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人类CD8^+记忆T细胞体外扩增方法的研究 被引量:3
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作者 罗海华 周南 +3 位作者 张旭 郭学敏 张辉 刘超 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1339-1344,共6页
目的:研究体外扩增人类CD8+记忆T细胞的新方法,为抗病毒与抗肿瘤的过继性免疫治疗提供新的手段。方法:将anti-CD3抗体、anti-CD28抗体、CD70、白细胞介素(IL)-2、IL-7和IL-15进行排列组合,设计出63种刺激方式,对体外分离得到的正常人外... 目的:研究体外扩增人类CD8+记忆T细胞的新方法,为抗病毒与抗肿瘤的过继性免疫治疗提供新的手段。方法:将anti-CD3抗体、anti-CD28抗体、CD70、白细胞介素(IL)-2、IL-7和IL-15进行排列组合,设计出63种刺激方式,对体外分离得到的正常人外周血CD8+T细胞进行体外扩增;培养14 d后进行细胞计数,并检测CD8+T细胞的纯度以及CD8+中枢记忆T细胞(TCM)和CD8+效应记忆T细胞(TEM)所占的比例,进而计算出CD8+T细胞、CD8+TCM和CD8+TEM的体外扩增倍数,从而确定理想的刺激方法。结果:体外扩增CD8+T细胞、CD8+TCM和CD8+TEM的理想刺激方式均为anti-CD3抗体、IL-2和IL-7三者的组合;该刺激方式使3种细胞在培养14 d后分别扩增了13.19、13.28和15.27倍。结论:Anti-CD3抗体、IL-2和IL-7三者的组合,是刺激人类CD8+记忆T细胞体外扩增的相对理想方法。 展开更多
关键词 过继性免疫治疗 cd8+记忆t细胞 体外扩增
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氧化低密度脂蛋白干预记忆性CD8^+T细胞亚群的分化 被引量:1
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作者 郑华 林泽杭 +3 位作者 张延梅 周琛斐 刘璇 吴砂 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1098-1103,共6页
目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对CD8+记忆性T细胞亚群分化的影响及其机制。方法将雌性10周龄未发生糖尿病NOD小鼠随机分为2组(n=5):ox-LDL组及对照组。断颈处死各组小鼠磁珠分离脾脏CD8+T细胞体外培养(IL-2),ox-LDL组加入ox-LDL 30... 目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对CD8+记忆性T细胞亚群分化的影响及其机制。方法将雌性10周龄未发生糖尿病NOD小鼠随机分为2组(n=5):ox-LDL组及对照组。断颈处死各组小鼠磁珠分离脾脏CD8+T细胞体外培养(IL-2),ox-LDL组加入ox-LDL 30μg/m L体外刺激24 h,ox-LDL未处理组作为对照组。24 h后分离细胞。体外实验利用流式细胞仪检测各组以下指标:胞内CD8+IFN-γ+确定胰岛β细胞特异性杀伤性CD8+T细胞的比例;细胞表面分子CD8、CD44、CD62L确定CD8+记忆性T细胞的不同亚群分化;T细胞相关转录因子TCF-1及STAT-3的活化确定关键性转录因子的作用。体内实验中,将各组CD8+记忆性T细胞通过尾静脉注射的方法移植给未发病NOD小鼠,同时设立未移植的模型对照组,每5 d检测血糖1次,监测小鼠的血糖改变及生存率。结果相比对照组,ox-LDL(30μg/m L)作用24 h后,胰岛β细胞特异性杀伤性CD8+T细胞活化减少[(0.7±0.03)%vs(2.7±0.14)%,P<0.01],记忆性T细胞中的效应记忆性T细胞形成数目减少[(10.3±0.71)%vs(30.3±1.36)%,P<0.01],干细胞样记忆性T细胞增加[(72.3±3.8)%vs(55.1±2.61)%,P<0.05]。T细胞转录因子TCF-1及p-STAT-3活化的也受到抑制[TCF-1:(14.5±0.82)%vs(34.2±1.23)%,磷酸化STAT-3:(3.3±0.12)%vs(22.1±1.1)%,P<0.01]。T细胞移植给未发病NOD小鼠后,ox-LDL处理组小鼠血糖升高明显低于对照组(P<0.05),且生存率提高(P<0.05)。结论 ox-LDL干扰记忆性CD8+T细胞核转录因子TCF-1活化及STAT-3的磷酸化,抑制长效杀伤作用的效应性和记忆性CD8+T细胞形成,诱导干细胞样记忆性CD8+T细胞形成,从而阻止胰岛β细胞自身免疫损伤及Ⅱ型糖尿病的发生。 展开更多
关键词 氧化低密度脂蛋白 记忆cd8+t细胞 自身免疫性糖尿病
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记忆CD8^+ T细胞与造血干细胞移植免疫
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作者 侯军 王健民 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第1期87-89,共3页
移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)是异基因造血干细胞移植(allogeneic haematopoietic stem celltransplantation,Allo-HSCT)的主要并发症,主要由供者T淋巴细胞介导,如何有效控制GVHD,从而提高移植患者的生存率和生活质... 移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)是异基因造血干细胞移植(allogeneic haematopoietic stem celltransplantation,Allo-HSCT)的主要并发症,主要由供者T淋巴细胞介导,如何有效控制GVHD,从而提高移植患者的生存率和生活质量一直是研究热点。记忆CD8+T细胞来源于效应CD8+T细胞,至少分为两个亚群:中央型记忆T细胞和效应型记忆T细胞,两者在功能上和游走性方面均有不同。记忆CD8+T细胞依赖IL-2、IL-7和IL-15等细胞因子支持而稳定生存,当再次遇到能迅速地增生和分化为效应细胞并参与二次免疫应答,在骨髓移植后GVHD的维持中起着重要作用。记忆性干细胞表达CD44LoCD62Lhi,具有自我复制更新的能力,在受到刺激时可产生效应细胞和所有记忆性细胞亚群。供、受者抗原提呈细胞对异体反应性记忆T细胞的发生和调节起不同的作用。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 移植物抗宿主病 记忆cd8^+t细胞 移植免疫
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糖皮质激素对体外中央记忆性CD8^+ T淋巴细胞的诱导分化作用 被引量:4
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作者 陈颖诗 张旭 +3 位作者 彭治林 罗海华 张辉 张译文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1666-1671,共6页
目的:以糖皮质激素对人CD8^+ T淋巴细胞的诱导作用为线索,探究其对体外CD8^+ 中央记忆性T淋巴细胞(central memory T cells,T_(CM))的诱导分化作用,以期为CD8^+ T_(CM)过继性免疫疗法提供新的扩增方案。方法:通过密度梯度离心法分离健... 目的:以糖皮质激素对人CD8^+ T淋巴细胞的诱导作用为线索,探究其对体外CD8^+ 中央记忆性T淋巴细胞(central memory T cells,T_(CM))的诱导分化作用,以期为CD8^+ T_(CM)过继性免疫疗法提供新的扩增方案。方法:通过密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,经磁珠和流式细胞术分选出初始CD8^+ T细胞,将细胞使用细胞因子激活之后分为对照组和实验组,在实验组中加入不同浓度的2种糖皮质激素(醋酸可的松和氢化可的松),进行体外培养,最后通过流式细胞术检测2组细胞中CD8^+ T_(CM)的诱导分化情况,并通过CFSE染色判断细胞增殖情况,通过早期凋亡试剂Annexin V染色判断药物本身对CD8^+ T细胞的毒性作用。结果:浓度梯度实验发现,1μmol/L醋酸可的松对CD8^+ T_(CM)表现出良好的诱导效果,氢化可的松在0.5μmol/L的诱导效果较好。分别在体外培养的第3天和第6天,CFSE染色法检测细胞的增殖情况,经统计学分析发现实验组和对照组之间的差异无统计学显著性,表明糖皮质激素不影响细胞的自然增殖。Annexin V染色法表明,这2种药物无显著的促进凋亡作用,对淋巴细胞毒性小。结论:糖皮质激素在体外对人CD8^+ T_(CM)具有良好的诱导作用。这为改善过继免疫治疗中T_(CM)的体外扩增提供新的参考方法,并且在理论上加深对糖皮质激素生物学功能的理解。 展开更多
关键词 中央记忆cd8+t细胞 糖皮质激素 免疫治疗 细胞分化
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GDF11在体外扩增CD8^+记忆干性T细胞的作用 被引量:2
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作者 马星如 陈颖诗 +4 位作者 林颖彤 张旭 罗海华 刘超 潘婷 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期762-768,共7页
目的:探讨生长分化因子11(GDF11)在体外诱导扩增具有干细胞特性的记忆性T细胞(memory stem T cells,Tscm)中的作用,从而进一步提高免疫过继治疗的疗效。方法:通过密度梯度离心的方法分离健康人的外周血单个核细胞,然后用磁珠分选获得CD8... 目的:探讨生长分化因子11(GDF11)在体外诱导扩增具有干细胞特性的记忆性T细胞(memory stem T cells,Tscm)中的作用,从而进一步提高免疫过继治疗的疗效。方法:通过密度梯度离心的方法分离健康人的外周血单个核细胞,然后用磁珠分选获得CD8^+T细胞;随后将所得的细胞分为实验组和对照组,实验组中加入等体积、不同浓度的GDF11,对照组中加入等体积的PBS缓冲液,最后分别在不同时点通过流式细胞术检测2组细胞中Tscm的扩增情况。结果:在CD8^+T细胞的体外扩增实验中,GDF11可以显著扩增CD8^+T细胞;在CD8^+T细胞的体外培养实验中,GDF11可以显著提高Tscm在CD8^+T细胞中的比例。结论:GDF11可以有效地在体外扩增CD8^+Tscm,为提高免疫过继治疗的效率提供了新的方法。 展开更多
关键词 生长分化因子11 cd8+记忆干性t细胞 过继免疫治疗
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TWS119联合细胞因子促进CD8^+记忆性T细胞分化及功能 被引量:2
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作者 申春一 张震 +1 位作者 田永贵 张毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期435-439,445,共6页
目的:探讨TWS119联合不同组合细胞因子对CD8^+T细胞分化、表面分子表达、细胞因子分泌及抗凋亡能力的影响。方法:采用密度梯度离心法获取健康供者外周血中单个核细胞,磁珠分选CD8^+T细胞。体外采用IL-7、IL-15、IL-21及TWS119等不同组... 目的:探讨TWS119联合不同组合细胞因子对CD8^+T细胞分化、表面分子表达、细胞因子分泌及抗凋亡能力的影响。方法:采用密度梯度离心法获取健康供者外周血中单个核细胞,磁珠分选CD8^+T细胞。体外采用IL-7、IL-15、IL-21及TWS119等不同组合方式培养。采用流式细胞术检测CD8^+T细胞亚群比例、表面分子表达水平、细胞内因子分泌及细胞凋亡情况。结果:与其他组合相比较,IL-7+IL-21+TWS119联合处理CD8+T细胞后,干细胞样T细胞亚群比例显著增加;同时,CD8^+T细胞表面激活型标志物CD28和CD27表达水平增加,抑制型分子PD-1和Tim-3表达水平下调(P<0. 05);同时,采用IL-7+IL-21+TWS119处理显著增加CD8^+T细胞中胞内因子IFN-γ和TNF-α的分泌水平(P<0. 05)以及显著降低凋亡细胞的比例(P<0. 05)。结论:TWS119联合细胞因子IL-7和IL-21促进CD8+T细胞向记忆亚群分化,同时增强其抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 cd8^+记忆t细胞 tWS119 细胞因子 分化 功能
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干细胞样记忆性CD8^+T细胞的生物学特性研究进展 被引量:6
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作者 陈孟嘉 冯辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1403-1406,共4页
干细胞样记忆性T细胞(TSCM)是一种新型记忆细胞亚群,TSCM具有类似干细胞样自我更新能力,能够在体内长期存活,并在抗原刺激下迅速分化为成熟的中枢记忆、效应记忆和效应T细胞。TSCM在临床患者和小鼠模型中均可检出且参与相关疾病的发生... 干细胞样记忆性T细胞(TSCM)是一种新型记忆细胞亚群,TSCM具有类似干细胞样自我更新能力,能够在体内长期存活,并在抗原刺激下迅速分化为成熟的中枢记忆、效应记忆和效应T细胞。TSCM在临床患者和小鼠模型中均可检出且参与相关疾病的发生与发展。本文对CD8^+TSCM生物学特性进行总结,重点探讨CD8^+TSCM表型和转录特征、参与CD8^+TSCM分化的细胞因子和信号通路,及其在免疫相关疾病和肿瘤免疫治疗中的应用价值。 展开更多
关键词 细胞记忆t细胞 cd8^+记忆t细胞 自身免疫性疾病 肿瘤
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