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含第一内含子猪生长激素cDNA基因在COS7细胞中的表达
被引量：
5
1
作者
李秀锦
仲飞
齐顺章
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期49-53,共5页
以CMV真核生物启动子构建了含第一内含子猪生长激素(pGH)cDNA基因(pGHcDNA in)的表达载体,经DEAE 葡聚糖介导在COS7细胞进行了瞬时表达,通过PP95生物学测定法测定,证明含第一内含子pGHcDNA基因能够在真核细胞中进行分泌性表达,表达出的...
以CMV真核生物启动子构建了含第一内含子猪生长激素(pGH)cDNA基因(pGHcDNA in)的表达载体,经DEAE 葡聚糖介导在COS7细胞进行了瞬时表达,通过PP95生物学测定法测定,证明含第一内含子pGHcDNA基因能够在真核细胞中进行分泌性表达,表达出的pGH具有生物学活性。这说明通过该基因转录出的前体mR NA能够在COS7细胞中进行正确剪接,从而翻译出具有生物活性的pGH。加入第一内含子在一定程度上可提高pGHcDNA基因的表达效率。
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关键词
第一内含子
生长激素
猪
CDNA基因
cos7细胞
表达
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职称材料
小鼠ACE2基因的克隆和体外表达以及序列分析与组织分布
被引量：
4
2
作者
谢旭东
陈君柱
+5 位作者
王兴祥
朱建华
孙坚
陶明
尚云鹏
郭晓纲
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2005年第1期48-54,共7页
目的 :深入研究血管紧张素转化酶 2 (angiotensin- converting enzyme2 ,ACE2 )在心血管疾病发病机理中的作用及在高血压基因治疗中的应用 ,克隆和体外表达小鼠 ACE2基因 ,并进行核苷酸和氨基酸序列分析和组织分布特征研究。方法 :采用 ...
目的 :深入研究血管紧张素转化酶 2 (angiotensin- converting enzyme2 ,ACE2 )在心血管疾病发病机理中的作用及在高血压基因治疗中的应用 ,克隆和体外表达小鼠 ACE2基因 ,并进行核苷酸和氨基酸序列分析和组织分布特征研究。方法 :采用 RT- PCR方法 ,从小鼠肾组织中扩增出 ACE2基因的全长 c DNA序列 ,TA克隆到p GEM- T easy载体 ,亚克隆到 pc DNA3.1+载体 ,构建重组真核表达质粒 pm ACE2 ,测序鉴定。采用脂质体法将pm ACE2转染 Cos7细胞 ,分别用 RT- PCR和 SDS- PAGE检测 ACE2的转录和表达。 CLUSTAL X 1.8生物软件分析小鼠和大鼠及人 ACE2蛋白的多序列比较。采用 RT- PCR技术研究小鼠 ACE2组织分布的特异性。结果 :1RT- PCR扩增片段约 2 .6 kb,重组真核表达质粒 pm ACE2测序结果表明 ,克隆片段存在 A70 1G、T110 2 C和 T1330 C3处变异 ,其序列与以往报道不一致 ,c DNA全长为 2 397bp,而与 NCBI Refseq数据库 (XM- 136 130 )中 c DNA全长190 2 bp不符 ;2 SDS- PAGE显示 pm ACE2表达产物的相对分子量约 80 k D;3氨基酸序列分析表明 ,小鼠 ACE2主要由 N末端的信号肽序列 (第 1- 18位残氨 )、含有锌结合位点保守序列 HHEMGHIQ(第 373- 380位残氨 )的催化结构域和跨膜结构域 (第 738- 76 5位残氨 )组成 ;
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关键词
血管紧张素转化酶2
克隆
分子
基因表达
序列分析
cos7细胞
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职称材料
人骨保护素哺乳类表达载体的构建及初步表达
被引量：
1
3
作者
孟凡星
李瑞香
+1 位作者
臧晓怡
李兰英
《山东医药》
CAS
北大核心
2006年第29期20-22,共3页
目的构建人骨保护素(OPG)哺乳类表达载体并在非洲绿猴肾COS7细胞内初步表达。方法用RT-PCR方法将人OPG cDNA的全长编码基因扩增后,将其克隆于哺乳动物表达载体pcDNA 3.1/CT-GFP上,构建OPG的重组表达载体pcDNA 3.1/OPG-GFP。将其转染COS...
目的构建人骨保护素(OPG)哺乳类表达载体并在非洲绿猴肾COS7细胞内初步表达。方法用RT-PCR方法将人OPG cDNA的全长编码基因扩增后,将其克隆于哺乳动物表达载体pcDNA 3.1/CT-GFP上,构建OPG的重组表达载体pcDNA 3.1/OPG-GFP。将其转染COS7细胞进行瞬时表达,经RT-PCR和EL ISA鉴定表达载体的功能及表达水平。结果成功地获取了人OPG全长编码序列并构建了OPG的表达载体pcDNA 3.1/OPG-GFP;瞬时表达试验证实该载体具有表达OPG的功能。结论采用基因克隆技术成功构建了有表达OPG功能的哺乳类表达载体;此为高效、稳定表达OPG的研究奠定了基础。
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关键词
骨保护素
载体
cos7细胞
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职称材料
题名
含第一内含子猪生长激素cDNA基因在COS7细胞中的表达
被引量：
5
1
作者
李秀锦
仲飞
齐顺章
机构
燕山大学生物工程实验室
中国农业大学生物学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期49-53,共5页
基金
河北省自然科学基金资助项目(300264)
深圳科委资助项目(98023)。
文摘
以CMV真核生物启动子构建了含第一内含子猪生长激素(pGH)cDNA基因(pGHcDNA in)的表达载体,经DEAE 葡聚糖介导在COS7细胞进行了瞬时表达,通过PP95生物学测定法测定,证明含第一内含子pGHcDNA基因能够在真核细胞中进行分泌性表达,表达出的pGH具有生物学活性。这说明通过该基因转录出的前体mR NA能够在COS7细胞中进行正确剪接,从而翻译出具有生物活性的pGH。加入第一内含子在一定程度上可提高pGHcDNA基因的表达效率。
关键词
第一内含子
生长激素
猪
CDNA基因
cos7细胞
表达
Keywords
pGH cDNA
First intron
Transient expression
分类号
Q575.11 [生物学—生物化学]
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
小鼠ACE2基因的克隆和体外表达以及序列分析与组织分布
被引量：
4
2
作者
谢旭东
陈君柱
王兴祥
朱建华
孙坚
陶明
尚云鹏
郭晓纲
机构
浙江大学医学院附属第一医院心内科
中国科学院生物信息学研究所北京华大基因中心
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2005年第1期48-54,共7页
基金
浙江省科科技厅研究基金 (0 2 110 76 13)
浙江省卫生科学研究基金 (2 0 0 3A0 4 3)资助项目 .
文摘
目的 :深入研究血管紧张素转化酶 2 (angiotensin- converting enzyme2 ,ACE2 )在心血管疾病发病机理中的作用及在高血压基因治疗中的应用 ,克隆和体外表达小鼠 ACE2基因 ,并进行核苷酸和氨基酸序列分析和组织分布特征研究。方法 :采用 RT- PCR方法 ,从小鼠肾组织中扩增出 ACE2基因的全长 c DNA序列 ,TA克隆到p GEM- T easy载体 ,亚克隆到 pc DNA3.1+载体 ,构建重组真核表达质粒 pm ACE2 ,测序鉴定。采用脂质体法将pm ACE2转染 Cos7细胞 ,分别用 RT- PCR和 SDS- PAGE检测 ACE2的转录和表达。 CLUSTAL X 1.8生物软件分析小鼠和大鼠及人 ACE2蛋白的多序列比较。采用 RT- PCR技术研究小鼠 ACE2组织分布的特异性。结果 :1RT- PCR扩增片段约 2 .6 kb,重组真核表达质粒 pm ACE2测序结果表明 ,克隆片段存在 A70 1G、T110 2 C和 T1330 C3处变异 ,其序列与以往报道不一致 ,c DNA全长为 2 397bp,而与 NCBI Refseq数据库 (XM- 136 130 )中 c DNA全长190 2 bp不符 ;2 SDS- PAGE显示 pm ACE2表达产物的相对分子量约 80 k D;3氨基酸序列分析表明 ,小鼠 ACE2主要由 N末端的信号肽序列 (第 1- 18位残氨 )、含有锌结合位点保守序列 HHEMGHIQ(第 373- 380位残氨 )的催化结构域和跨膜结构域 (第 738- 76 5位残氨 )组成 ;
关键词
血管紧张素转化酶2
克隆
分子
基因表达
序列分析
cos7细胞
Keywords
Angiotensin-converting enzyme 2
Clone,molecule
Gene expression
Sequence analysis
cos
7
cell
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
人骨保护素哺乳类表达载体的构建及初步表达
被引量：
1
3
作者
孟凡星
李瑞香
臧晓怡
李兰英
机构
承德医学院
天津医科大学
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2006年第29期20-22,共3页
基金
天津市自然科学基金重点项目(013803511)
文摘
目的构建人骨保护素(OPG)哺乳类表达载体并在非洲绿猴肾COS7细胞内初步表达。方法用RT-PCR方法将人OPG cDNA的全长编码基因扩增后,将其克隆于哺乳动物表达载体pcDNA 3.1/CT-GFP上,构建OPG的重组表达载体pcDNA 3.1/OPG-GFP。将其转染COS7细胞进行瞬时表达,经RT-PCR和EL ISA鉴定表达载体的功能及表达水平。结果成功地获取了人OPG全长编码序列并构建了OPG的表达载体pcDNA 3.1/OPG-GFP;瞬时表达试验证实该载体具有表达OPG的功能。结论采用基因克隆技术成功构建了有表达OPG功能的哺乳类表达载体;此为高效、稳定表达OPG的研究奠定了基础。
关键词
骨保护素
载体
cos7细胞
Keywords
osteoprotegerin
vector
cos
7
cell
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
含第一内含子猪生长激素cDNA基因在COS7细胞中的表达
李秀锦
仲飞
齐顺章
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小鼠ACE2基因的克隆和体外表达以及序列分析与组织分布
谢旭东
陈君柱
王兴祥
朱建华
孙坚
陶明
尚云鹏
郭晓纲
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2005
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人骨保护素哺乳类表达载体的构建及初步表达
孟凡星
李瑞香
臧晓怡
李兰英
《山东医药》
CAS
北大核心
2006
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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