环指蛋白13通过稳定铁蛋白重链1减轻脑缺血再灌注损伤后神经元铁死亡

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作者 李爽 王强平 +5 位作者 周文科 郑保平 刘强 李震东 张方成 王海均 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期459-464,共6页

目的探讨环指蛋白13(ring finger protein 13,RNF13)在脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)中对神经元铁死亡的调控作用及分子机制。方法以小鼠大脑中动脉栓塞术和原代神经元氧糖剥夺再复氧处理建立疾病模型,... 目的探讨环指蛋白13(ring finger protein 13,RNF13)在脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)中对神经元铁死亡的调控作用及分子机制。方法以小鼠大脑中动脉栓塞术和原代神经元氧糖剥夺再复氧处理建立疾病模型,使用CRISPR/Cas9基因敲除技术、免疫组化染色、免疫荧光染色、Westen blot和脂质过氧化检测等方法评估RNF13在CIRI中对铁死亡的调控作用及分子机制。两样本均数比较采用t检验,多样本均数比较采用单因素方差分析。结果小鼠和原代神经元造模后,RNF13蛋白水平均高于对照组(均P<0.05)。敲除RNF13通过下调铁蛋白重链1(ferritinheavychain1,Fth1)和铁蛋白轻链(ferritin light chain,Ftl)(均P<0.05)促进小鼠脑组织中的游离亚铁离子含量和脂质过氧化物累积(均P<0.01),促进铁死亡,最终导致神经功能缺损(P<0.01)。结论RNF13减轻CIRI后的神经元铁死亡,该作用依赖于Fthl。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注损伤 铁死亡 环指蛋白13 神经元 铁蛋白

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青风藤汤辅助治疗类风湿关节炎对患者CXCL13、MIP-1α的变化研究

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作者 姚瑶 周萍 +1 位作者 骆飞 王燕 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第11期230-233,共4页

目的研究青风藤汤辅助治疗类风湿关节炎对患者CXC趋化因子配体13(Chemokine ligand 13,CXCL13)、巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)的变化影响。方法选取类风湿关节炎患者78例,采用随机数字法分为两组... 目的研究青风藤汤辅助治疗类风湿关节炎对患者CXC趋化因子配体13(Chemokine ligand 13,CXCL13)、巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)的变化影响。方法选取类风湿关节炎患者78例,采用随机数字法分为两组。甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤片治疗,青风藤汤组加用青风藤汤辅助治疗,分析两组的治疗效果。结果两组治疗前晨僵时间、双手握力、关节压痛个数及20 m步行时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组晨僵时间、关节压痛个数、20 m步行时间均降低,青风藤汤组治疗后晨僵时间、关节压痛个数、20 m步行时间均低于甲氨蝶呤组(P<0.05)。两组双手握力升高,青风藤汤组治疗后双手握力高于甲氨蝶呤组(P<0.05)。两组治疗前CXCL13、MIP-1α、血沉(Erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞介素比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组白细胞介素-21(Interleukin-21,IL-21)、CXCL13、ESR、白细胞介素-27(Interleukin-27,IL-27)、MIP-1α、白细胞介素-32(Interleukin-32,IL-32)均降低,青风藤汤组治疗后均低于甲氨蝶呤组(P<0.05)。两组治疗前DAS28评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,两组DAS28评分均降低,青风藤汤组治疗后均低于甲氨蝶呤组(P<0.05)。结论青风藤汤辅助治疗类风湿关节炎可抑制CXCL13、MIP-1α、ESR的表达水平,减轻炎症反应,降低疾病活动度,缓解临床症状。 展开更多

关键词 青风藤汤 类风湿关节炎 CXC趋化因子配体13 巨噬细胞炎性蛋白1Α 炎症因子

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应用蛋白质芯片检测骨性关节炎患者基质金属蛋白酶-13的初步研究 被引量：11

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作者 班吉鹤 周利武 +3 位作者 毛广平 郭亭 唐祖明 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 2008年第8期836-838,844,I0002,共5页

目的:探讨应用蛋白质芯片技术检测骨性关节炎(OA)患者关节液和血清中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的方法。方法:应用低密度蛋白质芯片方法同时检测32例OA患者关节液和血清中MMP-13表达水平,24例正常关节作为对照组,进行蛋白质芯片荧光强... 目的:探讨应用蛋白质芯片技术检测骨性关节炎(OA)患者关节液和血清中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的方法。方法:应用低密度蛋白质芯片方法同时检测32例OA患者关节液和血清中MMP-13表达水平,24例正常关节作为对照组,进行蛋白质芯片荧光强度的对比研究。结果:OA患者关节液和血清中的MMP-13在蛋白质芯片上的荧光强度明显高于对照组关节液的荧光强度(P<0.001)。OA患者关节液中MMP-13在蛋白质芯片上的荧光强度明显高于其血清的荧光强度(P<0.001)。结论:OA患者关节液和血清中MMP-13表达明显高于对照组。应用低密度的蛋白质芯片技术检测OA患者关节液及血清中MMP-13的水平具有一定临床应用价值。 展开更多

关键词 蛋白质芯片 骨性关节炎 基质金属蛋白酶-13

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急性脑梗死患者不同时期Apelin-13及应激相关蛋白水平的变化及其与预后的关系研究 被引量：17

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作者 张学敏 唐建国 +2 位作者 谢娟 陆刚 张羽 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期2302-2306,共5页

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者不同时期Apelin-13和应激相关蛋白热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)水平的变化及其与预后的相关性。方法选取2013年1月—2014年12月在复旦大学附属上海市第五人民医院确诊为ACI的患者50例作为ACI组,... 目的探讨急性脑梗死(ACI)患者不同时期Apelin-13和应激相关蛋白热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)水平的变化及其与预后的相关性。方法选取2013年1月—2014年12月在复旦大学附属上海市第五人民医院确诊为ACI的患者50例作为ACI组,另选取同期在本院体检正常者40例作为对照组。采集两组受试者血液,并检测对照组和ACI组发病第1、3、7、14、21、30天Apelin-13、HSP-70、β-EP水平。ACI患者根据改良Rankin分级法评估预后,分为预后好(n=28)、一般(n=15)、差(n=7),并比较不同预后患者发病第1天的Apelin-13、HSP-70、β-EP水平、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、美国国立卫生研究所卒中量表(NHISS)评分、洼田饮水试验分级。结果对照组、ACI组不同时期Apelin-13、HSP-70水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),β-EP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);其中ACI组第1天Apelin-13水平低于对照组,ACI组第14、21、30天Apelin-13水平高于ACI组第1天(P<0.05);ACI组第1、3天HSP-70水平高于对照组,ACI组第3、7、14、21、30天HSP-70水平低于ACI组第1天(P<0.05)。ACI患者Apelin-13与HSP-70呈直线负相关(r=-0.909,P=0.012),Apelin-13与β-EP无直线相关性(r=-0.172,P=0.744),HSP-70与β-EP无直线相关性(r=0.121,P=0.820)。不同预后ACI患者β-EP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同预后ACI患者Apelin-13、HSP-70水平、GCS评分、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中预后差者Apelin-13水平、GCS评分均低于预后好和预后一般者,HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好和预后一般者(P<0.05);预后一般者GCS评分低于预后好者,APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好者(P<0.05)。结论Apelin-13水平在ACI发病第1天降低,随ACI病程逐渐升高;HSP-70水平在ACI发病第1天升高,随ACI病程逐渐下降。预后差的ACI患者发病第1天的Apelin-13水平、GCS评分低于预后一般和预后好者,而HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后一般和预后好者,可以根据这些指标的变化判断ACI患者预后。 展开更多

关键词 脑梗死 APELIN-13 HSP70热休克蛋白质类 Β内啡肽 预后

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广适高产高蛋白大豆品种中黄13的选育与应用 被引量：20

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作者 王连铮 孙君明 +2 位作者 王岚 李斌 赵荣娟 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-6,共6页

中黄13是中国农业科学院作物科学研究所大豆高产优质育种团队历经20多年育成的广适高产高蛋白大豆品种。该品种以豫豆8号为母本,中90052-76为父本,经有性杂交利用系谱法选育而成,原品系号为中作975。该品种主要技术特点:一是适应性广。... 中黄13是中国农业科学院作物科学研究所大豆高产优质育种团队历经20多年育成的广适高产高蛋白大豆品种。该品种以豫豆8号为母本,中90052-76为父本,经有性杂交利用系谱法选育而成,原品系号为中作975。该品种主要技术特点:一是适应性广。先后通过国家以及安徽、河南、湖北、陕西、山西、北京、天津、辽宁、四川9个省市审定,适宜种植区域N29°～42°,跨3个生态区13个纬度,是迄今国内纬度跨度最大、适应范围最广的大豆品种。中黄13光周期钝感,蓝光受体基因(Gm CRY1a)研究结果揭示了其适应性广的分子机理。二是高产。在山西省襄垣县创4 686 kg·hm-2的大豆高产记录,在推广面积最大的安徽省区试平均产量3 041 kg·hm-2,增产16. 0%,全部25个试点均增产,产量列参试品种首位。三是优质。蛋白质含量高达45. 8%,百粒重24～26 g,商品品质好。四是多抗。抗倒伏,耐涝,抗花叶病毒病,中抗胞囊线虫病。采用良种良法相结合实现了中黄13大面积推广应用,自2007年以来已连续9年位居全国大豆年种植面积首位;截止2018年,累计推广面积超1亿亩。2009年获国家自主创新产品证书,2010年获第十二届中国国际高新技术交易会优秀产品奖,2010年获北京市科学技术一等奖,2012年获国家科技进步一等奖。2006年授权中国植物新品种权,2008年授权韩国植物新品种权。 展开更多

关键词 大豆 中黄13 广适 高产 高蛋白 选育 应用

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孕妇血清胎盘蛋白13水平变化对早发型重度子痫前期的预测价值 被引量：5

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作者 王晨虹 涂新枝 +2 位作者 周璐 欧阳淑媛 苏海燕 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期781-783,共3页

目的:探讨妊娠早期孕妇血清胎盘蛋白13(PP13)水平变化对早发型重度子痫前期(ESPE)的预测价值。方法:在妊娠10～13周采用全自动时间荧光免疫分辨技术检测7例ESPE患者和35例正常孕妇血清PP13水平。结果:血清PP13水平以中位数倍数(MoM)表示... 目的:探讨妊娠早期孕妇血清胎盘蛋白13(PP13)水平变化对早发型重度子痫前期(ESPE)的预测价值。方法:在妊娠10～13周采用全自动时间荧光免疫分辨技术检测7例ESPE患者和35例正常孕妇血清PP13水平。结果:血清PP13水平以中位数倍数(MoM)表示,ESPE孕妇血清PP13明显低于正常对照组(0.52MoMvs1.00MoM,P<0.05)。PP13水平以0.72MoM为切割值,曲线下面积为92.2%,早期预测ESPE的灵敏度为100%,特异度为77.1%。结论:妊娠早期血清PP13是预测ESPE的理想标志物。 展开更多

关键词 胎盘蛋白13 早发型重度子痫前期 灵敏度 特异度

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13-氢过氧化-顺-9,反-11-十八碳二烯酸氧化修饰对大豆蛋白凝胶性质的影响 被引量：5

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作者 吴伟 林亲录 华欲飞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期42-46,共5页

以13-氢过氧化-顺-9,反-11-十八碳二烯酸(HPODE)代表脂质氢过氧化物,研究脂质氢过氧化物氧化修饰对大豆蛋白凝胶性质的影响,采用质构仪、流变仪、持水性测定以及扫描电镜等方法表征大豆蛋白的凝胶性质。结果发现:蛋白质氧化造成大豆蛋... 以13-氢过氧化-顺-9,反-11-十八碳二烯酸(HPODE)代表脂质氢过氧化物,研究脂质氢过氧化物氧化修饰对大豆蛋白凝胶性质的影响,采用质构仪、流变仪、持水性测定以及扫描电镜等方法表征大豆蛋白的凝胶性质。结果发现:蛋白质氧化造成大豆蛋白的凝胶硬度、凝胶形成温度、凝胶强度以及凝胶持水性,随着大豆蛋白氧化程度的增加,大豆蛋白凝胶的粗糙度增加,内部空隙变大,并且分布不均匀。蛋白质氧化对大豆蛋白凝胶性质的影响与HPODE浓度有关,当HPODE浓度低于0.1mmol/L时,蛋白质氧化对大豆蛋白凝胶性质的影响很小,可以忽略。 展开更多

关键词 13-氢过氧化-顺-9 反-11-十八碳二烯酸 大豆蛋白 蛋白质氧化 凝胶

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新疆无苞芥类钙调素蛋白基因OpCML13的克隆与分析 被引量：9

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作者 赵云霞 魏艳玲 黄先忠 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期431-437,共7页

通过对无苞芥幼苗cDNA文库的随机克隆测序分析，获得1条与拟南芥编码类钙调素13（calmodulin-likel3，CMLl3）高度相似的EST（GenBank登录号为JZl52285）。利用RT-PCR技术从无苞芥cDNA中克隆了该基因，命名为OpCMLl3，该基因开放阅读框... 通过对无苞芥幼苗cDNA文库的随机克隆测序分析，获得1条与拟南芥编码类钙调素13（calmodulin-likel3，CMLl3）高度相似的EST（GenBank登录号为JZl52285）。利用RT-PCR技术从无苞芥cDNA中克隆了该基因，命名为OpCMLl3，该基因开放阅读框（ORF）为447bp，编码148个氨基酸。生物信息学分析表明，OpCMLl3蛋白的二级结构含有4个ca^2＋结合基序（EF-hands）结构，是一个亲水蛋白，无信号肽，无跨膜区域，为非跨膜蛋白；同源建模发现该蛋白包含8个α-螺旋结构和10个β-转角。系统进化树分析表明，OpCMLl3编码产物与拟南芥AtCMLl3和AtCMI。14进化关系较近，属于同一进化分支。半定量RTPCR结果显示，OpCMLl3基因在无苞芥的不同组织中都有表达，在根中表达量最高；高盐胁迫处理6～24h，OpCMLl3基因的表达明显增强，随后逐渐恢复正常表达水平；低温、干旱和ABA处理6h后基因表达明显上调，并且一直保持较高的表达水平。研究表明，OpCMLl3基因在无苞芥逆境胁迫中可能起着重要作用。 展开更多

关键词 无苞芥 类钙调素蛋白13 基因表达 抗逆

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白介素13通过FOXA2调控气道上皮细胞粘液分泌 被引量：10

9

作者 江德鹏 Victor P.Kolosov +1 位作者 Juliy M.Perelman 周向东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期99-102,共4页

目的:研究白介素13(Interleukin-13,IL-13)对气道上皮细胞粘液分泌的效应并探讨其作用机制。方法:HBE16细胞在无血清培养基中培养24小时后加入IL-13刺激24小时,ELISA检测粘蛋白(MUC)5AC的表达;Western检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(E... 目的:研究白介素13(Interleukin-13,IL-13)对气道上皮细胞粘液分泌的效应并探讨其作用机制。方法:HBE16细胞在无血清培养基中培养24小时后加入IL-13刺激24小时,ELISA检测粘蛋白(MUC)5AC的表达;Western检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(Extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)和磷酸化c-Jun氨基端激酶1/2(c-Jun N-terminal kinase 1/2,JNK1/2的表达;使用SP600125阻滞JNK信号通路后检测MUC5AC蛋白表达;RT-PCR检测STAT4和STAT6的表达变化;EMSA检测通路下游核蛋白FOXA2的表达。结果:IL-13刺激24小时后MUC5AC和p-JNK1/2表达升高,而p-ERK1/2表达无显著变化;使用SP600125阻断JNK通路表达后,MUC5AC表达减弱;IL-13刺激后STAT4表达无显著变化,STAT6表达显著升高,FOXA2表达显著降低。结论:IL-13通过JNK-STAT6-FOXA2通路调控粘液分泌。 展开更多

关键词 白介素13 C-JUN氨基端激酶 FOXA2蛋白 粘液

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儿童支气管哮喘96例血清IL-13的研究 被引量：3

10

作者 孙海平 郭锡熔 +1 位作者 陈吉庆 陈荣华 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期382-383,共2页

目的:探讨血清IL-13水平与儿童哮喘的关系。方法:用ELISA法检测血清IL-13、总IgE水平,采用荧光酶联免疫法测定嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平,同时计数外周血嗜酸性粒细胞(EOS),并对检测结果进行统计学处理。结果:哮喘组患儿血IL-13... 目的:探讨血清IL-13水平与儿童哮喘的关系。方法:用ELISA法检测血清IL-13、总IgE水平,采用荧光酶联免疫法测定嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平,同时计数外周血嗜酸性粒细胞(EOS),并对检测结果进行统计学处理。结果:哮喘组患儿血IL-13水平与正常对照组比较差异有显著性(P<0.001),哮喘组血IL-13水平与ECP、总IgE及EOS计数均呈正相关。结论:血IL-13水平与儿童哮喘发病间可能存在着密切的关系。 展开更多

关键词 白细胞介素-13 支气管哮喘 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 IGE 嗜酸性粒细胞 儿童

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花生MAPK13基因的克隆及表达分析研究 被引量：6

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作者 梁丹 张朝昕 +8 位作者 王冕 吴正锋 陈娜 潘丽娟 王通 陈明娜 杨珍 禹山林 迟晓元 《花生学报》 北大核心 2019年第2期10-18,共9页

为了挖掘花生抗果腐病相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,从花生果腐病转录组文库中筛选出促丝裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)基因编码区序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到AhMAPK 13基因°结果表明AhMAPK 13基因序列全长18... 为了挖掘花生抗果腐病相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,从花生果腐病转录组文库中筛选出促丝裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)基因编码区序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到AhMAPK 13基因°结果表明AhMAPK 13基因序列全长1818 bp,含有/非编码区593 bp,5非编码区122 bp,开放阅读框全长1104 bp,编码1条含有368个氨基酸的蛋白序列。预测其分子量为42. 5kDa,含有MAPK家族典型的11个结构域,属于MAPK基因家族B组成员。亚细胞定位显示AhMAPK13定位于细胞质和细胞核中° RT-qPCR分析发现AhMAPK 13基因在茎中表达量高于其他组织,说明该基因具有组织表达特异性;AhMAPK 13基因受干旱、低温、NaCl(ABA诱导时表达量上升,说明该基因可能广泛参与植物非生物胁迫响应过程;AhMAPK 13基因受JA、GA、ET、SA诱导时表达量上调,说明该基因可能参与到这些激素介导的抗逆信号转导途径。本研究结果为花生抗果腐病育种研究提供了新的基因资源。 展开更多

关键词 花生 促丝裂原蛋白活化激酶基因13 基因克隆 表达分析 亚细胞定位

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HMGB1促进类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞表达基质金属蛋白酶-13 被引量：6

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作者 贺琤雯 戴生明 +1 位作者 秦阳华 沈茜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1097-1100,共4页

目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)能否激活类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)表达基质金属蛋白酶-13(MMP-13)。方法:HMGB1与RASF共孵育后,采用流式细胞术、实时RT-PCR、ELISA分别检测细胞周期和MMP-13的基因表达量以及蛋白表达水平。... 目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)能否激活类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)表达基质金属蛋白酶-13(MMP-13)。方法:HMGB1与RASF共孵育后,采用流式细胞术、实时RT-PCR、ELISA分别检测细胞周期和MMP-13的基因表达量以及蛋白表达水平。结果:1μg/ml HMGB1刺激滑膜成纤维细胞3小时,MMP-13 mRNA的表达明显增加;HMGB1刺激滑膜成纤维细胞48小时后MMP-13蛋白分泌增高,并且滑膜成纤维细胞增殖周期速度加快。结论:HMGB1可以激活滑膜成纤维细胞,使其增殖周期速度加快,MMP-13表达增加,提示HMGB1通过作用于滑膜成纤维细胞表达MMP-13加强关节结构破坏。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎 高迁移率族蛋白1 滑膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶-13

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牛乳状瘤病毒13型pEGFP-E5-N1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达 被引量：1

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作者 庞峰 史巧芸 +7 位作者 朱华培 徐开莲 赵天靖 李亚颖 彭冬梅 李国华 周海龙 王凤阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期1088-1092,共5页

基于海口市动物基因工程重点实验室获得的牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)基因组序列信息(GenBank登录号:KM258443.2),以基因组为模板,扩增E5基因片段,将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-E5-N1,测序正确后瞬时转染HEK293细胞,应用荧光... 基于海口市动物基因工程重点实验室获得的牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)基因组序列信息(GenBank登录号:KM258443.2),以基因组为模板,扩增E5基因片段,将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-E5-N1,测序正确后瞬时转染HEK293细胞,应用荧光显微镜、流式细胞仪、Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果显示,E5片段大小为135bp;重组质粒pEGFP-E5-N1构建正确;荧光显微镜下观察转染重组质粒pEGFP-E5-N1的HEK293细胞,可见明亮的绿色荧光;流式细胞术分析结果显示,转染重组质粒pEGFP-E5-N1 48h后,约55.59%的细胞表达绿色荧光蛋白;Western blotting结果表明,表达的融合蛋白大小约为32ku。本试验结果为下一步研究E5基因的作用机理奠定了基础。 展开更多

关键词 牛乳状瘤病毒13型(BPV-13) E5 EGFP 融合蛋白 真核表达

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白细胞介素-13刺激大鼠气道黏液高分泌的分子机制 被引量：2

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作者 江德鹏 Victor P Kolosov +1 位作者 Juliy M Perelman 周向东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期73-76,共4页

目的研究白细胞介素-13(IL-13)在体内对支气管/肺黏液分泌的作用并探讨其作用机制。方法所有SD大鼠被随机分为IL-13组、对照组和IL-13 plus SP600125组。Western检测大鼠支气管/肺组织黏蛋白(MUC)5AC,磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK... 目的研究白细胞介素-13(IL-13)在体内对支气管/肺黏液分泌的作用并探讨其作用机制。方法所有SD大鼠被随机分为IL-13组、对照组和IL-13 plus SP600125组。Western检测大鼠支气管/肺组织黏蛋白(MUC)5AC,磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和磷酸化c-Jun氨基端激酶1/2(p-JNK1/2)的表达变化,RT-PCR检测大鼠支气管/肺组织STAT4和STAT6 mRNA表达水平。EMSA检测通路下游作用因子FOXA2和激活蛋白1的表达。结果同对照组相比,IL-13刺激10 h后大鼠支气管/肺组织MUC5AC和p-JNK1/2表达升高,而p-ERK1/2表达无显著变化;使用SP600125阻断JNK通路表达后,MUC5AC表达减弱;IL-13刺激10 h后大鼠支气管/肺组织STAT4 mRNA表达无显著变化,STAT6 mRNA表达显著升高,EMSA提示IL-13刺激后大鼠支气管/肺组织FOXA2结合活性显著降低,而激活蛋白1结合活性没有明显变化。结论 IL-13能够刺激大鼠支气管/肺组织黏液分泌,其作用机制可能是通过调控STAT6-FOXA2信号通路。 展开更多

关键词 白细胞介素-13 STAT6 FOXA2蛋白 黏液

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热疗对人Tca8113细胞侵袭能力及基质金属蛋白酶-13和钙离子结合蛋白S100A4表达的抑制作用 被引量：2

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作者 何丽明 边莉 +1 位作者 唐睿珠 何永文 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期655-659,共5页

目的研究热疗对Tca8113细胞的侵袭能力及侵袭转移相关蛋白——基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及钙离子结合蛋白S100A4(S100A4)表达的影响。方法 Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,用体外侵袭实验... 目的研究热疗对Tca8113细胞的侵袭能力及侵袭转移相关蛋白——基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及钙离子结合蛋白S100A4(S100A4)表达的影响。方法 Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,用体外侵袭实验评价各组细胞的侵袭能力;Tca8113细胞爬片经43℃分别加热0、40、80、120 min,用免疫细胞化学染色法检测各组细胞MMP-13及S100A4的表达变化;Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,Western blot法检测各组细胞MMP-13及S100A4的表达变化。结果随加热时间延长或加热温度升高,Tca8113细胞侵袭率(即侵袭细胞数占全部细胞的百分比)依次递减,除43℃加热40、80 min组之间及41、43℃加热80 min组之间的差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05);随着加热时间延长,Tca8113细胞的细胞浆内MMP-13及S100A4的表达强度呈现递减趋势;随着加热时间延长或加热温度升高,Tca8113细胞的MMP-13及S100A4含量逐渐降低,除43℃加热40、80 min组之间及41、43℃加热80 min组之间外,其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论热疗能抑制Tca8113细胞的侵袭能力,其机制可能与热疗抑制了细胞内MMP-13及S100A4的表达有关。 展开更多

关键词 热疗 TCA8113细胞 侵袭 基质金属蛋白酶-13 钙离子结合蛋白S100A4

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miR-92a-3p靶向同源盒蛋白13对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响 被引量：2

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作者 苏珊珊 刘慧 +1 位作者 修方睿 王冬燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第24期3037-3042,共6页

目的探讨miR-92a-3p靶向同源盒蛋白13(Homeobox protein 13,HOXA13)对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响及其作用机制。方法实验分组:对照组、高糖组、anti-miR-NC+高糖组、antimiR-92a-3p+高糖组、pcDNA+高糖组、pcDNA-HOXA13+高糖组... 目的探讨miR-92a-3p靶向同源盒蛋白13(Homeobox protein 13,HOXA13)对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响及其作用机制。方法实验分组:对照组、高糖组、anti-miR-NC+高糖组、antimiR-92a-3p+高糖组、pcDNA+高糖组、pcDNA-HOXA13+高糖组、anti-miR-92a-3p+si-NC+高糖组、anti-miR-92a-3p+si-HOXA13+高糖组;qRT-PCR法与Western blot法分别检测miR-92a-3p、HOXA13的表达量;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测miR-92a-3p与HOXA13的靶向关系;Western blot法检测Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-12蛋白表达量。结果与对照组比较,高糖组miR-92a-3p的表达量升高(P<0.05),HOXA13 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-12蛋白水平升高(P<0.05);转染anti-miR-92a-3p或转染pcDNA-HOXA13后,细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-12蛋白水平降低(P<0.05);HOXA13是miR-92a-3p的靶基因;共转染anti-miR-92a-3p和si-HOXA13可减弱anti-miR-92a-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论敲低miR-92a-3p可通过靶向调控HOXA13表达抑制细胞凋亡从而减轻高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤。 展开更多

关键词 肾小球系膜细胞 miR-92a-3p 同源盒蛋白13 细胞凋亡 高糖

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重组CD_(13)单链抗体和蝎毒素多肽AGAP融合蛋白真核表达及对NB4细胞的靶向杀伤作用 被引量：1

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作者 倪吴花 骆超 +1 位作者 俞康 吴建波 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第11期1231-1236,共6页

目的:本研究应用基因工程技术方法,构建含重组编码CD13单链抗体和蝎毒素镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic antitumoral peptide,AGAP)融合蛋白基因的表达载体,并研究CD13-AGAP融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4影响。方法:克隆东亚钳蝎活性... 目的:本研究应用基因工程技术方法,构建含重组编码CD13单链抗体和蝎毒素镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic antitumoral peptide,AGAP)融合蛋白基因的表达载体,并研究CD13-AGAP融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4影响。方法:克隆东亚钳蝎活性肽AGAP的基因,插入真核表达载体pSecTag2/CD13/RFP,得到pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体。酶切及测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染293T细胞,通过RT-PCR和免疫印迹方法检测融合基因和蛋白的表达。纯化融合蛋白,作用NB4细胞,CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期。结果:酶切及测序结果证实pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体构建成功,转染293T细胞后,RT-PCR和免疫印迹方法结果证实重组质粒得到有效表达,并纯化真核表达融合蛋白CD13-AGAP对血液肿瘤CD13阳性白血病细胞NB4有一定的生长抑制作用,并且使细胞周期G1期阻滞,S期减少。结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pSecTag2/CD13/AGAP,并在293T细胞中成功表达,进一步证实融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4有杀伤作用。 展开更多

关键词 东亚钳蝎 蝎毒活性肽 抗肿瘤缬精甘肽 CD_(13)单链抗体 融合蛋白

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血栓调节蛋白和胎盘蛋白13与子痫前期的相关性分析

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作者 程彦君 凌少云 吴雪琴 《海南医学院学报》 CAS 2012年第2期232-234,共3页

目的:探讨子痫前期患者血栓调节蛋白(TM)和胎盘蛋白13(PP13)水平变化与子痫前期的相关性。方法:选择子痫前期患者64例作为研究对象,根据患者疾病程度分为轻度子痫前期组28例,重度子痫前期组36例。随机选择我院正常妊娠妇女30例作为对照... 目的:探讨子痫前期患者血栓调节蛋白(TM)和胎盘蛋白13(PP13)水平变化与子痫前期的相关性。方法:选择子痫前期患者64例作为研究对象,根据患者疾病程度分为轻度子痫前期组28例,重度子痫前期组36例。随机选择我院正常妊娠妇女30例作为对照组。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定3组患者外周血血清TM与PP13水平。结果:(1)轻度子痫前期组、重度子痫前期组妇女血清中TM、PP13水平显著高于对照组妇女(P<0.05)。(2)重度子痫前期组妇女血清中TM、PP13水平显著高于轻度子痫前期组妇女(P<0.05)。结论:子痫前期患者血清中TM、PP13水平异常表达,并随患者病情的严重程度而升高,说明血栓调节蛋白和胎盘蛋白13可能参与子痫前期的发生与发展。 展开更多

关键词 子痫前期 血栓调节蛋白 胎盘蛋白13

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BMP-13在C_3H10T_(1/2)干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用 被引量：4

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作者 韦皓 陈沅 +1 位作者 沈彪 赵璐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期813-817,共5页

目的研究骨形态形成蛋白-13(bone morphogenetic proteins-13,BMP-13)促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用。方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后,利用Western blot以及免疫荧光... 目的研究骨形态形成蛋白-13(bone morphogenetic proteins-13,BMP-13)促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用。方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后,利用Western blot以及免疫荧光技术于1、2、3周时分别检测C3H10T1/2干细胞心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达变化;同时以实时荧光定量PCR技术进行心肌分化特异性基因GATA4、MEF2C的检测,4周后应用电子显微镜观察干细胞超微结构变化。结果 C3H10T1/2干细胞经pAdEasy-BMP-13感染诱导后,细胞开始伸展,折光性增强,细胞间连接较紧密且细胞排列趋向一致;pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞于3周时,Western blot技术检测出心肌特异性肌钙蛋白(cardiac isoform of tropnin T,cTnT)、连接蛋白Cx43(connexin 43,Cx43)(P<0.05),免疫荧光检测有蛋白α-MHC、α-actin表达,而于1周和2周时未检测出。同时pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞1、2周和3周均未发现有心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达。3周对各组均出现心脏早期发育特异性基因GATA4、MEF2C的表达,但pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞表达量明显高于pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞(P<0.05);pAdEasy-BMP-13感染后细胞于4周时透射电镜下观察出现闰盘及肌丝样细胞超微结构,而pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞没有出现类似结构。结论 pAdEasy-BMP-13可以诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化。 展开更多

关键词 BMP-13 C3H10T1/2干细胞 心肌细胞

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薄荷醇增强白介素-13诱导的人支气管上皮细胞粘液蛋白5AC的合成与分泌 被引量：5

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作者 张明洋 王静 李敏超 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1432-1438,共7页

目的研究白细胞介素-13(IL-13)联合薄荷醇对人支气管上皮细胞(16HBE)黏液蛋白(MUC)5AC合成及分泌的影响,并探索瞬时受体电位通道(TRP)melastatin 8(TRPM8)和抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在此环节中所起的作用。方法将16HBE细胞分为:... 目的研究白细胞介素-13(IL-13)联合薄荷醇对人支气管上皮细胞(16HBE)黏液蛋白(MUC)5AC合成及分泌的影响,并探索瞬时受体电位通道(TRP)melastatin 8(TRPM8)和抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在此环节中所起的作用。方法将16HBE细胞分为:对照组、IL-13组(培养基加入终浓度10 ng/mL的IL-13连续刺激)、薄荷醇组(于第6天加入1 mmol/L薄荷醇刺激)、IL-13+薄荷醇组(IL-13连续刺激6 d后加入1 mmol/L薄荷醇刺激),观察各组MUC5AC表达量、胞内Ca2+浓度和Bcl-2表达;予以Bcl-2抑制剂ABT-263、TRPM8离子通道特异性抑制剂BCTC干预,观察两者对各组MUC5AC的影响及BCTC对胞内Ca2+浓度、Bcl-2表达的影响。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测各组细胞内Ca2+荧光强度,实时荧光定量PCR检测MUC5AC及Bcl-2mRNA水平,酶联免疫吸附法检测培养液中MUC5AC含量。结果IL-13组、薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组MUC5AC mRNA和蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.05),且IL-13+薄荷醇组最高并于24 h达到最高峰(P<0.01);薄荷醇组、IL-13组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2mRNA表达均明显高于对照组(P<0.05),且IL-13+薄荷醇组最高(P<0.01);予以BCTC干预后,薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2mRNA、MUC5AC mRNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组(P<0.05),而IL-13组未发生明显变化(P>0.05);予以ABT-263干预后,各ABT-263干预组MUC5ACmRNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组(P<0.05)。结论IL-13联合薄荷醇对于16HBE细胞MUC5AC的合成及分泌产生协同效应,其机制可能与TRPM8受体诱导的Bcl-2协同性增强有关。 展开更多

关键词 支气管哮喘 白细胞介素-13 薄荷醇 黏液蛋白5AC 抗凋亡蛋白 瞬时受体电位melastatin 8

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