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融合蛋白CXCL10-loop3-EGF的可溶性表达及其抗肿瘤效应研究
1
作者
沈波
傅鹰
+3 位作者
孟哲峰
徐巍
何小帆
朱敏
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期2376-2380,共5页
目的:构建重组趋化因子CXCL10及表皮生长因子受体干扰序列融合蛋白(CXCL10-loop3-EGF),验证其靶向性抗肿瘤效应及抑制血管形成活性。方法:运用RT-PCR从经IFN-γ刺激活化的PBMC中扩增人CXCL10基因,运用重叠延伸PCR法扩增CXCL10-loop3-EG...
目的:构建重组趋化因子CXCL10及表皮生长因子受体干扰序列融合蛋白(CXCL10-loop3-EGF),验证其靶向性抗肿瘤效应及抑制血管形成活性。方法:运用RT-PCR从经IFN-γ刺激活化的PBMC中扩增人CXCL10基因,运用重叠延伸PCR法扩增CXCL10-loop3-EGF融合基因,并将其与载体pTG19-T连接、转化大肠杆菌DH5α、筛选阳性克隆,CXCL10-loop3-EGF融合基因与载体pET32a(+)连接、转化大肠杆菌Origami B(DE3),诱导可溶性表达重组his-CXCL10-loop3-EGF融合蛋白,并经镍柱亲和层析、酶切、超滤及透析等方法获得纯化的重组CXCL10-loop3-EGF融合蛋白。通过Transwell细胞趋化实验及HUVEC血管形成抑制实验验证此融合蛋白的抗肿瘤效应。结果:SDS-PAGE和Western blotting证实CXCL10-loop3-EGF融合蛋白构建成功,纯化后的融合蛋白具有显著的趋化活化PBMC活性及抑制HUVEC血管形成活性。结论:成功构建融合蛋白CXCL10-loop3-EGF,该蛋白具有较好的靶向性抗肿瘤活性。
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关键词
cxcl10-loop3-egf融合蛋白
可溶性表达
抗肿瘤效应
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职称材料
题名
融合蛋白CXCL10-loop3-EGF的可溶性表达及其抗肿瘤效应研究
1
作者
沈波
傅鹰
孟哲峰
徐巍
何小帆
朱敏
机构
浙江省台州医院检验科
复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期2376-2380,共5页
基金
浙江省医药卫生科技计划基金资助项目(No.2005A108)
文摘
目的:构建重组趋化因子CXCL10及表皮生长因子受体干扰序列融合蛋白(CXCL10-loop3-EGF),验证其靶向性抗肿瘤效应及抑制血管形成活性。方法:运用RT-PCR从经IFN-γ刺激活化的PBMC中扩增人CXCL10基因,运用重叠延伸PCR法扩增CXCL10-loop3-EGF融合基因,并将其与载体pTG19-T连接、转化大肠杆菌DH5α、筛选阳性克隆,CXCL10-loop3-EGF融合基因与载体pET32a(+)连接、转化大肠杆菌Origami B(DE3),诱导可溶性表达重组his-CXCL10-loop3-EGF融合蛋白,并经镍柱亲和层析、酶切、超滤及透析等方法获得纯化的重组CXCL10-loop3-EGF融合蛋白。通过Transwell细胞趋化实验及HUVEC血管形成抑制实验验证此融合蛋白的抗肿瘤效应。结果:SDS-PAGE和Western blotting证实CXCL10-loop3-EGF融合蛋白构建成功,纯化后的融合蛋白具有显著的趋化活化PBMC活性及抑制HUVEC血管形成活性。结论:成功构建融合蛋白CXCL10-loop3-EGF,该蛋白具有较好的靶向性抗肿瘤活性。
关键词
cxcl10-loop3-egf融合蛋白
可溶性表达
抗肿瘤效应
Keywords
cxcl
10
-loop
3
-egf
fusion protein
Soluble expression
Antitumor effect
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
融合蛋白CXCL10-loop3-EGF的可溶性表达及其抗肿瘤效应研究
沈波
傅鹰
孟哲峰
徐巍
何小帆
朱敏
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
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