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反义CYP86MF基因植物表达载体的构建及其对白菜的转化
被引量：
10
1
作者
余小林
曹家树
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期179-184,共6页
在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到Ca...
在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到CaMV35S组成型启动子的表达载体pBI35S-AMF,随后利用"三亲杂交"法将pBI35S-AMF质粒转入农杆菌LBA4404和EHA105两个菌株中.PCR扩增和酶切鉴定结果表明,所构建的反义CYP86MF基因植物表达载体pBI35S-AMF是正确的,并已成功导入了根癌农杆菌中.随后,按照已建立的遗传转化体系对'上海青'白菜进行了转化,并获得130了多株转化再生植株.
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关键词
cy86mf基因
植物表达载体
白菜
遗传转化
反义RNA技术
根癌农杆菌
核雄性不育
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题名
反义CYP86MF基因植物表达载体的构建及其对白菜的转化
被引量：
10
1
作者
余小林
曹家树
机构
浙江大学蔬菜研究所
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期179-184,共6页
基金
国家自然基金资助项目(39870509)
浙江省重大科技项目资助(021102536).
文摘
在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到CaMV35S组成型启动子的表达载体pBI35S-AMF,随后利用"三亲杂交"法将pBI35S-AMF质粒转入农杆菌LBA4404和EHA105两个菌株中.PCR扩增和酶切鉴定结果表明,所构建的反义CYP86MF基因植物表达载体pBI35S-AMF是正确的,并已成功导入了根癌农杆菌中.随后,按照已建立的遗传转化体系对'上海青'白菜进行了转化,并获得130了多株转化再生植株.
关键词
cy86mf基因
植物表达载体
白菜
遗传转化
反义RNA技术
根癌农杆菌
核雄性不育
Keywords
cy
P
86
mf
expression vector
the antisense RNA technology
genetic transformation
分类号
S634.303.6 [农业科学—蔬菜学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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被引量
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1
反义CYP86MF基因植物表达载体的构建及其对白菜的转化
余小林
曹家树
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
10
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