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题名人源受体hGPCRc工程细胞株的建立及其应用
被引量：1
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作者
袁广胜
刘永学
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机构
四川农业大学玉米研究所
北京放射医学研究所药理室
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出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第7期818-822,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(No30171096)
全军"十五医药卫生资助项目(No01MB056)
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文摘
目的建立孤儿G蛋白偶联受体(OrphanGproteincoupledreceptors,oGPCRs)配基筛选体系并应用于化合物的筛选。方法利用RTPCR从人结肠组织获得oGPCR成员hGPCRc的氨基酸编码序列,在利用相关软件对hGPCRc的结构特点进行分析的基础上,构建hGPCRc之表达载体pcDNA3.1(+)hGPCRc,转染CHOK1细胞获得CHOhGPCR工程细胞株,将不同化合物作用于细胞株,用Fluo3为分子探针检测细胞内钙离子浓度变化,以分析化合物中是否为该受体的特异性配基。结果生物信息学分析得到:hGPCR定位于人染色体13q32.2,对应的氨基酸序列组成了7个跨膜区段的结构域,在进化树上与人源P2Y1受体最亲近,应属于人类GPCR成员;成功得到CHOhGPCRc工程细胞株;所检测化合物作用于细胞株并没有引起胞内钙离子的波动,很可能没有活化hGPCRc。结论hGPCRc是一个与已知人P2Y1最近的成员,但基于CHOhGPCRc工程细胞株的第二信使筛选结果表明,hGPCRc并不被P2Y1的已知配基活化因此很可能属于不同于P2Y1的嘌呤类受体新亚型。
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关键词
孤儿G蛋白偶联受体
hGPCRc
钙
cho—k1细胞系
工程细胞株
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Keywords
orphan G protein-coupled receptors
hGPCRc
calcium
cho-k_1 cell line
engineered cells
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分类号
R392.11
[医药卫生—免疫学]
R394.2
[医药卫生—医学遗传学]
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