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吲哚美辛对CML细胞增殖抑制效应与STAT信号转导途径抑制相关 被引量:2
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作者 扶云碧 张广森 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期761-765,共5页
本研究的目的是观察吲哚美辛作用下慢性粒细胞白血病 (CML)细胞增殖抑制过程中JAK2、STAT1和STAT5蛋白质表达水平的变化及细胞内分布 ,揭示吲哚美辛抑制CML细胞增殖的分子机制。采用MTT及台盼蓝拒染法检测吲哚美辛对CML细胞的增殖抑制作... 本研究的目的是观察吲哚美辛作用下慢性粒细胞白血病 (CML)细胞增殖抑制过程中JAK2、STAT1和STAT5蛋白质表达水平的变化及细胞内分布 ,揭示吲哚美辛抑制CML细胞增殖的分子机制。采用MTT及台盼蓝拒染法检测吲哚美辛对CML细胞的增殖抑制作用 ,用Westernblot分析CML细胞JAK2、STAT1和STAT5蛋白质表达 ,用间接免疫荧光技术观察STAT1和STAT5在吲哚美辛干预的CML细胞中的定位及变化。结果表明 :4 0 0 μmol/L浓度的吲哚美辛能明显抑制CML细胞增殖及STAT1、STAT5蛋白质表达 ,但对JAK2蛋白无影响 ;STAT1和STAT5主要分布于细胞胞浆中。结论 :吲哚美辛可抑制CML细胞增殖 ,其机制可能与药物下调STAT1、STAT5蛋白质表达或与阻断细胞生长信号传导有关。 展开更多
关键词 吲哚美辛 STAT cml细胞 细胞增殖 信号转导
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敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因促进K562/ADM细胞凋亡 被引量:4
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作者 雒钰杰 徐敏 +1 位作者 高雯琬 陶崑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1398-1403,共6页
目的研究短发夹RNA(shRNA)敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因对慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/ADM细胞凋亡的影响。方法设计并合成3对针对人Alox5基因的靶向shRNA片段,插入到p Genesil-1干扰载体中,经过酶切和测序验证,成功构建p Gene... 目的研究短发夹RNA(shRNA)敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因对慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/ADM细胞凋亡的影响。方法设计并合成3对针对人Alox5基因的靶向shRNA片段,插入到p Genesil-1干扰载体中,经过酶切和测序验证,成功构建p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒,转染K562/ADM细胞,实时定量PCR和Western blot法检测Alox5 mRNA及蛋白水平,筛选最好干扰组。选择较高干扰效率的p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒组作为实验组,采用实时定量PCR检测K562/ADM细胞bcr/abl mRNA水平、Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白水平、流式细胞术检测细胞凋亡率。结果酶切及测序结果显示重组质粒构建成功。与阴性对照组(p Genesil-1-K562/ADM)和空白K562/ADM细胞组相比,转染p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒组的K562/ADM细胞Alox5 mRNA和蛋白水平均明显降低。敲低K562/ADM细胞Alox5后,bcr/abl mRNA、BCR/ABL融合蛋白水平均显著降低、细胞凋亡率显著增加。结论敲低Alox5基因后,K562/ADM细胞bcr/abl mRNA和BCR/ABL融合蛋白表达水平下降,细胞凋亡率增加。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病(cml) BCR/ABL 花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5) K562/ADM细胞
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Pre-miR-10a重组腺病毒载体对K562细胞增殖的抑制作用
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作者 齐杰玉 陶崑 +2 位作者 王灿蔚 李秋红 邓一平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1033-1036,共4页
目的:观察在K562细胞高表达miR-10a对细胞增殖及凋亡的影响。方法:用pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体感染K562细胞,采用RT-PCR检测感染后K562细胞中miR-10a和bcr/abl融合基因的表达水平,Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白表达水平,MTT... 目的:观察在K562细胞高表达miR-10a对细胞增殖及凋亡的影响。方法:用pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体感染K562细胞,采用RT-PCR检测感染后K562细胞中miR-10a和bcr/abl融合基因的表达水平,Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白表达水平,MTT、流式细胞术(FCM)分别检测感染后K562细胞的增殖及凋亡。结果:与对照组相比,K562细胞在转染pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体后,其miR-10a表达水平明显升高、bcr/abl融合基因水平显著降低;BCR/ABL融合蛋白表达明显下调、K562细胞增殖活力被抑制、细胞凋亡增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:pAd-pre-miR-10a重组腺病毒载体能明显抑制K562细胞的增殖、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病(cml) BCR/ABL miR-10a K562细胞
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IL-21对慢性粒细胞白血病患者调节性T细胞的影响
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作者 王东萍 张连生 +1 位作者 曾鹏云 易良才 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期517-520,共4页
目的:观察白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的作用,为CML的免疫治疗提供新思路。方法:收集兰州大学第二医院血液科初诊CML患者... 目的:观察白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的作用,为CML的免疫治疗提供新思路。方法:收集兰州大学第二医院血液科初诊CML患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),免疫磁珠法分选出CD4+T细胞。分别加入50、100、200 ng/ml IL-21与CD4+T细胞共培养72 h后,流式细胞术检测Treg的比例,并设生理盐水空白对照组。Real-time PCR法检测Treg细胞中Foxp3 mRNA的表达,ELISA法检测各组细胞上清液中IL-10、TGF-β的水平。结果:与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml IL-21组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例均降低[(3.42±0.76)%、(6.81±0.33)%、(7.98±0.76)%vs(12.09±0.91)%,P<0.05];且3组的Foxp3 mRNA均降低[(0.05±0.02)、(0.16±0.02)、(0.25±0.02)vs 1,P<0.05];Treg分泌IL-10量减少[(26.13±7.28)、(44.88±3.72)、(79.77±3.94)vs(133.00±12.32)pg/ml,P<0.05],分泌TGF-β量也减少[(9.25±0.84)、(16.70±1.00)、(20.47±1.60)vs(26.05±1.81)pg/ml,P<0.05]。结论:IL-21在体外可减少CML患者外周血中Treg的比例,并抑制其功能。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病(cml) IL-21 调节性T细胞(Treg) IL-10 TGF-β
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