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激动性CD40抗体通过调节Th1/Th2平衡增强抗肿瘤作用的机制研究 被引量：2
1
作者 郑凯源 黄飞 +2 位作者 陆礼 张骜 付蔚华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期163-166,共4页
目的:探讨激动性CD40抗体中单链抗体(CD40Sc Fv)和单克隆抗体(CD40m Ab)抑制小鼠乳腺癌细胞生长情况及对癌组织中Th1和Th2平衡的改变,分析通过调节Th1/Th2平衡达到抗肿瘤作用的机制。方法:将含CD40Sc Fv基因片段的重组质粒转化至Rosett... 目的:探讨激动性CD40抗体中单链抗体(CD40Sc Fv)和单克隆抗体(CD40m Ab)抑制小鼠乳腺癌细胞生长情况及对癌组织中Th1和Th2平衡的改变,分析通过调节Th1/Th2平衡达到抗肿瘤作用的机制。方法:将含CD40Sc Fv基因片段的重组质粒转化至Rosetta大肠杆菌中,诱导表达并经纯化后获得有功能的CD40Sc Fv蛋白,行SDS-PAGE和Western blot检测。体外培养小鼠乳腺癌4T1细胞,在Balb/C小鼠皮下成瘤建立模型,分为CD40Sc Fv组、CD40m Ab组和生理盐水组(NS组),分别给予CD40Sc Fv、CD40m Ab和生理盐水,观察各组小鼠肿瘤体积的变化。取出瘤体组织,ELISA法检测肿瘤组织上清中IL-12的浓度。提取肿瘤组织浸润淋巴细胞(TILs),应用流式细胞技术检测TILs中Th1与Th2的比例。结果:诱导表达的CD40Sc Fv鉴定表达成功,分子大小约为27KDa,蛋白纯化后经BCA测定浓度为1.12 mg/mL。CD40Sc Fv组与CD40m Ab组肿瘤大小分别为(3.044±0.239)cm^3与(2.749±0.261)cm^3,均小于NS组的(3.933±0.326)cm^3,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD40Sc Fv组、CD40m Ab组肿瘤组织中IL-12浓度分别为(396.27±48.13)pg/mL、(457.63±58.37)pg/mL,均显著高于NS组的(79.51±14.97)pg/mL,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD40Sc Fv组与CD40m Ab组的Th1/Th2细胞比值分别为6.32±0.87与5.54±0.71,均显著高于NS组的1.79±0.38,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:激动性CD40抗体在体内通过调节Th1与Th2的比例,发挥抑制肿瘤生长的作用,其中通过促进DC活化后分泌IL-12是影响肿瘤微环境中Th1/Th2平衡的重要机制之一。 展开更多
关键词 激动性cd40抗体 肿瘤微环境 辅助性T淋巴细胞
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CD40抗体——一种新型免疫佐剂的机制及应用研究进展 被引量：2
2
作者 朱雅倩 杨唐斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期329-332,共4页
抗体是基础生命科学研究领域不可或缺的工具。CD40信号转导通路参与了抗体的合成与分泌,抗CD40抗体可通过激活CD40信号通路,极大地增强抗原尤其是半抗原的免疫原性,是一种新型、有潜能的免疫佐剂,并且其抗原表达与抗体制备过程相对简单... 抗体是基础生命科学研究领域不可或缺的工具。CD40信号转导通路参与了抗体的合成与分泌,抗CD40抗体可通过激活CD40信号通路,极大地增强抗原尤其是半抗原的免疫原性,是一种新型、有潜能的免疫佐剂,并且其抗原表达与抗体制备过程相对简单、毒性小,可用于常规免疫和疫苗的生产。本文综述了抗CD40抗体佐剂的特性、作用机理及其影响因素和应用。 展开更多
关键词 cd40抗体 佐剂 免疫原性 疫苗 影响因素
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CpG-ODN联合抗CD40抗体活化小鼠调节性B细胞抑制CD4＋T细胞增殖
3
作者 王铿 陶磊 +4 位作者 苏剑冰 张悦阳 邹斌华 王祎媛 李晓娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1164-1167,1173,共5页
目的分析CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合抗CD40抗体刺激后的调节性B细胞(Breg)对其免疫调节功能的影响。方法用流式细胞分选仪分选小鼠脾脏CD5+CD1 dhighBreg与CD5-CD1 dlowB细胞亚群,CpG-ODN联合抗CD40抗体激活24 h,再与纯化的CD4+T细... 目的分析CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合抗CD40抗体刺激后的调节性B细胞(Breg)对其免疫调节功能的影响。方法用流式细胞分选仪分选小鼠脾脏CD5+CD1 dhighBreg与CD5-CD1 dlowB细胞亚群,CpG-ODN联合抗CD40抗体激活24 h,再与纯化的CD4+T细胞共培养,流式细胞术检测活化后的Breg及对照CD5-CD1 dlowB细胞亚群白细胞介素10(IL-10)的表达,以及共培养抗CD3抗体联合抗CD28抗体激活的CD4+T细胞的增殖与γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果 CpG-ODN联合抗CD40抗体激活的CD5+CD1 dhighBreg亚群与CD4+T细胞共培养时能明显抑制活化的CD4+T细胞的增殖,同时IFN-γ的水平降低;而CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激后的对照B细胞亚群则不能抑制CD4+T细胞的增殖与IFN-γ分泌。CD5+CD1 dhigh Breg亚群在CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激24 h,IL-10的表达水平明显高于CD5-CD1 dlowB细胞亚群。结论体外CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激后的CD5+CD1 dhighBreg亚群通过分泌IL-10抑制CD4+T细胞的活化。 展开更多
关键词 调节性B细胞 CPG寡脱氧核苷酸 抗cd40抗体 免疫抑制 cd4+T细胞
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活化型抗CD40抗体对人成熟和未成熟DC的不同作用
4
作者 张婷 刘书逊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第1期21-21,共1页
CD40为48000的跨膜糖蛋白细胞，CD40L为其配体，分属于TNF-α受体／TNF-α家族成员。树突状细胞（DC）、巨噬细胞、上皮细胞、造血祖细胞以及活化的CD8^＋细胞都表达CD40。而CIMOL集中表达于活化的T细胞、B细胞和血小板表面。在免疫应... CD40为48000的跨膜糖蛋白细胞，CD40L为其配体，分属于TNF-α受体／TNF-α家族成员。树突状细胞（DC）、巨噬细胞、上皮细胞、造血祖细胞以及活化的CD8^＋细胞都表达CD40。而CIMOL集中表达于活化的T细胞、B细胞和血小板表面。在免疫应答中，CD40与CD40L相互作用是B细胞活化的最重要共刺激信号，并能活化未成熟DC使之具有免疫原性，上调CIM^＋T细胞免疫应答。因此，人们关注于CD40单克隆抗体的治疗作用并发现其在一系列床前实体肿瘤和淋巴瘤模型中具有治疗潜能。该实验利用人离体混合淋巴细胞培养体系发现抗CIM0活化型抗体能促进LPS或TNF-α（TLR活化剂）诱导的成熟DC的凋亡．从而削弱了成熟DC产生特异性T细胞应答的能力，具有重要的免疫调节功能。 展开更多
关键词 cd40抗体 B细胞活化 未成熟 DC T细胞免疫应答 cd8^+细胞 cd40L TNF-α 细胞培养体系 免疫调节功能
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抗CD40L单克隆抗体对哮喘大鼠血液和淋巴液调节性T细胞的影响
5
作者 石涛 吴福玲 冯学斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期968-971,共4页
目的:研究抗CD40L单克隆抗体(抗CD40L mAb)对哮喘大鼠外周血和淋巴液中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)数量及其功能的影响。方法:抗CD40L mAb处理血液和淋巴液中的单个核细胞(MNCs),流式细胞仪(FCM)检测MNCs中CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的... 目的:研究抗CD40L单克隆抗体(抗CD40L mAb)对哮喘大鼠外周血和淋巴液中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)数量及其功能的影响。方法:抗CD40L mAb处理血液和淋巴液中的单个核细胞(MNCs),流式细胞仪(FCM)检测MNCs中CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中IL-10和TGF-β1的含量。结果:体外培养72 h后,淋巴液来源MNCs中CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例均明显高于血液来源的MNCs,末次激发后各组淋巴液和血液来源MNCs中CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg比例随细胞收集时间距末次激发时间延长呈先升高后降低的趋势;哮喘组淋巴液和血液来源MNCs中CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg比例均显著低于正常对照组和抗CD40L mAb组(P<0.05);末次激发后0、12 h收集的血液MNCs培养上清中抗CD40L mAb组TGF-β1的水平显著高于哮喘组和正常对照组(P<0.05);末次激发后24 h收集的淋巴液来源MNCs培养上清中抗CD40L mAb组IL-10的水平显著高于哮喘组和正常对照组(P<0.05)。结论:抗CD40L mAb促进CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞增殖,并在哮喘激发早期(0、12 h)促进血液来源CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞分泌TGF-β1,哮喘激发后期(24 h)促进淋巴液来源CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞分泌IL-10。 展开更多
关键词 哮喘 抗cd40L单克隆抗体 cd4+ cd25+ FOXP3+调节性T细胞 IL-10 TGF-β1
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抗人CD40单克隆抗体偶联纳米胶束药物载体系统的构建及其生物学特性
6
作者 郑毅 于洋 +3 位作者 瞿秋霞 黄沁 邱利焱 张学光 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期552-558,共7页
目的:将抗人CD40单克隆抗体5C11与3种含有不同反应基团的聚合胶束(polymeric micelle,PM)偶联,构建相应5C11偶联的聚合胶束(5C11 coupled polymeric micelle,PM-5C11),筛选出其中最适合与5C11偶联的PM,并观察该偶联物的生物学特性。方法... 目的:将抗人CD40单克隆抗体5C11与3种含有不同反应基团的聚合胶束(polymeric micelle,PM)偶联,构建相应5C11偶联的聚合胶束(5C11 coupled polymeric micelle,PM-5C11),筛选出其中最适合与5C11偶联的PM,并观察该偶联物的生物学特性。方法:分别合成3种不同化学结构的聚合物材料,制备相应PM,与5C11偶联后制备PM-5C11,选择其中偶联率和生物安全性均较高的作为最适PM-5C11。将最适PM-5C11与人Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株作用,观测其生物学活性及其被Daudi细胞摄取的能力。结果:成功制备了分别含对甲苯磺酸酯基、丙烯基、羧基的3种PM,其中含对甲苯磺酸酯基和羧基的PM与5C11的偶联率均明显高于含丙烯基的PM的偶联率[(28.08±2.24)%、(29.06±1.37)%vs(21.26±1.04)%,P<0.05];由于含羧基的PM在制备过程中易残留细胞毒性物质,故选取含对甲苯磺酸酯基的PM作为最适PM。相应的最适PM成功偶联5C11形成PM-5C11,最适PM-5C11显示出5C11原有的生物学活性,并且可被Daudi细胞摄取。结论:构建的3种PM中,含对甲苯磺酸酯基的PM在生物安全性、偶联率及相应PM-5C11的生物学活性方面最优,可作为构建纳米药物载体的最佳选择。 展开更多
关键词 cd40单克隆抗体 聚合胶束 纳米药物载体 肿瘤免疫治疗 BURKITT淋巴瘤 DAUDI细胞
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鸡尾酒抗体D2-40/CD34-CK对淋巴结检出数量不足结直肠癌标本的临床病理评价 被引量：8
7
作者 刘仙花 余英豪 +7 位作者 齐兴峰 吴在增 胡顺奇 熊喜生 向娟 郑智勇 曲利娟 叶显宗 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期14-18,共5页
目的探讨鸡尾酒抗体D2-40/CD34-CK双重免疫组化染色在淋巴结检出数量不足的结直肠癌(colorectal cancer,CRC)标本脉管侵犯评估中的应用及意义。方法收集133例淋巴结检出数量<12枚的CRC标本,分别行HE染色及鸡尾酒抗体双重免疫组化染色... 目的探讨鸡尾酒抗体D2-40/CD34-CK双重免疫组化染色在淋巴结检出数量不足的结直肠癌(colorectal cancer,CRC)标本脉管侵犯评估中的应用及意义。方法收集133例淋巴结检出数量<12枚的CRC标本,分别行HE染色及鸡尾酒抗体双重免疫组化染色,比较两种方法在脉管侵犯筛查效果中的差异,并分析应用鸡尾酒抗体免疫组化染色证实的脉管侵犯与临床病理特征及患者总生存期(overall survival,OS)的关系。结果 (1)鸡尾酒抗体D2-40/CD34-CK双重免疫组化染色及HE染色对脉管侵犯的检出率分别为42. 9%(57/133)和21. 8%(29/133),差异有显著性(P <0. 001)。(2)鸡尾酒抗体D2-40/CD34-CK双重免疫组化法证实的脉管侵犯与Dukes分期、浸润深度、临床分期、淋巴结转移、肿瘤出芽相关(P <0. 05)。(3)脉管侵犯、侵犯位置深度、程度及脉管侵犯灶数≤2个灶且癌栓细胞数量≥5. 5个与患者OS密切相关(P <0. 05)。结论鸡尾酒抗体D2-40/CD34-CK双重免疫组化染色对脉管侵犯评估优于常规HE染色切片观察,与肿瘤分期、淋巴结转移及出芽情况密切相关,是患者预后的独立影响因素,可作为淋巴结检出数量不足CRC病例的补充检测指标。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 鸡尾酒抗体D2-40/cd34-CK 脉管侵犯 预后 临床病理
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活化CD40-CD40L通路联合Docetaxel对乳腺癌细胞增殖的影响
8
作者 李洪胜 杨波 +3 位作者 何伟星 彭俊琴 卢敏莹 钱朋飞 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期527-529,共3页
目的:探讨活化淋巴细胞活化的共刺激通路CD40-CD40L联合化疗药Docetaxel对乳腺癌细胞增殖的影响。方法:用rhCD40L活化CD40-CD40L共刺激通路,联合Docetaxel,用MTT法测定CD40+的乳腺癌细胞株M231、M435细胞的增殖;采用碘化丙啶(PI)掺入法... 目的:探讨活化淋巴细胞活化的共刺激通路CD40-CD40L联合化疗药Docetaxel对乳腺癌细胞增殖的影响。方法:用rhCD40L活化CD40-CD40L共刺激通路,联合Docetaxel,用MTT法测定CD40+的乳腺癌细胞株M231、M435细胞的增殖;采用碘化丙啶(PI)掺入法测定细胞周期。结果:rhCD40L可抑制乳腺癌细胞M231、M435增殖,合用Docetaxel时乳腺癌细胞M231、M435的增殖受到进一步抑制,测定细胞周期G1期细胞数量明显增加(P<0.05),S期细胞数量下降(P<0.05)。结论:活化CD40-CD40L通路能抑制孔腺癌细胞的增殖,这种抑制作用具周期特异性,主要将乳腺癌细胞增殖阻滞在G1期,可提高乳腺癌细胞对Docetaxel的敏感性,两者具有抑制肿瘤细胞的协同效应。 展开更多
关键词 乳腺癌 共剌激通路 抗cd40配体单克隆抗体 多西它赛 细胞周期
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阻断CD40-CD40L信号通路对小鼠肺移植术后闭塞性细支气管炎的影响 被引量：4
9
作者 陈荣卷 陈其瑞 +1 位作者 许江南 丁跃中 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第2期258-264,共7页
目的本研究使用抗CD40L抗体(克隆号:MR1)阻断CD40-CD40L信号通路,利用小鼠原位左肺移植模型,对比其与传统免疫抑制剂环孢素/甲泼尼龙对小鼠术后移植物闭塞性细支气管炎(obliterative bronchiolitis,OB)的治疗效果,并进一步评估其对移植... 目的本研究使用抗CD40L抗体(克隆号:MR1)阻断CD40-CD40L信号通路,利用小鼠原位左肺移植模型,对比其与传统免疫抑制剂环孢素/甲泼尼龙对小鼠术后移植物闭塞性细支气管炎(obliterative bronchiolitis,OB)的治疗效果,并进一步评估其对移植物术后损伤的影响及相应机制,为临床肺移植术后治疗方法提供新思路。方法构建小鼠原位左肺移植模型,以野生型Balb/c小鼠作为供体小鼠,野生型C57BL/6小鼠作为受体小鼠。移植术后10 d,牺牲小鼠,采用苏木精/伊红(hematoxylineosin,HE)染色、Masson染色以及中性粒细胞特异性染色(抗髓过氧化物酶),观察各组移植左肺的组织病理学改变,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测移植物中白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)mRNA的表达水平的变化。结果术后10 d,注射了环孢素/甲泼尼龙和抗CD40L抗体治疗的小鼠,移植左肺外观体积增大;病理结果显示抗CD40L抗体治疗组较环孢素/甲泼尼龙治疗组炎性细胞浸润和OB现象得到有效缓解(P<0.05),中性粒细胞浸润显著减少(P<0.01);抗CD40L抗体治疗组移植物中IL-17A mRNA表达水平,较环孢素/甲泼尼龙治疗组显著降低(P<0.01)。结论利用抗CD40L抗体阻断CD40-CD40L信号通路能够有效保护移植物细支气管上皮,缓解小鼠肺移植术后急性排斥和OB反应以及小气道损伤,且效果优于传统抑制剂环孢素/甲泼尼龙。 展开更多
关键词 小鼠原位左肺移植 抗cd40L抗体(MR1) 环孢素/甲泼尼龙 闭塞性细支气管炎
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CD40-CD40L信号通路在移植免疫中的应用与进展 被引量：2
10
作者 董红锰 白纯 +1 位作者 李先亮 贺强 《器官移植》 CAS CSCD 2016年第4期308-311,共4页
CD40-CD40L信号通路在特异性免疫中是一条重要的细胞信号传导通路,它参与体液免疫和细胞免疫的调节。动物实验表明抗CD40L单克隆抗体(m Ab)阻断CD40与CD40L的结合,从而阻断CD40-CD40L信号的传导,具有抑制器官移植排斥反应的作用。近年来... CD40-CD40L信号通路在特异性免疫中是一条重要的细胞信号传导通路,它参与体液免疫和细胞免疫的调节。动物实验表明抗CD40L单克隆抗体(m Ab)阻断CD40与CD40L的结合,从而阻断CD40-CD40L信号的传导,具有抑制器官移植排斥反应的作用。近年来抗CD40Lm Ab在临床试验中出现的血栓并发症导致其应用受到了质疑。随着人们对CD40-CD40L信号通路的认识不断深入,尤其是新的抗CD40m Ab的应用,使得克服与之相关的血栓并发症成为可能,加之其在动物器官移植模型中表现出良好的应用前景,相信这将会进一步推动器官移植免疫耐受及免疫抑制剂方案的发展。本文就CD40-CD40L信号通路在器官移植方面取得的进展进行综述。 展开更多
关键词 cd40-cd40L 抗cd40L单克隆抗体 急性排斥反应 免疫耐受
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