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黄芩水煎剂逆转bla_(CTX-M)阳性大肠杆菌对头孢噻呋耐药性的机制分析
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作者 陈秋如 许慧 +6 位作者 郝振鑫 张浩则 张超君 邢少川 马小元 胡功政 苑丽 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第11期102-111,共10页
为探究黄芩水煎剂能否增强头孢噻呋对产超广谱β-内酰胺酶基因bla_(CTX-M)阳性大肠杆菌的抗菌活性,本试验首先分别制备携带bla_(CTX-M)-55和bla_(CTX-M)-14的重组菌(C600-1和C600-9),绘制时间-杀菌曲线评价1最小抑菌浓度(MIC)头孢噻呋和... 为探究黄芩水煎剂能否增强头孢噻呋对产超广谱β-内酰胺酶基因bla_(CTX-M)阳性大肠杆菌的抗菌活性,本试验首先分别制备携带bla_(CTX-M)-55和bla_(CTX-M)-14的重组菌(C600-1和C600-9),绘制时间-杀菌曲线评价1最小抑菌浓度(MIC)头孢噻呋和1 MIC黄芩水煎剂联用对bla_(CTX-M)阳性重组菌的体外抑杀活性;使用不加黄芩水煎剂(阴性对照)、加1/4 MIC、1/2 MIC剂量的黄芩水煎剂继代培养重组菌7 d,通过测定头孢噻呋对重组菌的MIC和重组菌的bla_(CTX-M)表达,分析黄芩水煎剂对重组菌的头孢噻呋耐药发展的干预作用;使用不加黄芩水煎剂(阴性对照)、加1/4 MIC、1/2 MIC、1 MIC剂量的黄芩水煎剂培养C600、C600-1和C600-9菌株2 h,通过荧光染色法和逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定细胞内、外膜通透性和外排泵活性,探索黄芩水煎剂逆转耐药性的机制。结果显示,与头孢噻呋单药相比,黄芩水煎剂与其联用后对大肠杆菌C600和重组菌C600-1、C600-9具有明显的协同抑杀活性;不同剂量黄芩水煎剂与bla_(CTX-M)阳性重组菌共培养7 d后,头孢噻呋对重组菌的MIC下降8~16倍,重组菌中bla_(CTX-M)的mRNA相对表达量均极其显著下降(P<0.001);不同剂量黄芩水煎剂与bla_(CTX-M)阳性重组菌共培养2 h后,大肠杆菌C600和重组菌C600-1、C600-9的内、外膜通透性均极显著增加(P<0.01或P<0.001),外排泵活性均极其显著下降(P<0.001),其中在1/2 MIC和1 MIC黄芩水煎剂的共培养下,主要膜孔蛋白相关基因ompF、ompC和ompR的mRNA相对表达量均极其显著升高(P<0.001),主要外排泵相关基因arcA、acrB和tolC的mRNA相对表达量均极其显著降低(P<0.001)。结果表明,黄芩水煎剂与bla_(CTX-M)阳性重组菌共培养后,不仅能抑制重组菌的bla_(CTX-M)表达,还能明显增加细胞膜通透性并降低外排泵活性。本试验结果为我国临床从中药中挖掘超广谱β-内酰胺酶抑制剂提供了新思路。 展开更多
关键词 黄芩水煎剂 头孢噻呋 bla_(ctx-m)-55 bla_(ctx-m)-14 大肠杆菌
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广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs的调查 被引量:5
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作者 黎晓强 卓超 +10 位作者 苏丹虹 李红玉 王露霞 廖康 王媚 植志全 郭仲辉 魏衍超 耿穗娜 金光耀 钟南山 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期383-387,共5页
目的对广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs进行调查,了解其种类、比例以及传播机制,为临床抗生素的使用提供指导。方法对广州地区多家医院2007年到2008年临床分离的非重复的确证产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌... 目的对广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs进行调查,了解其种类、比例以及传播机制,为临床抗生素的使用提供指导。方法对广州地区多家医院2007年到2008年临床分离的非重复的确证产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌进行研究,PCR方法确定CTX-M型ESBLs的基因型,MIC检测菌株对抗菌药物的敏感性;接合实验了解CTX-M型的ESBLs编码基因(blaCTX-M)所在质粒的大小。结果检出携带blaCTX-M-15的菌株共86株(23.8%),其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为39株(21.5%)和47株(26.1%);大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中各检出1株携带blaCTX-M-27的菌株,比率均为0.55%,未发现携带blaCTX-M-16的菌株。接合实验发现,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带blaCTX-M-15的质粒分别是65Kb和92Kb大小的可接合性质粒;肺炎克雷伯菌中携带blaCTX-M-27的质粒推测是大小为57Kb的可结合性质粒。结论广州地区具有水解头孢他啶活性的CTX-M型ESBLs的类型为CTX-M-15和CTX-M-27,且以CTX-M-15为主。耐药基因所在的质粒为可接合性质粒,能通过接合水平传播。鉴于CTX-M-15型ESBLs在临床菌株中检出率较高,治疗上应避免单独使用头孢他啶。 展开更多
关键词 头孢他啶 ctx-m-15 ctx-m-27 接合性质粒
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革兰阴性杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶调查研究(首次发现产blaCTX-M-14的斯氏普罗威登斯菌) 被引量:5
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作者 陈腊梅 张运丽 +3 位作者 刘文恩 李虹玲 廖经忠 郭思建 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第4期242-245,232,共5页
目的调查某院临床分离的革兰阴性(G-)杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株的流行情况,并确定其基因型。方法收集2004年10月—2005年7月临床标本分离的多重耐药G-杆菌233株,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的方法进行ESBLs... 目的调查某院临床分离的革兰阴性(G-)杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株的流行情况,并确定其基因型。方法收集2004年10月—2005年7月临床标本分离的多重耐药G-杆菌233株,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的方法进行ESBLs表型确证试验,聚合酶链反应(PCR)法对表型阳性株进一步进行CTX-M酶基因型的扩增,对PCR产物测序并确定其基因型。结果从大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌和斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M型ESBLs,首次从斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M-14型ESBLs。结论该地区多种G-肠杆菌科细菌携带CTX-M型ESBLs,斯氏普罗威登斯菌也能产生CTX-M型ESBLs。 展开更多
关键词 革兰阴性杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m 聚合酶链反应 斯氏普罗威登斯菌ctx-m-14
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沙门氏菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因分型及变异研究 被引量:4
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作者 余菊 徐红红 +5 位作者 申永秀 王艳 张小荣 曹永忠 吴艳涛 巢国祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期594-598,共5页
目的通过对不同血清型中沙门氏菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶分子基因型别、脉冲场凝胶电泳(PFGE)溯源分析及CTX-M氨基酸位点变异情况,研究CTX-M各型别流行特征及在超级耐药克隆中的作用。方法对来源于江苏及周围地区的61株CTX-M阳性的... 目的通过对不同血清型中沙门氏菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶分子基因型别、脉冲场凝胶电泳(PFGE)溯源分析及CTX-M氨基酸位点变异情况,研究CTX-M各型别流行特征及在超级耐药克隆中的作用。方法对来源于江苏及周围地区的61株CTX-M阳性的肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)、印第安纳沙门氏菌(S.indiana)、汤卜逊沙门氏菌(S.thompson)等进行CTX-M型别鉴定、PFGE分子分型、全基因测序对不同型别CTX-M氨基酸位点变异分析。结果61株菌株分为3个CTX-M群6个型。S.indiana含有6种CTX-M基因型,主要型别是CTX-M-65和CTX-M-55;S.enteritidis和S.thompson主要型分别为CTX-M-55、CTX-M-65。PFGE聚类分型有19个型。A2型是携带CTX-M-55型S.enteritidis;B4、B8、B9型是携带CTX-M-55型或CTX-M-65型的S.indiana;D2为携带CTX-M-65型的S.thompson。CTX基因组序列分析显示,在CTX-M-1群、CTX-M-9群、CTX-M-64群易变化氨基酸位点分别是4、3、12个。结论本地区主要CTX型别为CTX-M-55型或CTX-M-65型,S.indiana是CTX基因主要来源。位于质粒上的CTX-M基因复杂且多变是S.indiana超级耐药克隆形成并广泛流行重要原因之一。 展开更多
关键词 沙门氏菌 PFGE分型 ctx-m基因型 ctx-m氨基酸序列变异
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不同CTX-M亚群鸡大肠杆菌毒力基因的流行特征 被引量:6
5
作者 钟杏好 李进福 +2 位作者 段沙沙 胡功政 苑丽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期152-155,共4页
目的了解CTX-M-1亚群、CTX-M-9亚群与不产CTX-M3类鸡源大肠杆菌毒力基因的流行特征。方法从河南省不同地区分离获得CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌33株,CTX-M-9亚群鸡大肠杆菌31株和不产CTX-M的鸡大肠杆菌23株,以多重PCR技术检测受试菌携带33种... 目的了解CTX-M-1亚群、CTX-M-9亚群与不产CTX-M3类鸡源大肠杆菌毒力基因的流行特征。方法从河南省不同地区分离获得CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌33株,CTX-M-9亚群鸡大肠杆菌31株和不产CTX-M的鸡大肠杆菌23株,以多重PCR技术检测受试菌携带33种毒力基因的情况。结果 3类受试菌毒力基因的携带种类趋于一致,其中feoB、fimH、traT和sitA在3类菌中检出率均较高。CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌中traT和irp-2基因和CTX-M-9亚群鸡大肠杆菌中iroN、iss和irp-2基因的携带著高于不产CTX-M菌株。CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌中cvaC和sfaS的携带率高于CTX-M-9亚群,而iroN和iss的携带率低于CTX-M-9亚群。结论结果表明CTX-M-1与CTX-M-9亚群大肠杆菌部分毒力基因的携带率明显高于不产CTX-M的菌株,CTX-M-9和CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌携带的部分毒力基因差异明显,推测产CTX-M鸡大肠杆菌的致病力可能较强,且菌株的致病力可能还与其携带的CTX-M基因亚型有关。 展开更多
关键词 鸡源大肠杆菌 ctx-m-1亚群 ctx-m-9亚群 毒力基因
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产ESBLs大肠埃希菌CTX-M型耐药基因分析 被引量:15
6
作者 赵晓丽 胡大春 +3 位作者 邵剑春 周玲 蒋杰 刘德华 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第1期15-19,60,共6页
目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在大肠埃希菌中的检出率,并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验;采用聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M酶基因型,对PCR... 目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在大肠埃希菌中的检出率,并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验;采用聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M酶基因型,对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株(52.79%)ESBLs表型检测阳性,其中91株符合供体菌标准,64株(70.33%)接合成功,接合子均确证产ESBLs。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株(94.23%)携带CTX-M型基因,其中38株(36.54%)检出blaCTX-M-1组基因,69株(66.35%)检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株(79.69%)携带CTX-M型基因,其中18株(28.13%)检出blaCTX-M-1组基因,35株(54.69%)检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型,以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重,产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主,同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 ctx-m型基因 超广谱Β-内酰胺酶 耐药基因 抗药性 微生物 聚合酶链反应
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住院患者产CTX-M型ESBLs和KPC的大肠埃希菌感染分布与耐药基因分析 被引量:10
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作者 蒋伟 王思淼 +1 位作者 金鑫 李佳佳 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期760-763,共4页
目的了解住院患者产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和碳青霉烯酶(KPC)大肠埃希菌感染的临床分布与耐药情况。方法收集某院2011—2012年临床送检标本分离的多重耐药大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);聚合... 目的了解住院患者产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和碳青霉烯酶(KPC)大肠埃希菌感染的临床分布与耐药情况。方法收集某院2011—2012年临床送检标本分离的多重耐药大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs和KPC基因,确定CTX-M和KPC基因型别及MLST分型。结果 48株多重耐药大肠埃希菌中单产ESBLs 45株(93.75%),携带blaCTX-M基因者44株(91.67%),其中blaCTX-M-1组基因20株(41.67%)、blaCTX-M-9组基因32株(66.67%),同时携带两组基因者8株(16.67%)。经基因测序确定的基因亚型有CTX-M-14(65.91%,29/44)、CTX-M-55(31.82%,14/44)、CTX-M-15(11.36%,5/44)、CTX-M-3(2.27%,1/44)、CTX-M-24(2.27%,1/44)和CTX-M-65(2.27%,1/44),其中CTX-M-14+CTX-M-55(11.36%,5/44)、CTX-M-14+CTX-M-15(4.55%,2/44)和CTX-M-55+CTX-M-65(2.27%,1/44)。产ESBLs+KPC菌株中2株(4.17%)经PCR扩增均携带blaKPC和blaCTX-M基因,经测序分析1株为CTX-M-14+KPC-2,1株为CTX-M-3+KPC-2。ST131(53.66%)是主要的MLST型别,检测到ST648、ST405、ST167、ST1193等ST型。结论该院大肠埃希菌产ESBLs基因型中CTX-M-14、CTX-M-55和CTX-M-15亚型最常见,存在多种不同亚型;ST131是主要的MLST型别,检测到产KPC-2型碳青霉烯酶菌。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 超广谱Β-内酰胺酶 KPC酶 ctx-m 多位点序列分析
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bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌中mcr-1的分子流行病学分析 被引量:1
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作者 李文娅 贾雅婷 +4 位作者 李垠树 丁海峰 孙华润 胡功政 苑丽 《江西农业学报》 CAS 2021年第7期99-103,共5页
检测了不同时期从河南省分离的162株bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药性,进行了耐药基因bla_(CTX-M)和mcr-1的质粒接合试验,并比较了各亚型的水平传播规律。结果表明:随着时间的推移,bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药率由0... 检测了不同时期从河南省分离的162株bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药性,进行了耐药基因bla_(CTX-M)和mcr-1的质粒接合试验,并比较了各亚型的水平传播规律。结果表明:随着时间的推移,bla_(CTX-M)型鸡大肠杆菌对黏菌素的耐药率由0%显著增加到42.2%;在头孢噻肟单药筛选下获得的21株接合子有5株同时携带mcr-1,在黏菌素单药筛选下获得的18株接合子有11株同时携带bla_(CTX-M),且bla_(CTX-M)和mcr-1基因的接合频率无明显差异;原菌及对应接合子的bla_(CTX-M)亚型均属于bla_(CTX-M-1)和bla_(CTX-M-9)亚群,部分原菌同时携带两种亚型,但接合子均仅携带一种亚型(bla_(CTX-M-9)亚群)。说明在单一药物(黏菌素或头孢噻肟)的选择性压力下,bla_(CTX-M)和mcr-1基因均易水平传播,且携带bla_(CTX-M)和mcr-1的质粒既可单独转移也可同时转移。 展开更多
关键词 mcr-1 bla_(ctx-m-1) bla_(ctx-m-9) 质粒接合 大肠杆菌 耐药性
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安徽省产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌耐药性和基因型研究 被引量:6
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作者 高伟 孙震 +4 位作者 殷俊 王谦 程君 叶英 李家斌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期48-51,共4页
目的了解安徽地区产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBIs)的肺炎克雷伯菌检出率,确定其基因型,并对其流行病学特征进行研究。方法纸片法进行表型鉴定;PCR检测产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶菌株;分析基因型;琼脂稀释法进行药物敏感试验。结果5... 目的了解安徽地区产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBIs)的肺炎克雷伯菌检出率,确定其基因型,并对其流行病学特征进行研究。方法纸片法进行表型鉴定;PCR检测产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶菌株;分析基因型;琼脂稀释法进行药物敏感试验。结果52株肺炎克雷伯菌经通用引物PCR检测证实产CTX-M酶,占所有分离菌株的23.4%(52/222),占产ESBLs菌株的49.5%(52/105);经序列分析显示:15株CTX-M-1组阳性结果有12株表达CTX-M-22,2株表达CTX-M-15,1株表达CTX-M-3;37株CTX-M-9组阳性结果有35株表达CTX-M-14,2株表达CTX-M-24;CTX-M-2组和CTX-M-8组未检测出;其中有2株新基因被检出(序列号分别为EU136031和EU202673);药敏结果显示临床野生菌株对多种β-内酰胺类耐药,对哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、头孢他啶相对较敏感。结论安徽地区CTX-M酶以CTX-M-14型和CTX-M-22型为主,同时存在变异型;药敏结果显示产酶菌株对头孢噻肟和头孢曲松、氨苄西林高度耐药。 展开更多
关键词 超广谱β-内酰胺酶类 肺炎克雷伯菌 ctx-m基因 耐药性
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细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因定点突变对酶活性的影响研究 被引量:3
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作者 陈大斌 谢勇恩 +3 位作者 凌保东 周岐新 张翔 雷军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期232-234,246,共4页
目的构建CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因突变体,比较突变前、后酶活性的变化,进一步阐明酶的分子结构特征和生化特性。方法利用重叠延伸PCR定点诱变技术将CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因Ser240(丝氨酸)AGC定点突变为Gly240(甘氨酸)GGC,分... 目的构建CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因突变体,比较突变前、后酶活性的变化,进一步阐明酶的分子结构特征和生化特性。方法利用重叠延伸PCR定点诱变技术将CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因Ser240(丝氨酸)AGC定点突变为Gly240(甘氨酸)GGC,分别构建CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体,重组载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化大肠埃希菌JM109,比较突变前、后酶活性的改变。结果酶切鉴定和DNA测序鉴定表明CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体构建成功,转化大肠埃希菌JM109后,发现含野生型CTX-M基因的重组菌其酶活性与来源菌株相近,而含突变型CTX-M基因的重组菌未检测到酶活性。结论Ser240对于维持CTX-M型超广谱β-内酰胺酶活性具有重要作用。 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m基因 定点突变 酶活性
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儿童尿道分离大肠埃希菌CTX-M耐药基因型的分布及pH值变化对其耐药性的影响 被引量:4
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作者 康郁林 王灵芝 +4 位作者 郝胜 吴滢 张泓 黄文彦 朱光华 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期35-39,共5页
目的明确儿童尿道分离大肠埃希菌CTX-M耐药基因型的亚型分布以及pH值变化对其耐药性的影响。方法对2013年10月—2014年5月收治的尿路感染患儿清洁中段尿中分离获得的113株大肠埃希菌进行培养,检测和统计产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠... 目的明确儿童尿道分离大肠埃希菌CTX-M耐药基因型的亚型分布以及pH值变化对其耐药性的影响。方法对2013年10月—2014年5月收治的尿路感染患儿清洁中段尿中分离获得的113株大肠埃希菌进行培养,检测和统计产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌株的药敏结果,并采用PCR及基因测序法分析CTX-M耐药基因的亚型分布。在体外建立不同梯度的酸碱培养环境,评估pH值变化对CTX-M耐药基因型大肠埃希菌耐药性的影响。结果 113株大肠埃希菌中有68株(60.18%)产ESBLs,产ESBLs大肠埃希菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为1.47%和2.94%。41株携带CTX-M耐药基因,其中CTX-M-14型和CTX-M-15型为主要亚型,均为18株。相对于中性环境,pH值为6.0、6.5时,大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松的耐药率差异无统计学意义(P>0.05),粪pH值为6.0时头孢吡肟的耐药性加重,差异均有统计学意义(P<0.01);pH值为8.0、8.5时,大肠埃希菌对头孢他啶和头孢吡肟的耐药率明显下降,pH值为8.5时,大肠埃希菌对头孢噻肟的耐药率明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率低;CTX-M耐药型大肠埃希菌的携带率较高,其中CTX-M-14型和CTX-M-15型为最主要的流行亚型,适当碱化尿液可能有助于CTX-M耐药型大肠埃希菌尿路感染患儿的治疗。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m耐药基因
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ESBLs肠道致病菌中CTX-M基因的鉴定与分型 被引量:2
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作者 党荣理 董路宁 +7 位作者 刘栓奎 李明 刘磊 何俊伟 吴静怡 刘正祥 孙立茹 蒋莹 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期293-296,313,共5页
目的了解临床分离肠道致病菌中产ESBLs菌株的发生率、流行特征及产CTX-M型耐药表型和基因型。方法对临床分离到的161株肠道致病菌进行ESBLs表型确证试验;采用聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M基因,对PCR产物测序并确定基因亚型;采用K-B琼脂... 目的了解临床分离肠道致病菌中产ESBLs菌株的发生率、流行特征及产CTX-M型耐药表型和基因型。方法对临床分离到的161株肠道致病菌进行ESBLs表型确证试验;采用聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M基因,对PCR产物测序并确定基因亚型;采用K-B琼脂扩散法对23种抗菌药物的耐药性进行检测。结果 161株肠道致病菌中有85株(52.8%)ESBLs表型检测阳性。PCR扩增结果表明,共有24株(28.2%)携带CTX-M型基因,其中10株(41.7%)检出CTX-M-1组基因,14株(58.3%)检出CTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-3、CTX-M-14、CTX-M-15、CTX-M-24、CTX-M-27等多种亚型,以CTX-M-14为主。药敏结果显示,不同基因型均对青霉素类,第一、二、三代头孢菌素类抗生素有较为明显的抗药性。结论乌鲁木齐地区肠道致病菌产ESBLs现象较为普遍,对氨苄西林、头孢唑林、头孢噻吩、和头孢呋辛高度耐药。细菌基因型以CTX-M-14亚型为主,同时存在多种亚型。首次在新疆地区检出CTX-M-3、CTX-M-15、CTX-M-24、CTX-M-27基因亚型。 展开更多
关键词 乌鲁木齐 肠道致病菌 超广谱Β-内酰胺酶 ctx-m基因 耐药性
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肠杆菌科产CTX-M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系 被引量:4
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作者 蔡琰 范昕建 +3 位作者 吕晓菊 陈文昭 俞汝佳 戚超 《中国抗感染化疗杂志》 2005年第1期21-24,共4页
目的 了解我院肠杆菌科产 CTX -M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系。方法 采用琼脂 2 倍稀释法测定 8种β内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度;用针对SHV、TEM、CTX -M基因的特异性引物进行PCR扩增确定β内酰胺酶基因型;对扩增的CTX M... 目的 了解我院肠杆菌科产 CTX -M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系。方法 采用琼脂 2 倍稀释法测定 8种β内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度;用针对SHV、TEM、CTX -M基因的特异性引物进行PCR扩增确定β内酰胺酶基因型;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析。结果 16株产CTX M酶菌中有15株产2种或2种以上β内酰胺酶。产 CTX- M酶菌对头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶和头孢哌酮 舒巴坦的耐药率分别为 81.3%、75.0%、31.3%和 31.3%。结论 产CTX -M酶菌株绝大多数产多种β内酰胺酶,其对头孢噻肟、头孢吡肟的耐药水平高于不产 CTX -M型 ESBLs株,耐药表型呈多样性,临床中不推荐使用头孢他啶治疗产CTX M酶菌株感染。 展开更多
关键词 肠杆菌科细菌 ctx-m Β内酰胺酶 耐药 基因型
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食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变 被引量:5
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作者 甄盼盼 汤电 +4 位作者 任艳娜 郭玉芳 王丽华 裘宗平 蒋红霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期195-202,共8页
从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株blaCTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细... 从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株blaCTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细菌的亲缘关系;通过接合转移试验、复制子分型和blaCTX-M-14上下游插入元件的检测,分析产CTX-M-14大肠杆菌的传播分子机制。PCR检测结果表明,16株食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌大多属于系统发育组A组,其次为B1和D组,没有B2组;PFGE分型结果表明,同一时间内不同动物间存在产CTX-M-14共生型大肠杆菌克隆的扩散传播,但养殖场内CTX-M-14主要是随质粒或其他元件进行水平传播;质粒复制子分型结果表明,携带blaCTX-M-14的质粒属于IncK(3/14)、IncF(5/14)、IncHI2(1/14)、IncFIB和IncF(1/14)、IncHI1和IncN(2/14)、IncI1(2/14)等,且随着时间推移,复制子的种类呈增多趋势。2002-2007年的菌株blaCTX-M基因的上下游均检测到ISEcp1和IS903;但2009年菌株除了部分在上下游都可以检测到ISEcp1和IS903外,还有的只检测到上游的ISEcp1或下游的IS903;2002-2009年的菌均未检测到ISCR1。16株产CTX-M-14大肠杆菌除了携带其他ESBLs编码基因,如blaCTX-M79和blaTEM-135外,还携带其他重要抗生素耐药基因,如oqxA、floR、aac(6′)-1b-cr及rmtB,而且2002-2009年大肠杆菌携带耐药基因的种类和数量逐年增多;接合转移试验发现,2002-2005年的菌株,blaCTX-M-14往往发生单独转移,而2009年分离菌blaCTX-M-14往往和floR或rmtB位于同一质粒上发生共同转移。这说明养殖场使用氨基糖苷类或氟苯尼考等任何一种抗生素,都可以筛选出产CTX-M-14大肠杆菌并促进其扩散,所以动物养殖过程中要慎用这些抗生素。 展开更多
关键词 ctx-m-14 传播分子机制 复制子分型 水平传播
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某医院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的分子流行病学研究 被引量:3
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作者 陈腊梅 刘文恩 +1 位作者 李宪 邹明祥 《中国感染控制杂志》 CAS 2007年第3期149-152,163,共5页
目的了解某医院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌检出率,确定其基因型,并对其相关流行病学进行研究。方法收集2004年10月—2005年7月医院临床标本分离的多重耐药大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴... 目的了解某医院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌检出率,确定其基因型,并对其相关流行病学进行研究。方法收集2004年10月—2005年7月医院临床标本分离的多重耐药大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌134株,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NC-CLS)所推荐的方法进行表型确证试验,以聚合酶链反应(PCR)法进一步检测CTX-M酶基因型,PCR产物测序并确定其基因型。随机扩增多态DNA(RAPD)对携带CTX-M酶的阳性菌株作流行病学分析。结果112株ESBLs表型阳性的肠杆菌科细菌中90株携带CTX-M基因,共检出3种基因型,即CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。RAPD共测40株菌,19株大肠埃希菌有7种RAPD类型,11株肺炎克雷伯菌有5种RAPD类型,10株阴沟肠杆菌有7种RAPD类型。结论肠杆菌科细菌产CTX-M型ESBLs相当普遍,主要为CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。CTX-M酶存在克隆传播。 展开更多
关键词 ctx-m 超广谱Β-内酰胺酶 肠杆菌科 聚合酶链反应 随机扩增多态DNA
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超广谱β内酰胺酶CTX-M型新进展 被引量:18
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作者 朱戌冬 吴伟元 陈民钧 《中国抗感染化疗杂志》 2001年第2期109-110,共2页
关键词 超广谱Β内酰胺酶 ctx-m 抗生素 分子特点 耐药
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产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌分布与耐药性分析 被引量:5
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作者 高春明 赵守松 +1 位作者 李家斌 程君 《实用医学杂志》 CAS 2007年第11期1745-1747,共3页
目的:了解我院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分布和耐药性,为临床合理选用抗生素提供依据。方法:根据ESBLs已知基因序列设计CTX-M通用引物,对36株临床分离产ESBLs大肠埃希菌进行PCR扩增。采用琼脂平皿稀释法进行最低... 目的:了解我院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分布和耐药性,为临床合理选用抗生素提供依据。方法:根据ESBLs已知基因序列设计CTX-M通用引物,对36株临床分离产ESBLs大肠埃希菌进行PCR扩增。采用琼脂平皿稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)测定。结果:31株大肠埃希菌产CTX-M酶,占产ESBLs菌株的86/。CTX-M-1组13株阳性,CTX-M-9组24株阳性,其中6株二者共同阳性;CTX-M-2组、CTX-M-8组和CTX-M-25组均为0株阳性。产CTX-M酶大肠埃希菌对碳青霉烯类和哌拉西林/他唑巴坦普遍敏感,对哌拉西林和喹诺酮类完全耐药,对头孢曲松和头孢噻肟MIC结果显示耐药明显,对其他三代、四代头孢菌素及头孢西丁耐药率介于45.16/~64.52/之间。结论:我院大部分产ESBLs大肠埃希菌产CTX-M酶,产CTX-M酶大肠埃希菌对头孢曲松和头孢噻肟耐药明显。 展开更多
关键词 Β内酰胺酶类 大肠埃希菌 ctx-m型PCR耐药性 平皿琼脂稀释法
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湖北地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶肺炎克雷白菌基因型与耐药特征研究 被引量:1
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作者 梅四清 李从荣 +2 位作者 黄俊 吕霞 彭少华 《医药导报》 CAS 2008年第11期1407-1410,共4页
目的了解湖北地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷白菌的流行基因型和耐药特征,为医师合理使用抗生素提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs肺炎克雷白菌70株,采用NCCLS表型筛选和确证实验检测ESBLs,PCR-RFLP检测blaCTX-... 目的了解湖北地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷白菌的流行基因型和耐药特征,为医师合理使用抗生素提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs肺炎克雷白菌70株,采用NCCLS表型筛选和确证实验检测ESBLs,PCR-RFLP检测blaCTX-M及分型,KB纸片法检测产CTX-M酶株对9种抗菌药的体外抗菌活性,质粒接合实验,随机扩增多态性DNA分型法(RAPD)进行克隆株的DNA同源性分析。结果CTX-M型ESBLs有26株(46%),均为CTX-M-1亚型,其中CTX-M-3型最常见;产CTX-M菌株对多种抗生素耐药,但对亚胺培南的敏感性为100%;CTX-M型ESBLs介导的耐药可水平转移,DNA同源性分析显示其为不同的克隆株。结论亚胺培南可作为治疗产CTX-M型ESBLs的首选药物,产CTX-M型ESBLs菌株的传播机制以质粒介导的为主,应加强湖北地区产CTX-M型ESBLs菌株的分子流行病学检测。 展开更多
关键词 肺炎克雷白菌 ESBLS ctx-m 分子流行病学
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10-23脱氧核酶对CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶的抑制作用 被引量:1
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作者 张志坚 郭小兵 +1 位作者 李海霞 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第5期740-742,共3页
目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23DRz)抑制CTX-M-38型ESBLs的可行性。方法:依据CTX-M-38型ESBLs序列及其mRNA构象特征,设计针对其mRNA结构的10-23DRz脱氧核酸序列及反义核酸序列;采用氯化钙法对10-23DRz及反义核酸进行转化;依据转化菌在平... 目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23DRz)抑制CTX-M-38型ESBLs的可行性。方法:依据CTX-M-38型ESBLs序列及其mRNA构象特征,设计针对其mRNA结构的10-23DRz脱氧核酸序列及反义核酸序列;采用氯化钙法对10-23DRz及反义核酸进行转化;依据转化菌在平板上菌落形成状况及菌液吸光度选择10-23DRz应用量;采用K-B法体外药敏试验检测耐药活性。结果:45nmol10-23DRz用量时转化菌菌落形成量及菌液吸光度较为理想。除哌拉西林、头孢噻肟及亚胺培南外,其他抗菌药物10-23DRz组与反义核酸组抑菌环直径间差异有统计学意义(P均<0.001)。结论:10-23DRz可抑制CTX-M-38型ESBLs的表达。 展开更多
关键词 10-23脱氧核酶 ctx-m-38型 超广谱Β-内酰胺酶
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CTX-M型超广谱β-内酰胺酶研究进展 被引量:2
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作者 冯建昆 吕婧玉 +1 位作者 冯建英 张海清 《广东畜牧兽医科技》 2012年第6期4-6,17,共4页
近年来,由于第三代头孢菌素和单环β-内酰胺抗菌药物的开发和广泛使用,许多细菌产生质粒介导的能水解头孢噻肟等第三代头孢及氨曲南等单胺类抗生素的超广谱β-内酰胺酶(ext ended-s pect r umβ-l act amas es,ESBLs),尤其是CTX-M型ESB... 近年来,由于第三代头孢菌素和单环β-内酰胺抗菌药物的开发和广泛使用,许多细菌产生质粒介导的能水解头孢噻肟等第三代头孢及氨曲南等单胺类抗生素的超广谱β-内酰胺酶(ext ended-s pect r umβ-l act amas es,ESBLs),尤其是CTX-M型ESBLs,呈逐年增加的趋势,目前在世界各地广泛、快速地传播,甚至在局部地区出现爆发流行。本文就CTX-M型ESBLs的起源、流行病学、遗传特性和遗传背景进行综述。 展开更多
关键词 ctx-m型ESBLs 流行病学 遗传特性 遗传背景
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