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一种水稻叶片基因组DNA简易提取方法 被引量:4
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作者 金素奎 国倩倩 +1 位作者 刘巧泉 高继平 《生物技术通报》 北大核心 2025年第1期74-84,共11页
【目的】为了应对日益增加的大规模遗传材料鉴定需求,急需建立一种快速、简易、高效、低成本的基因组DNA提取方法。【方法】根据水稻遗传鉴定的特点,对传统TPS法进行改进和简化。(1)将特制的钢珠加样条与全自动研磨仪结合使用,提高了研... 【目的】为了应对日益增加的大规模遗传材料鉴定需求,急需建立一种快速、简易、高效、低成本的基因组DNA提取方法。【方法】根据水稻遗传鉴定的特点,对传统TPS法进行改进和简化。(1)将特制的钢珠加样条与全自动研磨仪结合使用,提高了研磨水稻叶片组织的速度;(2)使用TPS缓冲液室温研磨裂解,无需液氮冷冻研磨;(3)研磨后的组织匀浆仅需75℃水浴20 min即可完成裂解;(4)室温静置5 min后吸取粗提液上清5μL至96孔PCR板内,使用排枪加入95μL灭菌的去离子水进行稀释,即完成基因组DNA的提取过程。【结果】简易TPS法提取基因组DNA的步骤减少至6步以内,省略了DNA沉淀、离心、洗涤、溶解等过程。提取过程简单、快速,可在30 min内完成96个样本的DNA提取。提取过程中使用的试剂种类较少且廉价易得、安全环保。通过优化DNA提取液的用量,用简易TPS法提取的基因组DNA开展的各类常规分子遗传鉴定的效果与CTAB法及传统TPS法相当。【结论】简易TPS法提高了水稻基因组DNA提取的效率,适合高通量的遗传鉴定。 展开更多
关键词 水稻叶片 基因组DNA ctab 传统TPS法 简易TPS法
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改良CTAB法快速提取棉花DNA 被引量:198
2
作者 宋国立 崔荣霞 +4 位作者 王坤波 郭立平 黎绍惠 王春英 张香娣 《棉花学报》 CSCD 北大核心 1998年第5期273-275,共3页
针对棉花(Gosspium)富含棉酚、多糖等其它次生干扰物质这一特点而设计的一种快速分离和纯化棉花总DNA(gDNA)的方法。该方法是对CTAB(cetyltrimethylammoniumbromide)法的改良,... 针对棉花(Gosspium)富含棉酚、多糖等其它次生干扰物质这一特点而设计的一种快速分离和纯化棉花总DNA(gDNA)的方法。该方法是对CTAB(cetyltrimethylammoniumbromide)法的改良,它在CTAB法的基础上,首先用DIECA(diethyldithiocarbamicacid)抑制酚氧化酶的活性,然后用活性炭和PVP40(polyvinylpyrrolidone)排除棉酚等其它次生干扰物质。试验证明,该方法比较简便、快速、经济、有效,得到的gDNA完全可以满足PCR等分子生物学分析。 展开更多
关键词 ctab 提取 棉花gDNA
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基于CTAB法提取毛竹基因组DNA的探讨 被引量:38
3
作者 高志民 范少辉 +3 位作者 高健 李雪平 蔡春菊 彭镇华 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2006年第6期725-728,共4页
应用CTAB法、改良CTAB法、改良CTAB-高盐沉淀法对毛竹基因组DNA进行了提取,并用紫外分光光度计(UV3300)、琼脂糖凝胶电泳和PCR分析对提取的DNA进行了检测,对DNA的产量、质量、PCR效果等方面进行了综合比较。结果表明:改良CTAB-高盐沉淀... 应用CTAB法、改良CTAB法、改良CTAB-高盐沉淀法对毛竹基因组DNA进行了提取,并用紫外分光光度计(UV3300)、琼脂糖凝胶电泳和PCR分析对提取的DNA进行了检测,对DNA的产量、质量、PCR效果等方面进行了综合比较。结果表明:改良CTAB-高盐沉淀法是提取高质量毛竹基因组DNA的较好方法。 展开更多
关键词 毛竹 基因组DNA ctab
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一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法 被引量:47
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作者 闫苗苗 魏光成 +2 位作者 潘效红 马怀雷 李伟振 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第20期8488-8488,8558,共2页
[目的]介绍一种简单、高效且能用于提取动物与植物的总DNA的方法。[方法]采用改良CTAB法,从24个花生品种嫩叶及小白鼠的肝、肺和肾中提取DNA,进行琼脂糖电泳和蛋白核酸分析仪检测及PCR扩增检验。[结果]所提取DNA电泳条带清晰,整齐均匀,O... [目的]介绍一种简单、高效且能用于提取动物与植物的总DNA的方法。[方法]采用改良CTAB法,从24个花生品种嫩叶及小白鼠的肝、肺和肾中提取DNA,进行琼脂糖电泳和蛋白核酸分析仪检测及PCR扩增检验。[结果]所提取DNA电泳条带清晰,整齐均匀,OD260/OD280值介于1.77~1.83,用于PCR扩增获得理想效果。[结论]该研究介绍的改良CTAB法提取动物和植物的总DNA,满足开展PCR扩增的要求。 展开更多
关键词 动物 植物 DNA 改良ctab
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用改进的CTAB法提取香菇基因组DNA 被引量:60
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作者 张红 秦莲花 +1 位作者 谭琦 潘迎捷 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期547-550,共4页
通过用改进的CTAB法提取27个香菇菌株的基因组DNA,并分别用紫外、琼脂糖凝胶电泳和PCR技术检测提取DNA样品的质量和产量,证明该方法可以用于香菇基因组DNA的提取,为香菇基因组DNA的提取建立了一种简单可靠的新方法.
关键词 ctab 香菇 基因组DNA
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改良CTAB法提取高质量香蕉叶片总RNA 被引量:25
6
作者 淦国英 漆艳香 +2 位作者 蒲金基 张欣 谢艺贤 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期192-195,共4页
以巴西香蕉叶片为试验材料,采用改良CTAB法提纯香蕉叶片总RNA。结果表明,改良CTAB法提取的香蕉叶片总RNA的28S、18SrDNA条带清晰、整齐,A260/A280值大于2.0,无需任何纯化处理即可用作香蕉MuACTIN基因的扩增模板,经RT-PCR扩增获得了带型... 以巴西香蕉叶片为试验材料,采用改良CTAB法提纯香蕉叶片总RNA。结果表明,改良CTAB法提取的香蕉叶片总RNA的28S、18SrDNA条带清晰、整齐,A260/A280值大于2.0,无需任何纯化处理即可用作香蕉MuACTIN基因的扩增模板,经RT-PCR扩增获得了带型清晰的目的条带,说明利用此法分离的RNA纯度和浓度符合RT-PCR的要求;而CTAB法提取的总RNA产量较低,且纯度不高。说明改良CTAB法能有效从富含多酚和多糖的香蕉叶片中提取高质量的总RNA。 展开更多
关键词 改良ctab 香蕉叶片 总RNA 提取
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改良Chelex-100法和CTAB法用于转基因抗草甘膦大豆检测效果的比较 被引量:12
7
作者 王永 兰青阔 +3 位作者 张莉 赵新 朱珠 程奕 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期898-901,共4页
以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明... 以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明:虽然改良Chelex-100法DNA提取纯度不高,但是提取效率与常规CTAB法相当,而且改良Chelex-100法能够快速在1 h之内从大豆中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰。因此,改良Chelex-100法可以替代CTAB法提取DNA用于转基因检测,该方法具有经济、简便、快速的特点。 展开更多
关键词 Chelex-100法 ctab DNA 转基因检测
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改良CTAB法和高盐低pH值法提取花生DNA的效果 被引量:44
8
作者 王传堂 黄粤 +5 位作者 杨新道 姜勇 张建成 陈殿绪 闵平 禹山林 《花生学报》 2002年第3期20-23,共4页
采用改良CTAB法和高盐低pH法提取花生总DNA,结果表明,高盐低pH法提取的花生DNA分子量略小,DNA有一定程度的降解,但得率大大高于CTAB法,按我们稍有改动的实验方法,每克鲜重的叶片,可提取1000μg以上的DNA。两种方法提取的DNA均可酶切完全... 采用改良CTAB法和高盐低pH法提取花生总DNA,结果表明,高盐低pH法提取的花生DNA分子量略小,DNA有一定程度的降解,但得率大大高于CTAB法,按我们稍有改动的实验方法,每克鲜重的叶片,可提取1000μg以上的DNA。两种方法提取的DNA均可酶切完全,RAPD-PCR扩增,结果相同。高盐低pH值法廉价、步骤少、易掌握,是提取花生DNA较好的方法。 展开更多
关键词 花生 改良ctab 高盐低pH法 DNA 提取方法
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CTAB法用于染病烟草植株中烟草丛顶病毒RNA的提取 被引量:6
9
作者 左瑞娟 周雨泫 +3 位作者 李丽娟 董鹏 陈海如 李凡 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期26-29,共4页
CTAB法是一种广泛用于从染病植物中提取总核酸,并用于后续相关病原物PCR检测的核酸提取法,已普遍运用于DNA病毒、植原体、细菌、真菌侵染植物的总DNA提取和病原检测。本文尝试将CTAB法用于一种由RNA病毒(烟草丛顶病毒)引起的烟草丛顶病... CTAB法是一种广泛用于从染病植物中提取总核酸,并用于后续相关病原物PCR检测的核酸提取法,已普遍运用于DNA病毒、植原体、细菌、真菌侵染植物的总DNA提取和病原检测。本文尝试将CTAB法用于一种由RNA病毒(烟草丛顶病毒)引起的烟草丛顶病染病组织总核酸的提取,以总核酸进行烟草丛顶病毒的RT-PCR检测,并与常规RNA病毒核酸提取法——Trizol法作比较。结果表明CTAB法和Trizol法提取的核酸用于烟草丛顶病毒RT-PCR检测时,均能扩增到目的条带,检测结果一致。在对复合侵染材料进行检测时发现,CTAB法提取的染病植物组织总核酸既包括DNA也包含RNA,有利于对DNA和RNA病原物同时进行检测;CTAB法所用试剂较Trizol法便宜,毒性小,且提取的核酸量较多、保存时间较长。因此CTAB法是一种高效、简便、经济的从烟草丛顶病染病组织中提取烟草丛顶病毒RNA的方法。 展开更多
关键词 ctab TRIZOL法 核酸提取 烟草丛顶病毒
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改良CTAB法提取菠萝DNA 被引量:7
10
作者 张惠云 吴青松 +2 位作者 孙伟生 昝逢刚 窦美安 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期440-443,共4页
采用改良CTAB法提取菠萝叶片叶基、叶尖和叶中部及幼根等部位的DNA,各个部位DNA的OD260/OD280比值为1.72~1.88;OD260/OD2301.45~2.11;提取产量为5.584—24.325μg/g(鲜重);各个部位DNA提取产量大小排序为:叶基、心叶... 采用改良CTAB法提取菠萝叶片叶基、叶尖和叶中部及幼根等部位的DNA,各个部位DNA的OD260/OD280比值为1.72~1.88;OD260/OD2301.45~2.11;提取产量为5.584—24.325μg/g(鲜重);各个部位DNA提取产量大小排序为:叶基、心叶〉叶中部、叶尖〉幼根。本方法提取的菠萝DNA质量较高,可用作于SRAP分析。 展开更多
关键词 菠萝 DNA提取 改良ctab
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改良CTAB法提取薰衣草基因组DNA研究 被引量:9
11
作者 任艳利 腊萍 +1 位作者 张相峰 尚天翠 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第22期13292-13293,13320,共3页
[目的]寻找高效、快速的薰衣草(Lavandula pedunculata)基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50~1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的... [目的]寻找高效、快速的薰衣草(Lavandula pedunculata)基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50~1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的拖尾现象;Eco RI酶切基因组DNA图谱表明,提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切;以提取的DNA为模板,用1对随机引物进行RAPD-PCR,发现检测条带清晰,说明获得的DNA质量较高,可以满足相关的分子生物学研究需要。[结论]该研究可以为薰衣草分子生物学的后续试验的开展奠定理论基础。 展开更多
关键词 薰衣草 DNA提取 改良ctab
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改良CTAB法提取核桃总RNA试验 被引量:36
12
作者 刘晓菊 洪海波 +2 位作者 李敏 刘媛 杨克强 《山东农业科学》 2008年第1期97-99,共3页
从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB... 从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。 展开更多
关键词 核桃嫩叶 RNA提取 次生代谢物 改良ctab
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改良CTAB法在核桃叶片基因组DNA提取中的应用研究 被引量:19
13
作者 宋艳波 吴国良 牛洪斌 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第2期109-112,共4页
核桃叶片中酚类、多糖和蛋白含量丰富,影响了基因组DNA的提取。以CTAB法为基础进行了改良,并对核桃叶片基因组DNA进行提取。结果表明,通过在研磨时添加PVPP后的改良CTAB法不仅操作简单,经济高效,而且去除多糖和多酚类物质彻底,能成功用... 核桃叶片中酚类、多糖和蛋白含量丰富,影响了基因组DNA的提取。以CTAB法为基础进行了改良,并对核桃叶片基因组DNA进行提取。结果表明,通过在研磨时添加PVPP后的改良CTAB法不仅操作简单,经济高效,而且去除多糖和多酚类物质彻底,能成功用于核桃的基因克隆研究,在核桃DNA提取中值得大力推广使用。 展开更多
关键词 核桃 DNA提取 ctab PVPP 叶片
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改良CTAB法提取益智基因组DNA 被引量:7
14
作者 刘晓静 王海燕 +2 位作者 张根良 夏志强 王文泉 《江西农业学报》 CAS 2007年第8期111-112,114,共3页
益智叶片中多酚和多糖等杂质的含量较高,为获得高质量的益智基因组DNA,试验在传统CTAB法的基础上加以改良,提取益智基因组DNA,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测.结果表明,改良后的方法较之传统方法简单高效,所获得的基因组DNA质量较好... 益智叶片中多酚和多糖等杂质的含量较高,为获得高质量的益智基因组DNA,试验在传统CTAB法的基础上加以改良,提取益智基因组DNA,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测.结果表明,改良后的方法较之传统方法简单高效,所获得的基因组DNA质量较好,OD260/OD280在1.7~2.0之间,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析条带清晰,多态性好.适合于进行以PCR为基础的DNA多态性的研究. 展开更多
关键词 益智 基因组DNA 改良ctab
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改进的SDS-CTAB法提取濒危植物连香树总DNA 被引量:30
15
作者 黄绍辉 方炎明 《武汉植物学研究》 CSCD 北大核心 2007年第1期98-101,共4页
对珍稀濒危植物连香树(Cercidiphyllum japonicum)的6种总DNA提取方法进行了对比试验,结果表明改进的SDS-CTAB法更适合于连香树总DNA提取。该方法提取的DNA经紫外消光值检测,其A260/A280为1.8532,优于CTAB法(1.4872)、SDS法(1.3552)、PV... 对珍稀濒危植物连香树(Cercidiphyllum japonicum)的6种总DNA提取方法进行了对比试验,结果表明改进的SDS-CTAB法更适合于连香树总DNA提取。该方法提取的DNA经紫外消光值检测,其A260/A280为1.8532,优于CTAB法(1.4872)、SDS法(1.3552)、PVP法(1.5079)、尿素法(1.1858)和高盐低pH法(1.4534)。琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增结果也得出同样的结论。 展开更多
关键词 连香树(Gercidiphyllum japonicum) DNA提取 改进的SDS-ctab
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用改良CTAB法提取菠萝蜜叶和花序总RNA 被引量:5
16
作者 李映志 吴成焕 +2 位作者 何楚仪 黎结仪 叶春海 《热带作物学报》 CSCD 2009年第2期167-169,共3页
以菠萝蜜的叶片和花序为材料,采用改良的十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法(在原来的提取方法基础上,使用乙酸钾和无水乙醇预先沉淀果胶),成功提取菠萝蜜叶和花序的总RNA,平均产率分别为74.7μg/gFW和31.6μg/gFW。经紫外分光光度计检测、1... 以菠萝蜜的叶片和花序为材料,采用改良的十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法(在原来的提取方法基础上,使用乙酸钾和无水乙醇预先沉淀果胶),成功提取菠萝蜜叶和花序的总RNA,平均产率分别为74.7μg/gFW和31.6μg/gFW。经紫外分光光度计检测、1%琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR扩增分析结果表明,使用该方法所提取的RNA质量高,能够满足相应的分子操作。 展开更多
关键词 菠萝蜜 RNA提取 ctab
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提取板栗DNA的CTAB法和SDS法的比较 被引量:5
17
作者 王少斌 程水源 +5 位作者 王燕 许锋 姜德志 陈慧娟 李琳玲 程华 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第14期3101-3103,共3页
分别采用十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法和十二烷基磺酸钠(SDS)法提取板栗(Castanea mollis-sima BL.)基因组DNA,取适量DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用紫外可见分光光度计测定所提取的DNA在260和280 nm的吸光度及其比值,利用Eco RⅠ和Mse... 分别采用十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法和十二烷基磺酸钠(SDS)法提取板栗(Castanea mollis-sima BL.)基因组DNA,取适量DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用紫外可见分光光度计测定所提取的DNA在260和280 nm的吸光度及其比值,利用Eco RⅠ和MseⅠ双酶切后进行随机扩增长度多态性(AFLP)分析。结果表明,两种方法均能从板栗中提取出一定质量的、比较完整的、纯度比较高的DNA,SDS法提取的板栗DNA的纯度更高、质量更好。 展开更多
关键词 板栗(Castanea mollissima BL.) DNA提取 十六烷基三乙基溴化铵(ctab)法 十二烷基磺酸钠(SDS)法 随机扩增长度多态性(AFLP)
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SDS-CTAB法提取烟草病圃土壤微生物总DNA 被引量:8
18
作者 蔡刘体 胡重怡 罗正友 《江西农业学报》 CAS 2011年第2期119-121,共3页
采用SDS-CTAB法提取了烟草病圃土壤中微生物的总DNA,经过纯化后获得的DNA大小约为21 kb,OD260/OD280高于1.70;用细菌和真菌保守序列引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳能检测到预期大小的扩增条带。
关键词 烟草 病圃 土壤微生物 总DNA SDS-ctab
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利用改良的CTAB-LiCl法提取甘薯块根RNA 被引量:11
19
作者 侯夫云 赵兵 +5 位作者 赵宝杰 王庆美 李爱贤 张海燕 董顺旭 张立明 《山东农业科学》 2008年第9期90-92,共3页
甘薯块根中含有大量的淀粉、酚类化合物、多糖、色素以及纤维等次生代谢物质,严重影响了块根总RNA的提取。本试验对CTAB法进行改良,采用PVPP和β-巯基乙醇去除酚类物质,氯仿/异戊醇去除蛋白质,LiCl过夜沉淀法去除DNA,得到的RNA纯度、完... 甘薯块根中含有大量的淀粉、酚类化合物、多糖、色素以及纤维等次生代谢物质,严重影响了块根总RNA的提取。本试验对CTAB法进行改良,采用PVPP和β-巯基乙醇去除酚类物质,氯仿/异戊醇去除蛋白质,LiCl过夜沉淀法去除DNA,得到的RNA纯度、完整性以及质量均好。结果表明改良的CTAB法适合甘薯块根RNA的提取。 展开更多
关键词 甘薯块根 ctab RNA
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改良CTAB法对山茶属植物基因组DNA提取的比较研究 被引量:13
20
作者 张金丽 张罗霞 +1 位作者 杨坤梅 李宗艳 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期785-791,共7页
山茶属植物体内酚类、多糖等次生代谢物质含量较高,获得高纯度的总DNA比较困难。为筛选出适宜山茶属植物基因组DNA的较优提取方法,并研究不同材料处理方法的差异,采用四因素三水平的正交设计,对山茶属植物基因组DNA的提取方法 CTAB法进... 山茶属植物体内酚类、多糖等次生代谢物质含量较高,获得高纯度的总DNA比较困难。为筛选出适宜山茶属植物基因组DNA的较优提取方法,并研究不同材料处理方法的差异,采用四因素三水平的正交设计,对山茶属植物基因组DNA的提取方法 CTAB法进行优化。最后确定较优提取方法为:老叶用CTAB-free去除多糖并防止酚氧化,用2%CTAB、2%PVP、24∶1抽提2次;嫩叶用2×CTAB去除多糖并防止酚氧化,用1%CTAB、2%PVP、24∶1抽提1次,并用ISSR-PCR检测。结果显示采用优化方案提取的DNA质量更好,能较好地溶于TE,可用于ISSR-PCR扩增,且扩增出清晰的条带。 展开更多
关键词 山茶 基因组DNA提取 改良ctab 正交设计
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