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2021—2023年湖南省无害化处理场CSFV、PRV、PRRSV污染情况调查
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作者 唐亚新 胡巧云 +8 位作者 唐小明 王卫国 彭志 谢怡灵 张坤 王昌建 鲁杏华 范仲鑫 黎满香 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期5-9,47,共6页
为了解湖南省2021—2023年无害化处理场猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)污染情况,采用RT-qPCR方法对采集的1825份淋巴结、脾脏、耳尖等组织样品进行CSFV、PRV、PRRSV核酸检测,并对2022年衡南县PRRSV... 为了解湖南省2021—2023年无害化处理场猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)污染情况,采用RT-qPCR方法对采集的1825份淋巴结、脾脏、耳尖等组织样品进行CSFV、PRV、PRRSV核酸检测,并对2022年衡南县PRRSV阳性样品进行分型检测及Nsp2基因测序。结果显示:CSFV、PRV、PRRSV的阳性检出率分别为3.01%、1.81%、30.14%;双重污染率为2.52%,以PRRSV与其他2种病原双重污染为主,三重污染率较低,为0.05%。2022年衡南县无害化处理场的PRRSV阳性检出率为24.12%,以春、冬季阳性率较高;北美型(NA-PRRSV)、高致病型(HP-PRRSV)、类NADC30毒株(NADC30-like)阳性检出率分别为98.39%、20.97%、43.55%;经Nsp2基因测序,1条序列存在“1+29”个不连续氨基酸缺失,为HP-PRRSV毒株,17条序列存在“111+1+19”个不连续氨基酸缺失,为类NADC30毒株。结果表明:2021—2023年,湖南省无害化处理场CSFV、PRV污染率维持在较低水平,PRRSV污染率较高,呈逐年上升趋势,其中类NADC30毒株为优势流行毒株,建议持续做好猪瘟及猪伪狂犬病的免疫接种及效果评估工作,加强PRRSV的遗传变异监测及养殖场的饲养管理和生物安全管理,以保障猪群生产安全。 展开更多
关键词 无害化处理场 PRRSV PRV csfv 混合污染
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PRRSV、CSFV、PRV和PCV2四重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 李欣 杨莉 +4 位作者 刘光亮 王文秀 刘海隆 曹宗喜 张艳 《动物医学进展》 北大核心 2024年第6期7-14,共8页
为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的四重荧光定量PCR(qPCR)检测方法,针对PRRSV的ORF2基因、CSFV的5′UTR基因、PRV的gB基因、PCV2的ORF2基因设计了引物及Taq Ma... 为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的四重荧光定量PCR(qPCR)检测方法,针对PRRSV的ORF2基因、CSFV的5′UTR基因、PRV的gB基因、PCV2的ORF2基因设计了引物及Taq Man探针,并进行反应体系优化,敏感性、特异性验证,建立了同时检测上述4种病原的四重实时荧光定量PCR。结果显示,所建立的四重荧光PCR扩增效率(E)、相关系数(R^(2))及曲线斜率均在正常范围内,检测PRRSV、CSFV、PRV、PCV2 E值、R^(2)、斜率分别为92.9%、0.998、-3.504,90.7%、0.998、-3.566,94.3%、0.996、-3.466,94.2%、0.997及-3.470。PRRSV、CSFV、PRV、PCV2重组质粒最低检出限分别达到10^(2)、10^(2)、10^(2)、10^(3) copies/μL;四重qPCR反应体系中的多条引物间不发生交叉反应,经评价该方法特异性良好;批内和批间重复性试验结果显示,变异系数(CV)均在1%以下,具有良好的重复性。分别使用该方法和相应的国标荧光定量检测法对采集的298份临床样品进行检测对比,两种方法检测PRRSV、CSFV、PRV、PCV2阳性符合率分别为96.08%、96.38%、100%、94.95%,均在94%以上。结果表明,建立的检测方法方便、灵敏、高效、特异性强,适用于猪呼吸道疾病病原学、流行病学研究以及临床病例的诊断,并为猪呼吸道疾病的预防和控制提供技术支撑。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2型 四重实时荧光定量PCR
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PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的免疫原性分析 被引量:6
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作者 许信刚 王志昇 +2 位作者 李兆才 张琪 童德文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期892-898,共7页
本试验旨在构建以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟双价基因工程亚单位疫苗候选株。利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF5... 本试验旨在构建以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟双价基因工程亚单位疫苗候选株。利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF5-E2。该重组病毒带有His6标签,且胞质区域(CTD)和跨膜区域(TM)均来源于杆状病毒囊膜蛋白gp64的CTD和TM。对重组病毒进行Western blot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验以及淋巴细胞增殖试验。Western blot分析结果表明,重组杆状病毒中表达了重组GP5和E2蛋白;激光共聚焦显微镜检测表明,重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf-9后在细胞膜上展示了重组GP5和E2蛋白;免疫金电子显微镜观察表明,重组GP5和E2蛋白展示在杆状病毒囊膜上;动物免疫试验表明,重组杆状病毒免疫小鼠后产生了抗PRRSV和抗CSFV的特异性抗体;淋巴细胞增殖试验表明,重组杆状病毒能诱发较强的细胞免疫应答。本试验成功构建表面展示PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的重组杆状病毒,为下一步应用该重组杆状病毒作为双价亚单位疫苗预防PRRSV和CSFV的混合感染奠定基础。 展开更多
关键词 杆状病毒表面展示系统 PRRSV csfv GP5蛋白 E2蛋白
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多重PCR检测CSFV和PRRSV与PCV2 被引量:1
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作者 陶海静 王老七 赵顺喜 《中国动物检疫》 CAS 2010年第6期34-35,共2页
根据GenBank上猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的已发表序列,分别设计并合成了3对特异性扩增引物,建立CSFV、PRRSV和PCV2单项PCR检测方法,分别扩增出预期的466 bp、202 bp和706 bp片段。在优化单项PCR... 根据GenBank上猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的已发表序列,分别设计并合成了3对特异性扩增引物,建立CSFV、PRRSV和PCV2单项PCR检测方法,分别扩增出预期的466 bp、202 bp和706 bp片段。在优化单项PCR反应条件基础上,建立了CSFV-PRRSV-PCV2多重PCR检测方法,为预防和控制上述三种病毒性传染病提供了一种快速、敏感、特异的检测方法。 展开更多
关键词 csfv PRRSV PCV2 多重PCR
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某猪场CSFV、PRRSV、PCV2和PRV多重感染病例的报道 被引量:2
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作者 徐国 代振江 +4 位作者 曾智勇 叶百川 张爱琼 咸文 何小莉 《猪业科学》 2017年第1期82-83,共2页
贵州省某种猪场一周内连续发生30余头母猪早产和(或)产死胎症状,猪场工作人员向笔者实验室送检同窝流产死胎4只。根据流行情况和临床特征,初步判断与病毒感染有关。为筛查具体病原,本实验室将送检死胎组织混合样品分别对CSFV、PRRSV、P... 贵州省某种猪场一周内连续发生30余头母猪早产和(或)产死胎症状,猪场工作人员向笔者实验室送检同窝流产死胎4只。根据流行情况和临床特征,初步判断与病毒感染有关。为筛查具体病原,本实验室将送检死胎组织混合样品分别对CSFV、PRRSV、PCV2、PRV、PPV和JEV六种常见病毒进行病原核酸检测,结果显示该猪场发病猪存在CSFV、PRRSV、PCV2和PRV的多重感染。 展开更多
关键词 csfv PRRSV PCV2 PRV 多重感染
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云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合症(PRDC)患病猪群中PRRSV,PCV-2,CSFV,PRV混合感染调查 被引量:25
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作者 舒相华 尹革芬 +4 位作者 杨志雷 宋春莲 李文贵 潘伟荣 刘旭川 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期54-58,共5页
针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1 164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型... 针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1 164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型PCV-2特异抗体。结果表明:各季节和不同生长阶段猪群存在一种及两种以上的病毒混合感染,四重感染相对较少。从全年看单独感染占39.10%,PCV-2感染率最高,其次是PRV,PRRSV和CSFV;二重感染占26.13%,以PCV-2+PRV最常见,其次是PCV-2+PRRSV、PRV+PRRSV;三重感染占8.05%,PCV-2+PRRSV+PRV最常见;有四重感染出现,仅占1.57%。从季节来看,春季和夏季混合感染最高,分别为76.53%和60.74%,冬季和秋季的混合感染率分别为59.50%和53.55%。从年龄和性别看,育肥猪的混合感染率高于仔猪,分别为68.66%和61.11%,种公猪的感染率高于母猪,分别为70.00%和55.51%。说明4种病毒有单独感染或混合感染,推测其中PCV-2在混合感染中可能充当免疫抑制的角色,混合感染使PRDC症状更明显,死亡率增高。 展开更多
关键词 猪呼吸道疾病综合征 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪伪狂犬病病毒
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冀鲁豫交界地区PCV-2和CSFV血清抗体调查 被引量:2
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作者 江成 刘文强 +1 位作者 刘桂芹 李吉楠 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第8期119-122,共4页
调查了冀鲁豫三省交界地区规模养殖场猪群圆环病毒2型(PCV-2)抗体阳性率与其他地区的差异和流行病学特点、PCV-2抗体阳性率对猪瘟病毒(CSFV)抗体的影响。在该地区选择了7个猪场采集了222份血清,用ELISA试剂盒检测PCV-2型和CSFV的... 调查了冀鲁豫三省交界地区规模养殖场猪群圆环病毒2型(PCV-2)抗体阳性率与其他地区的差异和流行病学特点、PCV-2抗体阳性率对猪瘟病毒(CSFV)抗体的影响。在该地区选择了7个猪场采集了222份血清,用ELISA试剂盒检测PCV-2型和CSFV的抗体水平并进行统计学分析。检测结果表明,7个养猪场的猪群都感染过PCV-2,发生疑似感染的猪病例中PCV-2的平均抗体阳性率在62.29/6~72.0%之间,高于其他地区。而猪瘟免疫合格率仅有32.4%~42.4%。PCV-2抗体水平高的猪,猪瘟抗体水平低。表明该地区PCV-2的感染情况比较严重。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪瘟病毒 酶联免疫吸附试验 抗体
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一步法CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR诊断方法的建立与初步应用 被引量:3
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作者 袁秀芳 路斌 +2 位作者 徐丽华 李军星 王一成 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期537-543,共7页
根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应... 根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应;可以检出20个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)低于4%,方法重复性好。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对50份疑似病例组织进行检测,结果荧光定量RT-PCR检出30份PRRSV阳性,13份CSFV阳性,均高于常规RT-PCR方法的检出数(24份PRRSV阳性,10份CSFV阳性)。本研究建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法具有快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于PRRSV和CSFV的实验室快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重实时荧光定量RT-PCR
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实时荧光定量PCR检测猪病料中的PRRSV与CSFV 被引量:2
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作者 陈钟鸣 张志成 方光远 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第2期14-18,共5页
根据GenBank发表的PRRSV、CSFV基因核苷酸序列,应用Primer 5.0软件分别设计了2对特异性引物。以重组质粒作为阳性标准品,应用SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测两种病毒的核酸含量。在样品稀释到10-1~10-11拷贝时,能得出良好的线性关系... 根据GenBank发表的PRRSV、CSFV基因核苷酸序列,应用Primer 5.0软件分别设计了2对特异性引物。以重组质粒作为阳性标准品,应用SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测两种病毒的核酸含量。在样品稀释到10-1~10-11拷贝时,能得出良好的线性关系,相关系数为R2=0.999 8。用此法检测猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV),结果均为阴性。建立了PRRSV、CSFV的标准曲线。该方法具有线性关系好、特异性强、敏感性高、重复性好等特点,为分析PRRSV、CSFV共感染猪体内病毒的含量提供了有效地检测方法。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 实时荧光定量PCR 重组质粒 标准曲线
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SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2和PRV交叉感染的检测 被引量:8
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作者 蒙雪琼 刘棋 +5 位作者 陈义祥 黄夏 赵国明 黄胜斌 胡丽萍 陈芳芳 《动物医学进展》 CSCD 2006年第11期84-86,共3页
采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。... 采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。结果,扩增出了SIV特异目的基因片段,且4份病料都为混合感染,感染状况分别为SIV/PRRSV/PRV,SIV/CSFV/PRRSV三重感染,SIV/PCV-2和SIV/PRRSV二重感染。 展开更多
关键词 猪流感病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病病毒 混合感染
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PRRSV ORF5基因和CSFVE2基因重组真核表达质粒的构建及小鼠免疫试验 被引量:1
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作者 杨柳絮 侯磊 +1 位作者 周宇 张淼涛 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第6期4-9,共6页
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)已知序列设计3对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV ORF5基因和CSFV E2基因,目的基因依次插入真核表达载体pcDNA4.0,经PCR、酶切及测序分析,重组质粒构建成功,并命名为pcDNA4.0-ORF5-E2... 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)已知序列设计3对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV ORF5基因和CSFV E2基因,目的基因依次插入真核表达载体pcDNA4.0,经PCR、酶切及测序分析,重组质粒构建成功,并命名为pcDNA4.0-ORF5-E2。重组质粒回收提纯后,以100μg/只剂量免疫小鼠,免疫3次。三免后10 d采血并制备血清,用间接ELISA检测小鼠血清中PRRSV及CSFV抗体效价。结果显示,所构建的重组质粒能够诱导小鼠产生PRRSV及CSFV抗体。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 ORF5基因 E2基因 真核表达质粒 抗体效价
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百色市猪瘟免疫效果分析及CSFV感染状况调查 被引量:3
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作者 覃勇 赵国山 卢少坤 《广西畜牧兽医》 2010年第6期353-355,共3页
在2006年~2009年期间利用正向间接血凝试验对百色市2036份猪血清中猪瘟免疫抗体进行监测,并对2009年使用猪瘟细胞苗和猪瘟兔源脾淋苗的免疫效果进行分析。结果发现2006年-2009年百色市规模猪场的猪瘟免疫抗体水平高于散养户,散养户... 在2006年~2009年期间利用正向间接血凝试验对百色市2036份猪血清中猪瘟免疫抗体进行监测,并对2009年使用猪瘟细胞苗和猪瘟兔源脾淋苗的免疫效果进行分析。结果发现2006年-2009年百色市规模猪场的猪瘟免疫抗体水平高于散养户,散养户的猪瘟免疫抗体水平呈逐年上升趋势,规模猪场的抗体水平除2008年略有下降外,也呈逐年上升趋势。总体上说猪瘟细胞苗的免疫效果优于猪瘟兔源脾淋疫苗,规模猪场的免疫效果优于散养户。此外,用RT—PCR方法对2006年~2009年间百色市发病猪的病料进行CS-FV检测,结果发现百色市猪的CSFV感染率呈逐年下降趋势。 展开更多
关键词 猪瘟 免疫效果 csfv感染 调查
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PMWS患病猪群中PCV2与CSFV、PPV、PRRSV混合感染的调查
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《养猪》 2007年第3期79-79,共1页
赵浩军等应用套式PCR方法对采自辽宁、河北、河南、湖北、湖南、山东、浙江、福建和广西9个省份的733份临床发病猪肺脏和淋巴结样品进行PCV2检测,然后对鉴定为PCV2阳性的283份病料再分别进行PRRSV、PPV和CSFV的检测,以确定猪群中PCV2... 赵浩军等应用套式PCR方法对采自辽宁、河北、河南、湖北、湖南、山东、浙江、福建和广西9个省份的733份临床发病猪肺脏和淋巴结样品进行PCV2检测,然后对鉴定为PCV2阳性的283份病料再分别进行PRRSV、PPV和CSFV的检测,以确定猪群中PCV2与CSFV、PRRSV和PPV双重感染情况。结果表明,CSFV、PRRSV和PPV阳性样品分别为74份、94份和46份,阳性率分别为26.1%、33.2%和16.3%。 展开更多
关键词 PRRSV csfv PCV2 PPV PMWS 混合感染 猪群 PCR方法
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一步法RT-PCR同时检测CSFV和PRRSV方法的建立及应用 被引量:1
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作者 李圣 郑欢莉 +5 位作者 李红炳 孔令富 张晓敏 钏有科 孙永科 杨玉艾 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期40-44,共5页
猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害云南养猪业的传染病,为了建立一种能快速诊断猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的方法,根据NCBI上已发表的猪瘟病毒(CSFV)保守基因Erns和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因M基因的... 猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害云南养猪业的传染病,为了建立一种能快速诊断猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的方法,根据NCBI上已发表的猪瘟病毒(CSFV)保守基因Erns和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因M基因的核苷酸序列,利用Oligo 6.0设计了2对特异性引物,经过PCR反应条件优化后,建立了CSFV和PRRSV一步法RT-PCR的检测方法。对云南部分地区猪高热病病料检测的结果表明,本方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,为云南猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的快速检测提供了重要的技术支持。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 一步法RT-PCR
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表达CSFV E2蛋白重组AcNPV载体的构建 被引量:2
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作者 胡刚叶 苌生科 +2 位作者 庄金山 白朝勇 张许科 《中国兽药杂志》 2012年第11期1-5,共5页
利用基因重组技术成功构建两株含猪瘟兔化弱毒株E2基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV),重组病毒能够在昆虫细胞中分泌表达CSFV E2蛋白。将重组病毒注射入家蚕蛹内,于注射后第7天收获蚕蛹血淋巴并进行Western-blot鉴定目的蛋... 利用基因重组技术成功构建两株含猪瘟兔化弱毒株E2基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV),重组病毒能够在昆虫细胞中分泌表达CSFV E2蛋白。将重组病毒注射入家蚕蛹内,于注射后第7天收获蚕蛹血淋巴并进行Western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果显示,重组病毒在家蚕蛹中成功表达了CSFV E2蛋白。本研究为进一步开发猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂盒用抗原提供了新的途径。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 ACNPV 蚕蛹
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利用多肽抗原建立同时检测CSFV和PRRSV抗体的胶体金免疫层析方法 被引量:4
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作者 陈善真 林礼锟 +5 位作者 王志花 刘博奇 李中圣 杨洁 王贵平 李其昌 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期1-5,共5页
利用合成多肽作为抗原,建立一种同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的胶体金免疫层析方法。用人工筛选合成的CSFV多肽和PRRSV多肽葡聚糖偶联物作为包被抗原,以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物,羊抗猪Ig... 利用合成多肽作为抗原,建立一种同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的胶体金免疫层析方法。用人工筛选合成的CSFV多肽和PRRSV多肽葡聚糖偶联物作为包被抗原,以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物,羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,建立了同时检测CSFV和PRRSV抗体的胶体金免疫层析方法(GICA)。结果表明,多肽与葡聚糖和生物素的偶联效率较高,分别为84.65%和91.37%;链霉亲和素与胶体金结合最佳pH和最佳标记量分别为8.2μg/mL和30μg/mL。试纸卡灵敏度试验表明,血清1∶80稀释仍可检出,与Idexx ELISA试剂盒检出结果基本一致,特异性良好,不与伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒和细小病毒的阳性血清发生交叉反应。与Idexx ELISA试剂盒平行检测结果表明,CSFV抗体总体符合率为86.36%;PRRSV抗体总体符合率为83.33%。说明利用偶联多肽制备的试纸卡灵敏度高,特异性好,能够同时检测两种病毒抗体,适于基层养殖场使用。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 偶联多肽 胶体金 抗体
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2023年安徽省3种引发猪群繁殖障碍疫病病毒污染情况调查
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作者 沈艳 王维 +8 位作者 何长生 段倩倩 刘畅 刘华 周迎春 王倩 王军 苗文萍 朱良强 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期13-17,共5页
为了解安徽省3种引发猪群繁殖障碍疫病病毒的污染情况,2023年10—11月从安徽省16个市的101个屠宰场和20个无害化处理场收集了2110份猪淋巴结组织样品,采用荧光定量RT-PCR方法,对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、盖塔病... 为了解安徽省3种引发猪群繁殖障碍疫病病毒的污染情况,2023年10—11月从安徽省16个市的101个屠宰场和20个无害化处理场收集了2110份猪淋巴结组织样品,采用荧光定量RT-PCR方法,对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、盖塔病毒(GETV)进行了检测。结果显示:CSFV、PRRSV、GETV的个体阳性率分别为0.19%、5.32%、5.86%,110份PRRSV阳性样品中,42份为类NADC30核酸阳性;屠宰场CSFV、PRRSV、GETV的场点阳性率分别为0.99%、41.58%、39.60%,PRRSV和GETV在皖北、皖南、皖中3个地区均有检出,而CSFV仅在皖南地区检出;无害化处理场CSFV、PRRSV、GETV的场点阳性率分别为10.00%、35.00%、10.00%;屠宰场和无害化处理场单一污染群占比分别为39.60%和25.00%,混合污染群占比分别为20.79%和15.00%。结果说明:安徽省猪瘟防控效果较好,而PRRSV和GETV污染面较广,且存在病原混合污染,类NADC30-PRRSV为安徽省田间流行的优势毒株。建议持续追踪PRRSV变异情况,做好疫苗免疫;加强对蚊、蠓等吸血节肢动物活动区域的消毒灭源工作,防控GETV传播;加大养殖密集地区的猪群疫病监控及调运监管力度。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 盖塔病毒 流行病学调查
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2005-2023年中国猪群中猪瘟病毒流行报告:Meta分析及系统评价
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作者 黄石磊 罗干 +3 位作者 程鹏 牛铮 郭建华 邹宏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2058-2070,共13页
【目的】全面了解中国猪群中猪瘟病毒(CSFV)的流行感染情况,为后期CSFV的流行病学调查提供证据。【方法】本研究在中国知网、万方、维普、PubMed、Web of Science和Science Direct国内外6种主要数据库中检索中国猪群CSFV流行情况的相关... 【目的】全面了解中国猪群中猪瘟病毒(CSFV)的流行感染情况,为后期CSFV的流行病学调查提供证据。【方法】本研究在中国知网、万方、维普、PubMed、Web of Science和Science Direct国内外6种主要数据库中检索中国猪群CSFV流行情况的相关文献,检索时间范围为2005年1月1日-2023年1月1日。通过文献筛选、文献质量评分和CSFV流行率的数据提取,对文献中提取的数据利用StataMP17软件进行Meta分析和系统评价,分析CSFV的整体流行率,利用Meta回归分析和亚组分析CSFV整体流行率的异质性来源和影响因素。【结果】从6种主要数据库中共筛选出55篇CSFV流行情况的相关文献纳入本次Meta分析及系统评价,其中18篇文献被纳为高质量文献,37篇文献纳为中等质量文献。Meta分析结果表明,2005-2023年中国猪群中CSFV的整体流行率为12%(95%CI:0.09~0.15);Meta回归分析和亚组分析结果表明,文献的异质性来源不包括采样时间和猪种类(P>0.05),而影响CSFV流行率的因素包括诊断方法、季节变化、气候因素、海拔高度、纬度因素、经度因素及地区分布(P<0.05)。【结论】本研究从数据上确定了中国猪群中CSFV整体流行情况,其整体流行率不高,流行趋势为地区性的散在流行,以慢性和非典型毒株流行为主。本研究结果对掌握猪群CSFV流行的全局状况和有效防控及猪瘟(CSF)净化有一定的参考意义。 展开更多
关键词 猪瘟病毒(csfv) META分析 系统评价 流行病学
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瘟病毒反向遗传技术的研究进展及应用
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作者 韩鹏 张亮 +2 位作者 王伟 王明成 郭亚男 《中南农业科技》 2024年第7期230-234,共5页
瘟病毒属于黄病毒科(Flaviviridae),核酸为单股正链RNA,基因组长12.3 kb。反向遗传技术是研究病毒蛋白功能的有力工具,已经成为研究瘟病毒属的有效途径。介绍了瘟病毒的基本特征,概述了瘟病毒反向遗传操作技术的建立和发展过程,综述了... 瘟病毒属于黄病毒科(Flaviviridae),核酸为单股正链RNA,基因组长12.3 kb。反向遗传技术是研究病毒蛋白功能的有力工具,已经成为研究瘟病毒属的有效途径。介绍了瘟病毒的基本特征,概述了瘟病毒反向遗传操作技术的建立和发展过程,综述了牛病毒腹泻病毒(BVDV)、猪瘟病毒(CSFV)及其他瘟病毒反向遗传操作系统的构建以及应用该技术取得的一些研究成果,并对该技术在瘟病毒研究领域的发展方向进行了展望,以期为瘟病毒属编码的蛋白质的功能、致病机制以及新型疫苗研发开辟新思路。 展开更多
关键词 瘟病毒 反向遗传技术 牛病毒腹泻病毒(BVDV) 猪瘟病毒(csfv) 病毒基因组
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猪繁殖障碍病毒性疫病六重PCR检测方法的建立及应用 被引量:30
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作者 刘志杰 曾智勇 +3 位作者 汤德元 周莉 梁海英 肖超能 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1429-1436,共8页
参照GenBank中相关的基因序列,设计了6对引物分别用于扩增PRV gE、PPV NS1、PCV ORF2、PRRSV ORF7、CSFVE2、JEVE基因的部分片段。敏感性和特异性试验结果表明,该mPCR对6种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 6.6pg、PPV 96pg、PCV 12.9pg、... 参照GenBank中相关的基因序列,设计了6对引物分别用于扩增PRV gE、PPV NS1、PCV ORF2、PRRSV ORF7、CSFVE2、JEVE基因的部分片段。敏感性和特异性试验结果表明,该mPCR对6种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 6.6pg、PPV 96pg、PCV 12.9pg、PRRSV 10.5pg、CSFV 51pg、JEV 46pg,对猪流感病毒(SIV)、大肠杆菌(E.coli)的扩增结果均为阴性。103份临床病料检测结果表明,上述6种猪病毒性疫病在贵州省猪群中普遍存在且混合感染情况严重。该六重PCR方法不仅实现了上述6种病毒的同时检测,更实现了DNA病毒及RNA病毒的同步检测,能够对PRV、PPV、PCV、PRRSV、CSFV、JEV单个或混合感染的临床病料进行快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 PRV PPV PCV2 PRRSV csfv JEV 多重PCR
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