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升血小板胶囊对免疫性血小板减少性紫癜CD_4^+CD_(25)^+Treg细胞的影响 被引量:16
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作者 何牧卿 何牧群 郭文坚 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第2期422-425,共4页
目的:探讨升血小板胶囊对免疫性血小板减少性紫癜患者外周血CD+4CD+25Treg细胞计数和分泌因子水平的影响。方法:选取医院收治的免疫性血小板减少性紫癜患者66例,以随机数字法分为两组;对照组常规泼尼松治疗,观察组在对照组的基础上服用... 目的:探讨升血小板胶囊对免疫性血小板减少性紫癜患者外周血CD+4CD+25Treg细胞计数和分泌因子水平的影响。方法:选取医院收治的免疫性血小板减少性紫癜患者66例,以随机数字法分为两组;对照组常规泼尼松治疗,观察组在对照组的基础上服用升血小板胶囊,对比临床疗效;并分别于治疗前后抽取患者空腹静脉血,以流式细胞法测定CD+4CD+25Fox P3+Treg细胞计数,以ELISA试剂盒测定IL-10及TGF-β1血清含量。结果:两组患者的总有效率无显著差异,但观察组的整体临床疗效和显效率均显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组患者外周血CD+4CD+25Fox P3+Treg细胞计数比和血清IL-10、TGF-β1血清含量无显著差异(P>0.05);治疗后,两组患者各项指标均有不等程度的升高,且观察组显著高于对照组(P<0.05)。结论:CD+4CD25调节性T细胞数量减少或功能缺陷可能参与了免疫性血小板减少性紫癜的发病进程,升血小板胶囊可能能够通过该环节发挥治疗作用。 展开更多
关键词 升血小板胶囊 免疫性血小板减少性紫癜 ^^cd4^+cd25^+调节性T细胞 IL-10 TGF-β1
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炎症性肠病患者外周血CD4^+CD25^+Treg细胞及其特异标志物Foxp3表达水平的研究 被引量:6
2
作者 孙可歆 李永哲 +4 位作者 赵臣 刘定华 胡朝军 佟大伟 张蜀澜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期71-74,共4页
目的:通过检测炎症性肠病(IBD)不同病期患者以及对照组外周血CD4+CD25+Treg及其特异标志物Foxp3的表达,来分析与IBD疾病活动性关系,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在IBD发病机制中的作用。方法:52例IBD患者和35例正常对照组分别应用流式细胞... 目的:通过检测炎症性肠病(IBD)不同病期患者以及对照组外周血CD4+CD25+Treg及其特异标志物Foxp3的表达,来分析与IBD疾病活动性关系,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在IBD发病机制中的作用。方法:52例IBD患者和35例正常对照组分别应用流式细胞术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的百分率测定和外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达水平。结果:IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞比例明显低于疾病缓解期患者和正常对照组(P<0.01);活动期IBD患者中使用激素和/或免疫抑制剂与未使用激素和/或免疫抑制剂结果差异有统计学意义;IBD患者外周血单个核细胞(PBMC)中Foxp3 mRNA表达水平低于缓解期和正常人,差异有显著性(P<0.05);缓解期Foxp3 mRNA水平与正常人差异无显著性(P>0.05);IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达率及PBMC中的Foxp3 mR-NA表达水平与疾病活动指数评分呈负相关性。结论:活动期IBD患者外周血CD4+CD25+Treg细胞及Foxp3 mRNA表达下调,而恢复期其表达回升,且二者呈正相关,并与临床活动评分呈负相关,因此认为CD4+CD25+Treg细胞和Foxp3可能参与疾病的发生发展,与疾病的活动性密切相关。 展开更多
关键词 炎症性肠病 外周血单个核细胞 ^^cd4^+cd25^+T调节细胞 FOXP3
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花姜酮对小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞分化功能的影响及机制 被引量:6
3
作者 陈菲菲 毛山 +3 位作者 史莹 周丹阳 张金梅 谷伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期205-209,共5页
目的:建立小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞的体外诱导及培养方法,同时探讨花姜酮(Zerumbone)对Treg细胞的分化、分泌功能的影响及其机制。方法:从BABL/c小鼠的脾脏分离、纯化CD4^+CD62L^+T细胞,加入转化生长因子(transforming growth factor,TG... 目的:建立小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞的体外诱导及培养方法,同时探讨花姜酮(Zerumbone)对Treg细胞的分化、分泌功能的影响及其机制。方法:从BABL/c小鼠的脾脏分离、纯化CD4^+CD62L^+T细胞,加入转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β(5 ng/mL)、白细胞介素(interleukin,IL)-2(30μg/mL)促进CD4^+CD62L^+T细胞向Treg细胞分化。Treg细胞被分为5组:正常组、模型对照组、Zerumbone(1μmol/L)组、Zerumbone(10μmol/L)组、Zerumbone(30μmol/L)组。流式细胞术检测各组Treg细胞的比例,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测IL-10含量,Foxp3、IL-10 mRNA的表达用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测。结果:本实验方法使Treg细胞的诱导比例明显升高(P<0.01)。与模型对照组相比,Zerumbone组的Treg细胞比例呈剂量依赖性升高(P均<0.05)。IL-10蛋白的表达与模型对照组比较也呈剂量依赖性升高(P均<0.05),Foxp3、IL-10 mRNA的表达同样升高(P<0.05),其中Zerumbone(30μmol/L)组升高最明显(P<0.01)。结论:在体外实验中,Zerumbone可以促进BABL/c小鼠体内的CD4^+CD62L^+T细胞向Treg细胞分化,并促进IL-10蛋白的表达,其机制可能与诱导CD4^+CD25^+Treg特异性转录因子Foxp3的表达有关。 展开更多
关键词 花姜酮 ^^cd4^+cd62L^+T细胞 ^^cd4^+cd25^+treg 白细胞介素-10
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S180腹水癌小鼠肿瘤浸润淋巴细胞中CD4^+CD25^+Treg细胞在肿瘤逃逸中的作用 被引量:4
4
作者 历春 李欣 +2 位作者 贾婷 孙际童 付海英 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1094-1097,共4页
目的:研究肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25+Treg细胞及免疫监视功能的变化,探讨CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法:建立小鼠S180腹水癌模型,采集S180腹水癌小鼠TIL、脾脏细胞及对照组小鼠脾脏细胞,采用流式细胞术检测CD4+... 目的:研究肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25+Treg细胞及免疫监视功能的变化,探讨CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法:建立小鼠S180腹水癌模型,采集S180腹水癌小鼠TIL、脾脏细胞及对照组小鼠脾脏细胞,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞、CD8+T细胞、NK细胞的数量及NKG2D的表达水平,采用RT-PCR方法检测Foxp3 mRNA的表达水平,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CD8+T细胞的杀伤功能。结果:与对照组小鼠比较,S180腹水癌小鼠脾脏、TIL中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达均明显增高(P<0.05),并且肿瘤组小鼠TIL中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达较肿瘤组小鼠脾脏均明显增高(P<0.05);TIL中CD8+T细胞数量明显增高(P<0.05),其杀伤功能却有所下降;TIL中NK细胞数量及NKG2D表达均明显增高(P<0.05)。结论:肿瘤局部CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,可能是肿瘤逃避免疫监视的机制之一。 展开更多
关键词 cd4+cd25+treg细胞 FOXP3 肿瘤浸润淋巴细胞 肿瘤免疫
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CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+) Treg细胞及其相关因子在梅尼埃病中的意义 被引量:4
5
作者 杨晓蓉 杨启梅 +1 位作者 韩想利 张文 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期469-472,共4页
目的研究CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(Treg)及其相关因子在梅尼埃病中的临床意义。方法回顾性纳入2019年8月至2021年5月收治的45例梅尼埃病患者(其中缓解期13例,发作期32例;单侧36例,双侧9例;听力分期1期3例、2期20例、3期16例... 目的研究CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(Treg)及其相关因子在梅尼埃病中的临床意义。方法回顾性纳入2019年8月至2021年5月收治的45例梅尼埃病患者(其中缓解期13例,发作期32例;单侧36例,双侧9例;听力分期1期3例、2期20例、3期16例、4期6例),以同期健康人群30例作为对照组。采用流式细胞术检测两组患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比及转化生长因子-β(TGF-β)、叉头状转录因子p3(Foxp3)mRNA相对表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素-10(IL-10)水平;分析CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞及其相关细胞因子TGF-β、Foxp3、IL-10与病情严重程度、不同听力分期和单双侧患耳的关系;Pearson相关性分析CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞表达与IL-10、TGF-β、Foxp3表达的相关性。结果梅尼埃病组患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比、外周血Foxp3 mRNA相对表达及血清IL-10水平明显低于健康对照组,外周血TGF-βmRNA相对表达则明显高于健康对照组,差异有统计学意义(均为P<0.05)。不同听力分期及单双侧梅尼埃病患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比及相关细胞因子表达组间差异均无统计学差异(P>0.05)。梅尼埃病患者CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞百分比与外周血TGF-β相对表达呈负相关(r=-0.704,P<0.05),与血清IL-10水平(r=0.679)和外周血Foxp3相对表达(r=0.725)呈正相关(P<0.05)。结论梅尼埃病患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞及相关细胞因子TGF-β、Foxp3、IL-10异常表达,可能与患者体内免疫抑制减弱有关,Treg细胞调控的细胞免疫可能是梅尼埃病的发病机制之一。 展开更多
关键词 梅尼埃病 ^^cd4^(+)cd25^(+)Foxp3^(+)treg细胞 TGF-β FOXP3 IL-10
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CD4^+CD25^+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究 被引量:7
6
作者 李爱华 邱国强 +4 位作者 顾伟英 凌云 翁开枝 谭琪 曹祥山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期439-442,共4页
目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4+CD25-T细胞转化为... 目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4+CD25+T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4+CD25+T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4+CD25+T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4+CD25+T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4+CD25+T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4+CD25+Foxp3+Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4+CD25+T细胞转化为CD4+CD25+Treg,提示CD4+CD25+Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 ^^cd4^+cd25^+treg FOXP3
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NOD小鼠糖尿病早期Th1细胞与CD4^+CD25^+Treg细胞的变化 被引量:3
7
作者 王弘珺 李质馨 +2 位作者 田洪艳 徐冶 刘忠平 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期888-891,共4页
目的研究Th1细胞和CD4+CD25+Treg细胞在NOD小鼠糖尿病早期的变化,并评价其作用。方法选择4周(A组)、8周(B组)和16周龄(C组)的雌性NOD小鼠,取脾、胸腺和胰腺组织,采用流式细胞术测定脾Th1和CD4+CD25+Treg细胞的比例,计算Th1/CD4+T、CD4+C... 目的研究Th1细胞和CD4+CD25+Treg细胞在NOD小鼠糖尿病早期的变化,并评价其作用。方法选择4周(A组)、8周(B组)和16周龄(C组)的雌性NOD小鼠,取脾、胸腺和胰腺组织,采用流式细胞术测定脾Th1和CD4+CD25+Treg细胞的比例,计算Th1/CD4+T、CD4+CD25+Treg/CD4+T和Th1/CD4+CD25+Treg的比值,再测定胸腺CD4–CD8–T、CD4+CD8+T、CD4–CD8+T和CD4+CD8–T细胞比例,计算CD25+Treg/CD4+CD8–T的比值。取胰腺组织,行HE染色和Foxp3免疫组化染色,观察胰腺病理学变化。结果 C组小鼠脾脏Th1细胞比例以及Th1/CD4+T和Th1/CD4+CD25+Treg比值明显高于A组和B组,但是A、B、C三组脾脏CD4+CD25+Treg细胞比例及CD4+CD25+Treg/CD4+T比值差异无统计学意义。三组间胸腺CD4–CD8–T、CD4+CD8+T、CD4–CD8+T和CD4+CD8–T细胞比例差异无统计学意义,但是B组和C组胸腺CD25+Treg/CD4+CD8–T比值明显高于A组。HE染色结果显示,B组和C组的胰岛周围可见淋巴细胞浸润,但胰岛周围淋巴细胞浸润部位免疫组化染色未见Foxp3阳性细胞。结论 NOD小鼠糖尿病早期外周Th1细胞呈进行性增加,但CD4+CD25+Treg细胞相对缺乏,考虑与NOD小鼠糖尿病进展有关。 展开更多
关键词 小鼠 近交NOD TH1细胞 cd4+cd25+调节性T细胞 糖尿病 1型
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低剂量环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞功能的影响 被引量:3
8
作者 李欣 崔永生 +1 位作者 刘白楠 李一 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期733-736,共4页
目的:研究低剂量环磷酰胺(CTX)单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响,探讨CD4+CD25+Treg细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组:CTX组... 目的:研究低剂量环磷酰胺(CTX)单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响,探讨CD4+CD25+Treg细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组:CTX组、肿瘤组、单纯对照组。采用CTX单次注射,观测各组肿瘤体积动态变化;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测各组小鼠脾脏Foxp3mRNA表达水平;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用LDH释放法检测脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)细胞的杀伤活性。结果:与未治疗肿瘤组相比,CTX治疗可延缓荷19dLewis肺癌小鼠的肿瘤生长;CTX组小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞数量低于肿瘤组(P<0.05);CTX组小鼠脾脏Foxp3mRNA表达水平明显低于肿瘤组(P<0.05);CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞功能明显高于肿瘤组(P<0.05);CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞杀伤活性比肿瘤组略高,但变化不显著(P>0.05)。结论:CTX单次注射可降低Lewis肺癌小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞的数量及Foxp3mRNA表达,使T淋巴细胞增殖功能及脾细胞中CTLs杀伤功能增强。 展开更多
关键词 环磷酰胺 ^^cd4^+cd25^+调节性T细胞 监测 免疫学
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肿瘤细胞对CD4^+CD25^+Treg细胞数量和功能的影响 被引量:1
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作者 李欣 杨巍 +2 位作者 付海英 张佳伦 李一 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1002-1006,共5页
目的:探讨肿瘤细胞与免疫细胞相互作用对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响。方法:建立Lewis肺癌细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养体系。Lewis肺癌细胞与不同浓度小鼠脾淋巴细胞共培养,分为4组:实验组Ⅰ(5×105个Lewis肺癌细胞与1×... 目的:探讨肿瘤细胞与免疫细胞相互作用对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响。方法:建立Lewis肺癌细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养体系。Lewis肺癌细胞与不同浓度小鼠脾淋巴细胞共培养,分为4组:实验组Ⅰ(5×105个Lewis肺癌细胞与1×106个淋巴细胞共培养)、对照组Ⅰ(1×106个淋巴细胞单独培养)、实验组Ⅱ(5×105个Lewis肺癌细胞与2×106个淋巴细胞共培养)、对照组Ⅱ(2×106个淋巴细胞单独培养);Lewis肺癌细胞与淋巴细胞共培养不同时间,采用3个时间点:24、48和72h;Lewis肺癌细胞培养上清与淋巴细胞共培养,选择培养上清浓度为20%和50%。采用流式细胞术检测了Lewis肺癌细胞与脾淋巴细胞共培养系统中CD4+CD25+Treg细胞数量变化,通过RT-PCR方法检测了共培养对Foxp3 mRNA表达的影响。结果:与对照组比较,实验组Ⅰ中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达明显增强(P<0.05),实验组Ⅱ中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达无明显变化(P>0.05);Lewis肺癌细胞与淋巴细胞培养24及48h可见CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3 mRNA表达明显升高(P<0.05),而72h后变化不明显;20%和50%Lewis肺癌细胞培养上清均可明显提高CD4+CD25+Treg数量及Foxp3 mRNA表达(P<0.05)。结论:肿瘤细胞及其培养上清可诱导CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,由肿瘤细胞所引起的CD4+CD25+Treg细胞产生及功能增强可能是肿瘤逃避免疫监视机制之一。 展开更多
关键词 ^^cd4^+cd25^+treg细胞 FOXP3 肿瘤免疫
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加味三甲散对被动皮肤致敏型大鼠外周血单核细胞CD4^+CD25^+Treg mRNA表达的影响 被引量:2
10
作者 郭静 段渠 +1 位作者 杜艾嫒 钟振东 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期666-668,共3页
目的:观察加味三甲散对被动皮肤致敏型大鼠外周血单核细胞CD4+CD25+Treg mRNA表达的影响。方法:60只成年SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,氯雷他定组和加味三甲散高、中、低剂量组,后5组均制作被动皮肤致敏模型。造模后氯雷他定组... 目的:观察加味三甲散对被动皮肤致敏型大鼠外周血单核细胞CD4+CD25+Treg mRNA表达的影响。方法:60只成年SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,氯雷他定组和加味三甲散高、中、低剂量组,后5组均制作被动皮肤致敏模型。造模后氯雷他定组按10 mL/kg剂量灌胃给予氯雷他定水溶液,加味三甲散高、中、低剂量组分别按38.0、19.0、9.5 g/kg剂量灌胃给予加味三甲散提取浓缩液,正常对照组和模型对照组灌胃给予等体积纯净水。每天1次,连续3周。实验结束时,收集各组大鼠血液,采用实时荧光定量PCR技术检测CD4+CD25+Treg mRNA的表达。结果:6组大鼠外周血单核细胞CD4+CD25+Treg mRNA的表达水平差异有统计学意义(F=92.170,P<0.001);与正常对照组比较,模型对照组大鼠外周血单核细胞CD4+CD25+Treg mRNA的表达降低;与模型对照组比较,加味三甲散高、中、低剂量组大鼠外周血单核细胞CD4+CD25+Treg mRNA的表达升高(P均<0.05)。结论:加味三甲散可上调被动皮肤致敏型大鼠外周血单核细胞异常下降的CD4+CD25+Treg mRNA的表达水平,对慢性荨麻疹患者外周血单核细胞中CD4+CD25+Treg细胞功能的缺陷可能具有一定的干预作用。 展开更多
关键词 加味三甲散 慢性荨麻疹 ^^cd4^+cd25^+treg基因 大鼠
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乙型肝炎患者治疗前后外周血CD4^+CD25^+Tregs TCR CDR3谱系漂移特征分析 被引量:6
11
作者 潘宗琴 吕红 +2 位作者 庄勤建 姚新生 邱隆敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期889-894,899,共7页
目的:探讨AHB患者急性期及恢复期、CHB患者恩替卡韦治疗前后外周血PBMC中CD4^+CD25^+Tregs TCR CDR3谱系漂移特征的变化。方法:采集4例正常人、3例AHB患者(急性期和恢复期)及4例CHB患者恩替卡韦治疗前后外周抗凝静脉血,分离外周血PBMC;... 目的:探讨AHB患者急性期及恢复期、CHB患者恩替卡韦治疗前后外周血PBMC中CD4^+CD25^+Tregs TCR CDR3谱系漂移特征的变化。方法:采集4例正常人、3例AHB患者(急性期和恢复期)及4例CHB患者恩替卡韦治疗前后外周抗凝静脉血,分离外周血PBMC;磁珠分选法分选CD4^+CD25^+Tregs,提取总RNA,逆转录合成c DNA;根据TCRβ链24个可变区基因(TRBV)家族设计相应的上游引物,并在β链恒定区(BC)设计一条共用的FAM荧光标记下游引物及对照引物。PCR扩增出24个包含完整CDR3区的TRBV家族的PCR产物,电泳鉴定目的片段;PCR产物送上海基康用毛细管电泳法进行基因扫描;用Peak Scanner Software v1.0软件分析研究对象TRBV家族CDR3谱系特征;采用配对t检验(paired-sample t test)检测AHB患者急性期及恢复期、CHB患者恩替卡韦治疗前后TRBV家族谱系漂移率差异。结果:3例AHB患者急性期呈现普遍谱系漂移的TRBV4、10、14、16、19家族在恢复期多转变为正态的多峰谱型,AHB患者恢复期外周血CD4^+CD25^+Tregs TRBV家族CDR3谱型漂移率显著低于急性期(t=9.456,P=0.011);TRBV8、11、13.2、15、16、18、20在3例CHB患者抗HBV治疗前出现克隆增生,TRBV1、5.2、6、12、14、24在3例CHB患者抗HBV治疗后出现克隆增生。CHB患者抗病毒治疗后TRBV家族CDR3谱型漂移率高于治疗前(t=-0.666,P=0.553)。结论:AHB患者急性期呈现谱系漂移的TRBV4、10、14、16、19家族在恢复期多转变为正态的多峰谱型,推测这种转变可能与HBsAg、HBeAg转阴相关。CHB患者在治疗前TRBV8、11、13.2、15、16、18、20家族克隆增生的Tregs可能通过下调机体的细胞免疫应答,阻碍病毒清除;随着药物导致病毒载量的显著下降,TRBV1、5.2、6、12、14、24家族克隆增生的Tregs可能更有助于诱导机体出现免疫耐受,导致HBV不能彻底清除。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 急性乙型肝炎 T淋巴细胞受体 互补决定区3 调节性T细胞 恩替卡韦
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自身免疫调节因子对CD4^+CD25^+Treg细胞的影响
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作者 杨巍 朱武飞 +3 位作者 和知非 魏晓曦 苏静波 李一 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期866-870,共5页
目的:观察自身免疫调节因子(AIRE)对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法:pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和... 目的:观察自身免疫调节因子(AIRE)对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法:pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达;采用ELISA法检测TGF-β1水平。结果:AIRE转染的RAW264.7细胞可直接或间接诱导CD4+CD25+Treg细胞的产生及Foxp3mRNA表达增强(P<0.05)。结论:表达在外周抗原提呈细胞(APCs)上的AIRE可直接和(或)间接影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导产生及功能,从而可能在外周免疫耐受中发挥重要作用。 展开更多
关键词 自身免疫调节因子 cd4+cd25+treg细胞 免疫耐受
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AIRE通过调控Notch1表达影响CD4^+CD25^+Treg的作用及其机制
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作者 吴静 杨巍 +3 位作者 孙际童 苏静波 魏晓曦 李一 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期983-986,共4页
目的:研究AIRE基因是否可通过调控Notch1的表达而影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导及功能,探讨AIRE在外周免疫耐受中的作用机制。方法:将RAW264.7细胞分为转染组和未转染组,采用脂质体法将pEGFPC3-AIRE质粒转入RAW264.7细胞,采用RT-PCR法检... 目的:研究AIRE基因是否可通过调控Notch1的表达而影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导及功能,探讨AIRE在外周免疫耐受中的作用机制。方法:将RAW264.7细胞分为转染组和未转染组,采用脂质体法将pEGFPC3-AIRE质粒转入RAW264.7细胞,采用RT-PCR法检测各组AIRE mRNA的表达及Notch1 mRNA表达的变化。将RAW264.7细胞分为转染组、转染并经Notch1抗体阻断组、阴性对照组及未转染并经Notch1抗体阻断组,分别采用FACS法及RT-PCR法检测各组RAW264.7细胞对CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3 mRNA表达的影响。结果:质粒成功转入RAW264.7细胞内。AIRE转染组较未转染组Notch1 mRNA表达增加。AIRE转染组较未转染组CD4+CD25+Treg细胞的数量及功能相关基因Foxp3 mRNA的表达水平均增加,经Notch1抗体阻断后,AIRE转染组与未转染组CD4+CD25+Treg细胞的数量及功能均较对照组降低。结论:AIRE可能通过上调RAW264.7细胞上Notch1的表达进而影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导产生及功能,从而在维持外周免疫耐受方面发挥一定的作用。 展开更多
关键词 自身免疫调节因子 NOTCH1 cd4+cd25+treg细胞
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CD4^+CD25^+Treg细胞在小鼠Lewis肺癌生长及转移中的作用 被引量:8
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作者 周奕辰 王金岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1712-1716,共5页
目的:利用Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型探讨CD4^+CD25^+Treg细胞在肺癌的生长与转移中的作用。方法:利用C57BL/6鼠建立Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型;流式细胞仪技术分析荷瘤鼠脾脏中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞的百分比和数量;过继回输CD4^+... 目的:利用Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型探讨CD4^+CD25^+Treg细胞在肺癌的生长与转移中的作用。方法:利用C57BL/6鼠建立Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型;流式细胞仪技术分析荷瘤鼠脾脏中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞的百分比和数量;过继回输CD4^+CD25^+Treg细胞观察肿瘤的生长,HE组织染色技术判明肺部转移性肿瘤结节;CD4^+CD25^+Treg细胞与LLC细胞共培养方法分析CD4^+CD25^+Treg细胞的作用机制。结果:荷瘤鼠脾脏中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞的细胞比例和数量均明显增加。与对照组荷瘤鼠相比,过继回输CD4^+CD25^+Treg细胞后荷瘤鼠的肿瘤体积相对增大,生存缩短,生存率显著降低;HE组织染色技术显示过继回输CD4^+CD25^+Treg细胞后荷瘤鼠的肺部转移性肿瘤结节数量显著增多。细胞共培养及划痕实验结果显示,CD4^+CD25^+Treg细胞非直接促进LLC细胞的迁移。结论:CD4^+CD25^+Treg细胞以非直接作用于肿瘤细胞方式促进Lewis肺癌的肿瘤生长与转移。 展开更多
关键词 LEWIS肺癌 肿瘤生长与转移 ^^cd4^+cd25^+treg细胞
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肺癌患者CD4^+ CD25^(high) Foxp3^+调节性T细胞的格局变化及意义 被引量:20
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作者 刘荣军 葛棣 +4 位作者 丁建勇 熊思东 赵强 张镭 储以微 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期531-534,共4页
目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T... 目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T细胞的比例。Real-tim e PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果:肺癌患者PBMC及TIL中CD4+/CD8+比值降低;而CD4+CD25h ighT细胞在CD4+T细胞中所占比例升高;Foxp3基因仅在TIL中高表达,而在PBMC中低或不表达,表明肿瘤局部的CD4+CD25h ighT细胞主要是CD4+CD25h ighFoxp3+Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论:CD4+CD25h ighFoxp3+Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高,可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8+T细胞的杀伤效应,最终发挥免疫抑制效应相关。 展开更多
关键词 肺癌 ^^cd4^+ ^^cd25^HIGH ^^FOXP3^+调节性T细胞 肿瘤浸润淋巴细胞 FOXP3基因
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重症肌无力胸腺中CD4^+ CD25^+ Treg细胞分布与数量变化的临床意义
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作者 邹志强 马铮 +3 位作者 蒋耀光 王如文 赵云平 龚太乾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期770-772,共3页
目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺内CD4+ CD25+天然调节性T细胞(nTreg)的分布和数量变化及其临床意义。方法采用免疫组化染色观察50例MG胸腺和20例正常胸腺CD25的表达,同时采用流式细胞技术检测10例MG患者胸腺与外周血... 目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺内CD4+ CD25+天然调节性T细胞(nTreg)的分布和数量变化及其临床意义。方法采用免疫组化染色观察50例MG胸腺和20例正常胸腺CD25的表达,同时采用流式细胞技术检测10例MG患者胸腺与外周血中CD4+CD25+T细胞在CD4+T细胞中的比例。结果MG增生胸腺中CD25表达与对照胸腺相比显著升高(P<0.05),与MGFA分期呈正相关。增生胸腺中CD4+ CD25+细胞占CD4+细胞比例明显高于对照胸腺(P<0.05),而外周血中CD4+CD25+T细胞比例无显著变化(P>0.05)。结论胸腺内nTreg细胞数量的下降与MG自身耐受的破坏有重要的关系,进一步研究胸腺内nTreg细胞数量和功能的变化有助于了解MG的发病机制。 展开更多
关键词 重症肌无力 ^^cd4^+cd25^+调节性T细胞 免疫组化染色 流式细胞技术
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浆细胞性乳腺炎患者外周血CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞变化 被引量:31
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作者 付嘉 熊斌 +3 位作者 司传平 方艳秋 谭岩 李继斌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期821-824,共4页
目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制。方法:将58例浆细胞乳腺炎患者分成三组:其中急性组13例(22%)、亚急性组25例(43%... 目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制。方法:将58例浆细胞乳腺炎患者分成三组:其中急性组13例(22%)、亚急性组25例(43%)和慢性组20例(34%)。并设正常对照组20例及乳腺癌对照组16例。以流式细胞术检测各型PCM患者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg细胞百分率;实时荧光定量RT-PCR检测转录因子Foxp3表达及ELISA检测TGF-β水平。结果:三组PCM组与正常组相比,外周血CD4+CD25+CD127-Treg数量,外周血PBMC中Foxp3表达及血浆TGF-β水平均下降(P<0.05),其中急性PCM组下降最为明显(P<0.01),乳腺癌组三项指标均升高(P<0.05)。结论:浆细胞性乳腺炎患者的CD4+CD25+CD127-Treg数量及功能有所下降。 展开更多
关键词 浆细胞性乳腺炎 ^^cd4^+cd25^+cd127^-调节性细胞 FOXP3
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人外周血CD4^+ CD25^+调节性T细胞的分离、鉴定和功能特征 被引量:18
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作者 杨江华 张永祥 +3 位作者 王芳 喻荣彬 苏川 孙南雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期252-254,257,共4页
目的:分离人外周血CD4+CD25+Treg细胞,并检测其功能。方法:RT-PCR技术检测CD4+CD25+Treg细胞中Foxp3的mRNA表达;与CD8+T细胞和CD4+CD25-T细胞共同培养,或加入外源性IL-2及IL-4,检测其抑制功能;流式细胞术检测IFN-γ、IL-4和IL-10。结果:... 目的:分离人外周血CD4+CD25+Treg细胞,并检测其功能。方法:RT-PCR技术检测CD4+CD25+Treg细胞中Foxp3的mRNA表达;与CD8+T细胞和CD4+CD25-T细胞共同培养,或加入外源性IL-2及IL-4,检测其抑制功能;流式细胞术检测IFN-γ、IL-4和IL-10。结果:CD4+CD25+Treg细胞高表达Foxp3,主要分泌IL-10,能够抑制CD8+T细胞和CD4+CD25-T细胞的增殖,高浓度IL-2能够阻断CD4+CD25+Treg细胞的抑制功能。结论:CD4+CD25+Treg细胞是一群具有免疫抑制功能的调节性T细胞,这种抑制作用能够被高浓度IL-2阻断。 展开更多
关键词 cd4+cd25+treg细胞 免疫抑制 IL-2
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中国健康人外周血中具有CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)特征的调节性T细胞频率 被引量:22
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作者 王盈 周磊明 +9 位作者 宫菊丽 周明奎 沈方伟 郑晓虹 张玮 庄鸣华 卢伟 钟平 潘启超 康来仪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期816-818,共3页
目的:初步确定健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)频率,为临床相关疾病的研究及Treg的分选提供参考。方法:采集312名8~60岁(5个年龄组)、不同性别健康人的静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4+C... 目的:初步确定健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)频率,为临床相关疾病的研究及Treg的分选提供参考。方法:采集312名8~60岁(5个年龄组)、不同性别健康人的静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞频率,并观察细胞内Foxp3转录因子的表达。结果:健康人CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞在外周血中约占CD4+T细胞的(6.55±0.11)%,各年龄组之间有差异(P=0.015),组内性别之间也存在统计学意义(P<0.05);CD25nt/hiCD127lo细胞特异性地表达Foxp3转录因子。结论:初步确定了中国健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo表达特征的细胞频率,为Treg细胞的临床研究奠定了基础;CD25nt/hiCD127lo作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,可在分选时排除其他细胞干扰,获得较完整的Treg细胞。 展开更多
关键词 中国健康人 ^^cd4^+cd25^+调节性T细胞 cd127 FOXP3
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补肾活血方联合地屈孕酮对复发性自然流产患者CD4^+CD25^+调节性T细胞及IL-10、TGF-β1表达的影响 被引量:16
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作者 党慧敏 刘艳巧 +2 位作者 安鹏 刘润侠 陈薇 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第11期2716-2720,共5页
目的:探讨补肾活血方联合地屈孕酮治疗复发性自然流产(RSA)的疗效及免疫调节机制。方法:选择肾虚血瘀型RSA妊娠患者62例,随机分为中药组(21例)、西药组(20例)、中西药组(21例)。中药组采用自拟补肾活血方治疗,西药组采用地屈孕酮治疗,... 目的:探讨补肾活血方联合地屈孕酮治疗复发性自然流产(RSA)的疗效及免疫调节机制。方法:选择肾虚血瘀型RSA妊娠患者62例,随机分为中药组(21例)、西药组(20例)、中西药组(21例)。中药组采用自拟补肾活血方治疗,西药组采用地屈孕酮治疗,中西药组采用两者联合治疗。同时选正常妊娠者20例为正常对照组,不予任何药物治疗。观察各组治疗前后临床疗效、流式细胞仪测定外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率,ELISA法检测血清IL-10、TGF-β1水平。结果:中西药组临床综合疗效优于其余两组,但差异无统计学意义(P>0.05),中药组和西药组疗效比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。治疗组各组治疗后较治疗前外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率、血清IL-10及TGF-β1水平均明显升高(P<0.05)。治疗后与中药组、西药组相比,中西药组外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率、血清IL-10及TGF-β1水平升高(P<0.05),中药组与西药组间比较,则均无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾活血方联合地屈孕酮治疗肾虚血瘀型RSA临床疗效确切,从整体上调节免疫耐受状态,使妊娠得以维持。 展开更多
关键词 补肾活血方 反复自然流产 ^^cd4^+cd25^+treg细胞 IL-10 TGF-Β1
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