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ERα和ClC-3的周期性表达与他莫昔芬抗乳腺癌作用的相关性研究
1
作者 李雪苛 侯秀颖 +3 位作者 刘世情 杨海峰 朱林燕 何伟丽 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期417-426,共10页
目的:探讨雌激素受体α(ERα)和ClC-3氯通道的周期性表达、分布和相互作用及其与他莫昔芬(TAM)抗乳腺癌周期特异性的相关性。方法:通过网络数据库分析ERα与ClC-3的表达相关性,三维分子模拟软件和免疫共沉淀法分析ERα和ClC-3的蛋白间... 目的:探讨雌激素受体α(ERα)和ClC-3氯通道的周期性表达、分布和相互作用及其与他莫昔芬(TAM)抗乳腺癌周期特异性的相关性。方法:通过网络数据库分析ERα与ClC-3的表达相关性,三维分子模拟软件和免疫共沉淀法分析ERα和ClC-3的蛋白间相互作用;胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)双阻断释放法和诺考达唑阻滞细胞周期,流式细胞术检测细胞周期;MTT法检测细胞活力;Western blot检测ERα和ClC-3的蛋白表达;免疫荧光染色检测ERα和ClC-3的亚细胞分布。结果:(1)网络数据库分析表明,ERα和ClC-3的表达显著相关;免疫共沉淀实验显示这两种蛋白存在相互作用;(2)使用TdR双阻断释放法和诺考达唑获得不同周期的人乳腺癌T47D细胞;(3)TAM对G2/M期的细胞活力抑制作用最强;(4)ERα和ClC-3的蛋白表达均有周期差异,且二者亚细胞分布存在周期性特点并表现为共定位;(5)ERα和ClC-3在各周期均存在蛋白间的相互作用;(6)TAM作用于各周期细胞后,处于G2/M期细胞的ERα蛋白表达最高,但对ClC-3在各周期的表达无显著影响。结论:人乳腺癌T47D细胞中ERα和ClC-3的表达和分布存在周期差异性,并且ERα和ClC-3存在蛋白间的相互作用;ERα的周期特性可能介导了TAM的抗乳腺癌作用周期特异性。 展开更多
关键词 乳腺癌 雌激素受体Α clc-3氯通道 他莫昔芬 细胞周期
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毛竹CLCs基因家族鉴定及高盐与干旱胁迫下的表达模式分析
2
作者 陈诗蕾 郭琳 +2 位作者 鲁海雯 叶晓莉 林新春 《核农学报》 北大核心 2025年第11期2374-2387,共14页
氯离子通道蛋白(CLC)是一类介导以Cl-为代表的阴离子跨膜转运的重要通道或转运蛋白家族,在高盐与干旱胁迫等多种非生物胁迫中发挥重要作用。为探究毛竹CLCs基因家族的功能,本研究通过生物信息学方法对毛竹CLCs基因家族成员进行鉴定与分... 氯离子通道蛋白(CLC)是一类介导以Cl-为代表的阴离子跨膜转运的重要通道或转运蛋白家族,在高盐与干旱胁迫等多种非生物胁迫中发挥重要作用。为探究毛竹CLCs基因家族的功能,本研究通过生物信息学方法对毛竹CLCs基因家族成员进行鉴定与分析,利用RNA-Seq测序和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对高盐与干旱因子胁迫下CLCs基因的表达情况进行分析。结果表明,在毛竹全基因组中共鉴定到18条CLCs基因,这些基因编码蛋白长度为455~1440 aa,分子量为49358.04~157276.61 Da,理论等电点为6.40~8.85。系统进化分析表明,18条PeCLCs基因分为2个亚类,6个亚家族,且同一亚家族在基因结构方面具有相似性。共线性分析得出CLCs基因家族在毛竹中共有9个共线性基因对,且非同义突变率/同义突变率(Ka/Ks)值均小于1。启动子顺式元件结果显示,PeCLCs基因的启动子序列中含有胁迫响应、激素响应等多种元件。转录组数据分析结果显示,PeCLCs基因存在组织与其发育阶段特异性,大部分毛竹PeCLCs基因在鞭根系统与不同发育时期的竹笋中相对高表达,表明PeCLCs可在鞭根系统和竹笋快速生长过程中维持Cl-稳态。qRT-PCR结果显示,大部分PeCLCs在高盐与干旱胁迫条件下被诱导表达,说明PeCLCs可响应高盐与干旱胁迫。本研究结果为毛竹CLCs基因家族功能的进一步研究提供了参考依据与基因资源。 展开更多
关键词 毛竹 clc基因家族 生物信息学 高盐胁迫 干旱胁迫
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拟南芥过表达杉木ClC3HDZ1基因及其对缺磷胁迫的响应
3
作者 黄朝章 赵紫宇 +3 位作者 曾一帆 叶小鹏 马祥庆 帅鹏 《森林与环境学报》 北大核心 2025年第5期501-508,共8页
为探究杉木ClC3HDZ1转录因子响应缺磷胁迫的作用机制。通过构建杉木ClC3HDZ1转录因子过表达拟南芥植株,研究其对缺磷胁迫的响应,提取杉木叶片中的总RNA并将其反转为cDNA,利用三步法聚合酶链式反应(PCR)扩增出ClC3HDZ1转录因子的编码序... 为探究杉木ClC3HDZ1转录因子响应缺磷胁迫的作用机制。通过构建杉木ClC3HDZ1转录因子过表达拟南芥植株,研究其对缺磷胁迫的响应,提取杉木叶片中的总RNA并将其反转为cDNA,利用三步法聚合酶链式反应(PCR)扩增出ClC3HDZ1转录因子的编码序列片段,连接至带有35S启动子驱动的PCAMBIA1300载体,转化到农杆菌,通过花序侵染法导入野生型拟南芥植株。经含有潮霉素的MS固体培养基筛选和PCR鉴定获得过表达植株,培养至T_(3)代。将T_(3)代过表达杉木ClC3HDZ1基因植株和野生型植株分别在缺磷和正常磷条件下垂直培养,观察测定不同植株的根长,测定不同植株组织总磷含量、花青素相对含量及叶绿素含量。结果表明:缺磷培养下,过表达植株根长受抑制程度小于野生型,且组织总磷含量高于野生型,花青素相对含量和叶绿素含量均低于野生型。杉木ClC3HDZ1基因异源过表达可促进拟南芥植株体内总磷的积累,抵抗缺磷胁迫,同时使拟南芥叶片中花青素增幅减小。 展开更多
关键词 杉木 clc3HDZ1基因 拟南芥 过表达 缺磷胁迫
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CLC谐振型感应电能传输系统的H_∞控制 被引量：35
4
作者 戴欣 余奎 孙跃 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2010年第30期47-54,共8页
CLC谐振型感应电能传输系统较传统的LC谐振型系统具有更大的谐振容量和更小的频率漂移,但由于系统的高阶及多周期点特性,对CLC型系统的控制更为困难。为实现CLC谐振型系统的输出鲁棒控制,将系统状态变量及非线性开关函数进行频域线性化... CLC谐振型感应电能传输系统较传统的LC谐振型系统具有更大的谐振容量和更小的频率漂移,但由于系统的高阶及多周期点特性,对CLC型系统的控制更为困难。为实现CLC谐振型系统的输出鲁棒控制,将系统状态变量及非线性开关函数进行频域线性化,通过平衡点变换,得到平衡点附近的广义状态空间平均(generalized state space averaging,GSSA)扰动模型。建立了系统的H∞控制系统结构,提出GSSA模型误差扰动有界定理并给出了证明。给出了相应的H∞扰动控制律,并通过仿真及实验结果验证了该模型及控制方法的有效性。 展开更多
关键词 clc谐振 H∞控制 广义状态空间平均扰动模型 感应电能传输
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小功率开关电源CLC纹波抑制电路特性分析 被引量：4
5
作者 成毅 庹先国 +2 位作者 范磊磊 刘静 王洪辉 《电源技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1128-1130,共3页
在便携式仪器中通常使用小功率开关电源为系统供电,电源的纹波噪声直接影响系统的性能。采用MAX606芯片设计了12 V的开关电源,以π型CLC低通滤波器对其输出纹波进行抑制,通过改变电解电容的类型(贴片铝电解、直插铝电解、贴片钽电解)、... 在便携式仪器中通常使用小功率开关电源为系统供电,电源的纹波噪声直接影响系统的性能。采用MAX606芯片设计了12 V的开关电源,以π型CLC低通滤波器对其输出纹波进行抑制,通过改变电解电容的类型(贴片铝电解、直插铝电解、贴片钽电解)、电容值大小、电感值大小以及负载,分析了CLC电路纹波抑制特性。结果表明,小功率开关电源CLC滤波电路中,电感对纹波抑制作用较大,电容作用较小;贴片铝电解效果最好,钽电解次之,直插铝电解效果最差;应选用mH级电感和100μF以上电容。 展开更多
关键词 开关电源 纹波 π型 clc
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基于盐逆境下植物CLC同源基因的发掘和功能解析的研究进展 被引量：7
6
作者 於丙军 刘振 卫培培 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期187-194,共8页
植物盐害的阴离子毒害主要由Cl^-造成,盐逆境下植物体内Cl^-吸收、运输及其调控的分子机制已成为植物耐盐性研究不可忽视的重要方面,但有关Cl^-毒害问题相对Na^+毒害和适应的研究在过去较少受到关注。Cl^-通道(chloride channels,CLCs)... 植物盐害的阴离子毒害主要由Cl^-造成,盐逆境下植物体内Cl^-吸收、运输及其调控的分子机制已成为植物耐盐性研究不可忽视的重要方面,但有关Cl^-毒害问题相对Na^+毒害和适应的研究在过去较少受到关注。Cl^-通道(chloride channels,CLCs)是一类广泛分布于原核和真核生物细胞膜(主要是内膜系统),以介导Cl^-为代表的阴离子运输的重要转运蛋白家族。本文对目前已报道的包括拟南芥、大豆、水稻等多种植物的CLC同源基因及其编码蛋白进行了系统的生物信息学分析,并对植物CLC同源基因参与耐氯(盐)功能解析方面的研究进展进行了归纳,为今后进一步发掘和利用植物耐氯(盐)基因,全面揭示植物耐盐性的分子机制和最终寻求提高大豆、水稻等作物耐氯(盐)性的分子育种途径,指明可借鉴的研究方向。 展开更多
关键词 植物clc同源基因 盐逆境 Cl^-通道蛋白 耐氯(盐)性
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ClC-3反义寡核苷酸对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响 被引量：9
7
作者 钱艳 关永源 +3 位作者 王冠蕾 杨晓茹 贺华 丘钦英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期314-317,共4页
目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷... 目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的ClC 3蛋白的表达 ;②ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖。结论　ClC 展开更多
关键词 clc-3 T淋巴细胞 反义寡核苷酸 增殖
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大豆基因组CLC同源基因家族的生物信息学分析 被引量：3
8
作者 李伟 王龙超 +1 位作者 曹金花 於丙军 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期35-43,共9页
利用NCBI网站、Phytozome数据库和有关生物信息学软件,对大豆基因组CLC（chloride channel）同源基因家族进行系统的预测分析和比较。结果表明：大豆CLC同源基因有8～9个拷贝,分别分布于第1、5、9、11、13、16和19号染色体上,内含子数目... 利用NCBI网站、Phytozome数据库和有关生物信息学软件,对大豆基因组CLC（chloride channel）同源基因家族进行系统的预测分析和比较。结果表明：大豆CLC同源基因有8～9个拷贝,分别分布于第1、5、9、11、13、16和19号染色体上,内含子数目为4～23;编码的大豆CLC蛋白氨基酸数量为725～823,整体一致性为63.43%,相对分子质量为（80～91）×103,理论等电点为6.45～8.94,带正或负电荷氨基酸残基比例为7%～10%,均为跨膜蛋白（含9～12个跨膜区）,除Glyma16g06190外均含有2个CBS结构域;具有（Ⅰ）GS/PGIPE、（Ⅱ）GKE/AGPLVH和（Ⅲ）PVGGVLFALEE/G 3个氨基酸残基保守区,其中相应关键氨基酸残基位点决定了它们不同的阴离子（Cl-或NO-3）优先选择属性和蛋白功能（通道或转运蛋白）属性。它们都与拟南芥CLC蛋白亚家族Ⅰ关系较近,其中GmCLC1（Glyma05g14760）、GmsCLC1、Glyma16g06190和Glyma19g25680与AtCLCa、AtCLCb处于同一分支,整体显示序列一致性为87.79%;Glyma09g28620和Glyma16g33351与AtCLCc、NtCLC1同源关系较近,序列一致性为70.99%;Glyma13g23080则与AtCLCg在同一分支,序列一致性为74.21%;而Glyma01g44950和Glyma11g00690则与AtCLCd同源关系最近,序列一致性为90.68%。qRT-PCR分析结果显示,在150mmol·L-1NaCl处理24 h过程中,GmsCLC1基因在栽培大豆N23674品种、野生大豆BB52种群及其后代4076株系中均上调表达,其中在BB52根中上升最显著。结论：大豆多个CLC同源基因在进化过程中发生的功能分化,可能在正常或盐胁迫条件下植株体内阴离子（包括Cl-、NO-3）稳态重建方面发挥不同作用。 展开更多
关键词 大豆 clc同源基因 CBS结构域 氨基酸残基保守区 通道蛋白 转运蛋白
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膀胱移行细胞癌的ClC-3和NF-κB的表达及意义 被引量：5
9
作者 汪岩 康劲松 +4 位作者 王心蕊 王医术 李洪岩 李扬 孙连坤 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期135-137,F0003,共4页
目的:探讨ClC-3和NF-κB在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学染色技术检测31例病理诊断为膀胱移行细胞癌和6例正常膀胱组织中ClC-3和NF-κB的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中ClC-3主要在癌细胞的胞膜表达,阳性表达... 目的:探讨ClC-3和NF-κB在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学染色技术检测31例病理诊断为膀胱移行细胞癌和6例正常膀胱组织中ClC-3和NF-κB的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中ClC-3主要在癌细胞的胞膜表达,阳性表达率74%(23/31)。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率40%(4/10),Ⅱ级阳性表达率81%(9/11)、Ⅲ级阳性表达率100%(10/10)。NF-κB在癌细胞的胞浆内表达,阳性表达率83%(26/31)。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率60%(6/10),Ⅱ级阳性表达率90%(10/11),Ⅲ级阳性表达率100%(10/10)。6例正常膀胱组织中仅有1例ClC-3表达弱阳性,NF-κB表达均为阴性。膀胱移行细胞癌组织中ClC-3和NF-κB阳性表达率高于正常膀胱组织(P<0.01)。结论:ClC-3和NF-κB可能与膀胱移行细胞癌病理分级和增殖有关。 展开更多
关键词 膀胱移行细胞癌 clc-3 NF-KB 免疫组织化学
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刀豆蛋白A促进T淋巴细胞增殖与ClC-3蛋白的关系 被引量：4
10
作者 钱艳 关永源 +3 位作者 王冠蕾 杨晓茹 贺华 丘钦英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1132-1135,共4页
目的　研究刀豆蛋白A(ConA)促进T淋巴细胞增殖与内源性ClC 3蛋白的关系。方法　免疫印迹 (Westernblot)法检测ClC 3蛋白表达 ;[3 H] TdR参入法观察ConA对细胞增殖的影响。结果　①T淋巴细胞上有内源性ClC 3蛋白表达 ,分子量约为 80ku ;... 目的　研究刀豆蛋白A(ConA)促进T淋巴细胞增殖与内源性ClC 3蛋白的关系。方法　免疫印迹 (Westernblot)法检测ClC 3蛋白表达 ;[3 H] TdR参入法观察ConA对细胞增殖的影响。结果　①T淋巴细胞上有内源性ClC 3蛋白表达 ,分子量约为 80ku ;②ConA可浓度依赖性地促进T淋巴细胞增殖 ;③ConA刺激T淋巴细胞 2 4、4 8、72h后 ,ClC 3蛋白表达均增加 ;刺激 4 8h后ClC 3蛋白表达增加最多。④ConA可浓度依赖性地增加ClC 3蛋白表达。结论　T淋巴细胞上存在内源性ClC 3蛋白表达 ;ClC 展开更多
关键词 CL^-通道 clc-3 T淋巴细胞 增殖 免疫印迹
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人ClC-2基因小分子干扰RNA真核表达载体的构建和鉴定 被引量：4
11
作者 杨翔云 张勇 +4 位作者 赖小刚 裴建明 杨安钢 胡玉珍 周士胜 《医学研究生学报》 CAS 2006年第6期487-491,i0011,共6页
目的:构建靶向人C lC-2基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:根据DEQOR提供的siRNA设计原则和程序,设计两个靶向C lC-2基因的发夹状siRNA;通过化学合成的方法合成两对分别互补的寡核苷酸链,退火后得到编码该siRNA的C lC-2... 目的:构建靶向人C lC-2基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:根据DEQOR提供的siRNA设计原则和程序,设计两个靶向C lC-2基因的发夹状siRNA;通过化学合成的方法合成两对分别互补的寡核苷酸链,退火后得到编码该siRNA的C lC-2基因片段。将该片段连接至经BglⅡ和HindⅢ双酶切的真核细胞表达载体pSUPER.puro的多克隆位点,转化扩增提取质粒;对重组质粒进行EcoRⅠ和HindⅢ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定。脂质体L ipofectam ineTM2000介导瞬时转染,通过RT-PCR检测人胶质瘤细胞系BT-325细胞中C lC-2mRNA表达。结果:经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定,目的片段与真核细胞表达载体pSUPER.puro连接正确。转染两重组质粒细胞的C lC-2 mRNA表达明显降低。结论:成功构建人C lC-2基因干扰真核表达载体2个,分别命名为pSUPER.puro-siC lC-21和pSUPER.puro-siC lC-22,可用于进一步研究C lC-2基因对人胶质瘤侵袭和迁移活动的影响。 展开更多
关键词 clc-2基因 人胶质瘤 RNA干扰 重组载体
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氯通道ClC-2反义寡核苷酸对顺铂作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响 被引量：3
12
作者 苏静 周磊 +2 位作者 张宏宇 孙连坤 康劲松 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期43-46,F0002,共5页
目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON... 目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON组(转染ClC-2反义寡核苷酸)、DDP组(无义寡核苷酸与顺铂联用)和AON+DDP组(ClC-2反义寡核苷酸与顺铂联用)。应用RT-PCR检测相关基因ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达;Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭力;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移率。结果:与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达率降低(P<0.05);Transwell小室侵袭实验中对照组、AON组、DDP组和AON+DDP组侵袭细胞数分别为81.00±4.58、42.01±4.36、48.33±2.52和12.67±5.13;与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组穿透细胞数明显降低(P<0.05)。Transwell小室迁移实验中AON组、DDP组、AON+DDP组细胞迁移率(%)分别为72.40±2.20、51.48±1.29、37.87±1.50,与对照组比较均明显降低(P<0.05)。结论:①转染ClC-2反义寡核苷酸能有效抑制ClC-2 mRNA表达;②抑制ClC-2 mRNA能降低U251细胞的迁移力和侵袭力;③ClC-2 mRNA表达降低可促进顺铂对U251细胞迁移力和侵袭力的抑制作用。 展开更多
关键词 氯通道clc-2 反义寡核苷酸 顺铂 神经胶质瘤U251细胞 肿瘤浸润
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ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩 被引量：4
13
作者 叶东 张海峰 +2 位作者 朱林燕 王立伟 陈丽新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期216-220,共5页
目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blottin... 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。 展开更多
关键词 clc-3氯通道 SIRNA 鼻咽癌细胞 细胞容积
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一种改进型CLC电流型谐振逆变器 被引量：1
14
作者 刘教民 李建文 +2 位作者 李永刚 杨争艳 张军 《电工技术学报》 EI CSCD 北大核心 2011年第S1期125-129,共5页
针对电流型谐振逆变器中串联二极管反向过电压和负载槽路参数如何合理匹配的问题,提出了一种改进型CLC电流型谐振逆变器拓扑、通过串联缓冲电感、并联栅漏极电容,功率器件实现零电流开通、零电压关断,抑制了二极管产生浪涌电流;通过开... 针对电流型谐振逆变器中串联二极管反向过电压和负载槽路参数如何合理匹配的问题,提出了一种改进型CLC电流型谐振逆变器拓扑、通过串联缓冲电感、并联栅漏极电容,功率器件实现零电流开通、零电压关断,抑制了二极管产生浪涌电流;通过开关频率的改变以及三阶CLC负载中电容比例的定量分析,权衡输出电流与负载线圈支路电流大小,确定小容性的工作范围和输出有功功率最大值。试验结果证明所建拓扑的正确性、定量分析的有效性。 展开更多
关键词 电流型谐振逆变器 并联栅漏极电容 clc负载匹配 容性工作范围
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沉默ClC-3氯通道基因对HeLa细胞周期分布的影响 被引量：3
15
作者 叶东 邢德刚 +2 位作者 曾志 陈丽新 王立伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期257-262,共6页
目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative si... 目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative siRNA组)和ClC-3 siRNA组。采用real-time PCR检测ClC-3 siRNA的沉默效率;流式细胞术检测细胞周期分布情况;Western blot检测ClC-3蛋白及相关细胞周期蛋白(cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4、CDK6、P21和P27等表达。结果:CIC-3 siRNA成功沉默HeLa细胞的ClC-3基因。和其它组相比,ClC-3 siRNA组的细胞周期被阻抑在G_0/G_1期。CIC-3 siRNA组的cyclin D1、CDK4和CDK6蛋白表达水平明显下降,P21和P27蛋白表达水平明显上升。结论:沉默HeLa细胞ClC-3氯通道基因可影响cyclin D1、CDK4、CDK6、P21和27蛋白的表达水平胆抑HeLa细胞周期停滞在G_0/G_1期。 展开更多
关键词 clc-3氯通道 HELA细胞 细胞周期 细胞周期蛋白依赖激酶 P21 P27
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干扰ClC-2基因表达对胶质瘤BT-325细胞生长的影响 被引量：3
16
作者 杨翔云 赖小刚 +3 位作者 张勇 裴建明 杨安钢 周士胜 《中国康复理论与实践》 CSCD 2006年第5期378-380,共3页
目的观察抑制容积调控氯通道ClC-2基因的表达对胶质瘤BT-325细胞生长的影响。方法设计和构建两个针对ClC2基因的小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染,将空载体质粒和两个重组质粒分别转染入BT-325细胞(... 目的观察抑制容积调控氯通道ClC-2基因的表达对胶质瘤BT-325细胞生长的影响。方法设计和构建两个针对ClC2基因的小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染,将空载体质粒和两个重组质粒分别转染入BT-325细胞(依次为对照组、PP1组和PP2组);通过RTPCR检测ClC2基因mRNA表达变化;MTT分析检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期。结果与对照组相比较,干扰组ClC2基因的mRNA水平明显降低,细胞生长速度明显减慢,细胞周期进程被阻滞在G1期。结论干扰胶质瘤细胞系BT-325细胞的ClC-2基因表达可以抑制细胞的生长,提示ClC2基因可能成为控制胶质瘤恶性生长的新靶点。 展开更多
关键词 clc-2基因 胶质瘤 RNA干扰(RNAI) BT-325细胞
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阻断CLC-3氯通道对结直肠癌细胞株生存率和侵袭转移能力的影响及其分子机制 被引量：2
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作者 王艳萍 姬林松 +2 位作者 樊宏伟 向晓辉 徐威 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期361-365,共5页
目的:通过研究CLC-3在结直肠组织中的表达,探讨CLC-3对结直肠癌细胞株SW480、SW620的细胞生存率、侵袭转移能力的影响及其潜在的机制。方法:采用RT-PCR方法测定不同分期结直肠癌组织和正常结直肠组织中CLC-3的mRNA表达水平。运用CLC-3... 目的:通过研究CLC-3在结直肠组织中的表达,探讨CLC-3对结直肠癌细胞株SW480、SW620的细胞生存率、侵袭转移能力的影响及其潜在的机制。方法:采用RT-PCR方法测定不同分期结直肠癌组织和正常结直肠组织中CLC-3的mRNA表达水平。运用CLC-3阻断剂DIDS、NPPB阻断SW480、SW620细胞的CLC-3表达后,采用CCK-8法实验检测细胞生存率,细胞侵袭实验检测细胞侵袭转移情况;并采用免疫印迹法测定阻断CLC-3表达后SW480、SW620细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。结果:结直肠癌组织中CLC-3 mRNA表达水平高于结直肠炎黏膜组织和正常结直肠组织(P<0.05),且CLC-3 mRNA表达和结直肠分期相关。抑制CLC-3表达后,SW480、SW620细胞的生存率和侵袭转移能力降低(P<0.05),且β-catenin、C-myc、cyclin D1、Ki-67、survivin表达降低(P<0.05)。结论:CLC-3高表达与结直肠的发生发展有潜在联系,其机制可能与Wnt/β-catenin有关,为CLC-3作为治疗结直肠癌的潜在新靶点提供实验基础。 展开更多
关键词 clc-3 结直肠癌 WNT/Β-CATENIN 细胞生存率 侵袭转移
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ClC-3氯通道调节氧糖剥夺所诱导的小胶质细胞的表型转化 被引量：2
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作者 董银凤 邢青青 +2 位作者 常瑶 秦雪 张华 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1192-1197,共6页
目的 :研究ClC-3氯通道在氧糖剥夺所致小胶质细胞表型转化中的作用。方法:应用小胶质细胞株(BV-2)制备氧糖剥夺模型,分别给予氯通道阻断剂DIDS和NPPB预处理BV-2细胞。通过MTT活性测定确定BV-2细胞损伤及药物的有效浓度;通过实时荧光定量... 目的 :研究ClC-3氯通道在氧糖剥夺所致小胶质细胞表型转化中的作用。方法:应用小胶质细胞株(BV-2)制备氧糖剥夺模型,分别给予氯通道阻断剂DIDS和NPPB预处理BV-2细胞。通过MTT活性测定确定BV-2细胞损伤及药物的有效浓度;通过实时荧光定量PCR法测定细胞表型相关分子,如M1型相关分子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、CD86]和M2型相关分子[转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、CD206]m RNA水平的表达;通过RNA干扰的方法下调ClC-3的表达,再给予氯通道阻断剂DIDS和NPPB干预,进一步检测细胞的MTT活性,观察药物作用效果。结果:预先给予DIDS(1和10μmol/L)和NPPB(1μmol/L)能够改善氧糖剥夺所诱导的BV-2细胞MTT活性下降,抑制M1型相关分子如TNF-α、IL-1β和CD86的表达并促进M2型相关分子(TGF-β和CD206)的表达;通过RNA干扰下调ClC-3的表达,能够消除DIDS和NPPB的作用。结论:ClC-3氯通道参与调控氧糖剥夺所致小胶质细胞的表型转化,阻断ClC-3氯通道抑制氧糖剥夺诱导小胶质细胞向M1型转化。 展开更多
关键词 clc-3氯通道 氧糖剥夺 小胶质细胞
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沉默ClC-3氯通道基因对PC-12细胞凋亡的影响 被引量：2
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作者 吴琼 张淑玲 +2 位作者 李曦 林玲 常全忠 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第1期59-63,共5页
目的:观察氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因沉默对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC-12凋亡的影响。方法:取处于对数生长期的PC-12细胞,随机分为4组:对照组(用正常培养基培养)、H_2O_2组(用300nmol/LH_2O_2诱导12h)、H_2O_2+空质粒组(细胞转染pGPU... 目的:观察氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因沉默对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC-12凋亡的影响。方法:取处于对数生长期的PC-12细胞,随机分为4组:对照组(用正常培养基培养)、H_2O_2组(用300nmol/LH_2O_2诱导12h)、H_2O_2+空质粒组(细胞转染pGPU6/GFP24h后用H_2O_2诱导12h)、H_2O_2+siRNA组(细胞转染pGPU6/GFP-ClC-3-siRNA24h后用H_2O_2诱导12h)。通过CCK-8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot法检测Caspase-3以及ClC-3蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测ClC-3mRNA的表达。结果:与对照组比较,H_2O_2组、H_2O_2+空质粒组和H_2O_2+siRNA组均表现为细胞存活率下降,细胞凋亡增加,ClC-3mRNA和Caspase-3、ClC-3蛋白表达增加(P<0.05);H_2O_2组和H_2O_2+空质粒组比较,各指标差异无统计学意义(P>0.05);但与H_2O_2组、H_2O_2+空质粒组比较,H_2O_2+siRNA组细胞存活率较高,细胞凋亡率较低,ClC-3mRNA和Caspase-3、ClC-3蛋白表达较弱(P<0.05)。结论:ClC-3氯离子通道参与了H_2O_2诱导的PC-12细胞凋亡。 展开更多
关键词 SIRNA clc-3 大鼠 细胞凋亡
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ClC-3氯通道对Thapsigargin触发的Ca2＋运动的影响 被引量：2
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作者 张海宁 丘钦英 关永源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1057-1061,共5页
目的探讨ClC-3氯通道与Thapsigargin(TG)触发的Ca2+运动的关系。方法在PC12细胞中转染全长ClC-3cDNA,利用生物荧光影像分析系统测定胞质Ca2+技术探讨ClC-3氯通道对TG触发的Ca2+运动的影响。结果与对照组相比,ClC-3蛋白过表达对TG触发的P... 目的探讨ClC-3氯通道与Thapsigargin(TG)触发的Ca2+运动的关系。方法在PC12细胞中转染全长ClC-3cDNA,利用生物荧光影像分析系统测定胞质Ca2+技术探讨ClC-3氯通道对TG触发的Ca2+运动的影响。结果与对照组相比,ClC-3蛋白过表达对TG触发的PC12细胞静息[Ca2+]i的Ratio值和Ca2+释放的Ratio值无影响(P>0.05)。但使Ca2+内流量明显降低(P<0.05)。SK&F96365可以浓度依赖的抑制TG触发的Ca2+内流,但与对照细胞及空载体转染细胞相比,SK&F96365对ClC-3蛋白过表达细胞Ca2+内流的抑制作用明显减弱(P<0.05)。结论ClC-3蛋白参与TG触发的经Ca2+池操纵的Ca2+内流(store-operated Ca2+entry,SOCE)调节。 展开更多
关键词 clc-3氯通道 过表达 钙离子 THAPSIGARGIN
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