、PCT、IL-10、mTOR、p62 mRNA、p-mTOR、P62水平降低(P<0.01),PDW、MPV、IL-6、TNF-α、IFN-γ、CaMKK2、AMPK、Bcl-1 mRNA、p-CaMKK2、p-AMPK及血小板自噬蛋白(LC3Ⅱ蛋白、Beclin1蛋白)在血小板内表达量升高(P<0.01)。结论QJZG可通过减轻炎症及影响Ca^(2+)/CaMKK2/AMPK/mTOR信号通路抑制血小板自噬改善系统性红斑狼疮血小板减少。 展开更多
关键词 芪黄健脾滋肾颗粒 系统性红斑狼疮 血小板自噬 ca^(2+)/camKK2/AMPK/mTOR信号通路
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Ca^(2+)处理对胡麻种子萌发影响的转录组分析
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作者 郭秀娟 冯宇 +2 位作者 吴瑞香 王利琴 杨建春 《生物技术通报》 北大核心 2025年第7期139-149,共11页
【目的】探究Ca^(2+)对胡麻种子萌发特性的影响,揭示其调控机制,为胡麻种子萌发提供理论支持,拓展对Ca^(2+)作用机制的理解。【方法】用0.5%的氯化钙溶液对晋亚10号胡麻种子进行浸种处理,晾干后,进行萌发试验。利用生物信息学方法分析其... 【目的】探究Ca^(2+)对胡麻种子萌发特性的影响,揭示其调控机制,为胡麻种子萌发提供理论支持,拓展对Ca^(2+)作用机制的理解。【方法】用0.5%的氯化钙溶液对晋亚10号胡麻种子进行浸种处理,晾干后,进行萌发试验。利用生物信息学方法分析其在5、10和15 h的Ca^(2+)处理前后基因的表达情况。【结果】Ca^(2+)处理的胡麻种子露白率和出芽的时间明显地提前。通过对胡麻种子进行不同时间(5、10、15 h)的Ca^(2+)处理,并结合转录组测序分析其基因表达变化,在Ca^(2+)处理5 h后,与对照组相比,筛选出1357个差异基因,其中上调基因558个,下调基因799个。随着处理时间延长,差异基因数量显著减少。在10 h时,差异基因减少至641个(上调385个,下调256个);至15 h时,仅剩168个差异基因(上调151个,下调17个)。此外,进一步通过基因共表达网络分析,筛选出各组中最相关的模块及核心基因。【结论】在Ca^(2+)处理胡麻种子5 h组(H5)中,显著相关的Meblue模块包含147个基因,主要富集于碳代谢通路、植物激素信号转导通路及光合生物中的碳固定通路。而在15 h组(H15)中,显著相关的Mebrown模块包含141个基因,主要富集于碳代谢通路、类苯基丙烷生物合成通路和亚麻酸代谢通路。此外,本研究重点筛选出35个与植物激素信号转导通路相关的差异表达基因。 展开更多
关键词 转录组 亚麻 种子发育 钙离子 差异基因表达 核心基因 表型变化 植物激素信号通路
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PEG胁迫下小麦幼苗ABA与Ca^(2+)/CaM的关系 被引量:30
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作者 郭秀林 李孟军 +2 位作者 关军锋 崔四平 李广敏 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期537-540,共4页
本文以不同浓度钙离子螯合剂 EGTA、钙通道阻断剂异博啶 (Vp)和 Ca M拮抗剂三氟啦嗪 (TFP)处理小麦幼苗 ,对 PEG胁迫下根和叶片 ABA和 Ca M含量的变化进行了测定。结果表明 :EGTA、Vp和 TFP处理皆能促进根和叶片 ABA含量的提高。PEG胁... 本文以不同浓度钙离子螯合剂 EGTA、钙通道阻断剂异博啶 (Vp)和 Ca M拮抗剂三氟啦嗪 (TFP)处理小麦幼苗 ,对 PEG胁迫下根和叶片 ABA和 Ca M含量的变化进行了测定。结果表明 :EGTA、Vp和 TFP处理皆能促进根和叶片 ABA含量的提高。PEG胁迫下不同浓度 EGTA和 Vp处理后 Ca M含量也不同程度地提高 ,TFP处理可减弱PEG对 Ca M含量升高的促进作用。从 ABA和 Ca M最大峰值出现的时间上看 ,Ca M都滞后于 ABA。上述结果暗示 :Ca2 + / Ca M可能参与干旱信号 ABA的信息传递过程 ,而 ABA合成过程与胞质 Ca2 + 浓度有关。 展开更多
关键词 PEG胁迫 小麦幼苗 ABA ca^2+/cam 抗旱 抗逆性
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Ca^(2+)CaM对玉米干旱信息传递的介导作用研究 被引量:15
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作者 郭秀林 刘子会 +3 位作者 李运朝 马春红 崔四平 李广敏 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1001-1006,共6页
以钙离子(Ca2+)螯合剂EGTA、钙通道阻断剂异博啶(Vp)和CaM拮抗剂(TFP)处理玉米幼苗,对干旱胁迫下根、茎、叶及其木质部汁液ABA含量和pH变化及气孔导度、蒸腾速率进行了测定。结果表明,2mmolLEGTA和100μmolLVp分别处理至植株出现萎蔫,... 以钙离子(Ca2+)螯合剂EGTA、钙通道阻断剂异博啶(Vp)和CaM拮抗剂(TFP)处理玉米幼苗,对干旱胁迫下根、茎、叶及其木质部汁液ABA含量和pH变化及气孔导度、蒸腾速率进行了测定。结果表明,2mmolLEGTA和100μmolLVp分别处理至植株出现萎蔫,均使玉米根、茎和叶的ABA总量降低,但木质部ABA含量增加、pH升高,同时,气孔导度和蒸腾速率降低;80μmolLTFP处理至出现干旱胁迫时,使根、茎、叶及其木质部汁液ABA含量和pH值升高,气孔导度和蒸腾速率随之降低。初步说明Ca2+参与了水分胁迫下玉米幼苗ABA的信息转导过程,而CaM没有介导。 展开更多
关键词 干旱胁迫 玉米 ca^2+/cam ABA pH
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