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金水缓纤方调控CD38/NAD^(+)-SIRT1轴延缓AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的机制研究
1
作者
蔡宇
王宇
+3 位作者
沈俊岭
游梦月
韩瑞婷
余海滨
《海南医科大学学报》
北大核心
2025年第15期1153-1162,共10页
目的:探讨金水缓纤方通过CD38/NAD^(+)-SIRT1轴调控AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、金水缓纤方组、阳性对照组和CD38抑制剂组,每组10只。采用气管滴注博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型;造模...
目的:探讨金水缓纤方通过CD38/NAD^(+)-SIRT1轴调控AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、金水缓纤方组、阳性对照组和CD38抑制剂组,每组10只。采用气管滴注博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型;造模后28 d开始灌胃给药,每日1次,连续给药14 d后取材;采用H&E、Masson染色法观察、评估肺组织炎症和纤维化程度;免疫组化法评估肺组织中αSMA、COLⅢ的蛋白表达情况。免疫荧光法检测大鼠肺组织中p21及SPC的表达;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法测定肺组织细胞衰老情况;QPCR检测IL-1α、IL-8、P53、P21、CD38、SIRT1基因水平变化。Western blot法测定肺组织中E-cad、N-cad、p21、p53、CD38、SIRT1的蛋白表达。采用WST-8法检测肺组织中NAD+的表达水平。结果:与空白组比较,模型组的肺组织中炎症及纤维化评分均显著升高;αSMA、COLⅢ蛋白表达显著增加,提示大鼠肺组织纤维化的发生。肺组织N-cad蛋白表达显著上调,E-cad蛋白表达下降,提示肺组织发生了上皮间质转化;肺组织呈现显著SA-β-gal蓝染增多,p53、p21 mRNA水平及蛋白表达显著增加,IL-1α、IL-8 mRNA水平显著上调,肺组织中衰老细胞积累并高表达衰老蛋白及衰老相关分泌表型;同时,免疫荧光结果显示,p21与SPC共表达,p21高表达于AEC2s中。组织CD38 mRNA水平及蛋白表达显著增加,SIRT1 mRNA水平及蛋白表达显著下调,NAD^(+)表达水平显著下降,提示肺纤维化的中可能伴随着NAD+的消耗。与模型组相比,各给药组肺组织中炎症及纤维化评分均明显降低,αSMA、COLⅢ蛋白表达显著下降;N-cad蛋白表达显著下调,E-cad蛋白增加;肺组织SA-β-gal蓝染明显减轻,细胞衰老程度得到明显改善,p53、p21、IL-1α、IL-8衰老相关基因及蛋白水平明显下调;CD38 mRNA水平及蛋白表达下降,SIRT1表达水平及组织NAD+表达水平上升。结论:金水缓纤方能够减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化及肺组织炎症反应,改善胶原沉积,可能与调控CD38表达,提高组织细胞NAD^(+)水平,激活SIRT1蛋白,延缓组织AEC2s细胞衰老有关。
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关键词
金水缓纤方
肺纤维化
细胞衰老
cd
38/
NAD^(+)
-sirt
1
Ⅱ型肺泡上皮细胞
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职称材料
题名
金水缓纤方调控CD38/NAD^(+)-SIRT1轴延缓AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的机制研究
1
作者
蔡宇
王宇
沈俊岭
游梦月
韩瑞婷
余海滨
机构
河南中医药大学
河南中医药大学第一附属医院呼吸科
出处
《海南医科大学学报》
北大核心
2025年第15期1153-1162,共10页
基金
河南省中医药研究重大专项资助项目(2022ZYZD04)
郑州市协同创新中心专项资助项目(2023XTCX043)
+1 种基金
河南省自然科学基金资助项目(222300420221)
河南省中医药科学研究专项资助项目(2021JDZY102)。
文摘
目的:探讨金水缓纤方通过CD38/NAD^(+)-SIRT1轴调控AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、金水缓纤方组、阳性对照组和CD38抑制剂组,每组10只。采用气管滴注博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型;造模后28 d开始灌胃给药,每日1次,连续给药14 d后取材;采用H&E、Masson染色法观察、评估肺组织炎症和纤维化程度;免疫组化法评估肺组织中αSMA、COLⅢ的蛋白表达情况。免疫荧光法检测大鼠肺组织中p21及SPC的表达;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法测定肺组织细胞衰老情况;QPCR检测IL-1α、IL-8、P53、P21、CD38、SIRT1基因水平变化。Western blot法测定肺组织中E-cad、N-cad、p21、p53、CD38、SIRT1的蛋白表达。采用WST-8法检测肺组织中NAD+的表达水平。结果:与空白组比较,模型组的肺组织中炎症及纤维化评分均显著升高;αSMA、COLⅢ蛋白表达显著增加,提示大鼠肺组织纤维化的发生。肺组织N-cad蛋白表达显著上调,E-cad蛋白表达下降,提示肺组织发生了上皮间质转化;肺组织呈现显著SA-β-gal蓝染增多,p53、p21 mRNA水平及蛋白表达显著增加,IL-1α、IL-8 mRNA水平显著上调,肺组织中衰老细胞积累并高表达衰老蛋白及衰老相关分泌表型;同时,免疫荧光结果显示,p21与SPC共表达,p21高表达于AEC2s中。组织CD38 mRNA水平及蛋白表达显著增加,SIRT1 mRNA水平及蛋白表达显著下调,NAD^(+)表达水平显著下降,提示肺纤维化的中可能伴随着NAD+的消耗。与模型组相比,各给药组肺组织中炎症及纤维化评分均明显降低,αSMA、COLⅢ蛋白表达显著下降;N-cad蛋白表达显著下调,E-cad蛋白增加;肺组织SA-β-gal蓝染明显减轻,细胞衰老程度得到明显改善,p53、p21、IL-1α、IL-8衰老相关基因及蛋白水平明显下调;CD38 mRNA水平及蛋白表达下降,SIRT1表达水平及组织NAD+表达水平上升。结论:金水缓纤方能够减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化及肺组织炎症反应,改善胶原沉积,可能与调控CD38表达,提高组织细胞NAD^(+)水平,激活SIRT1蛋白,延缓组织AEC2s细胞衰老有关。
关键词
金水缓纤方
肺纤维化
细胞衰老
cd
38/
NAD^(+)
-sirt
1
Ⅱ型肺泡上皮细胞
Keywords
Jinshui Huanxian Formula
Pulmonary fibrosis
Cellular senescence
cd
38/
NAD^(+)
-sirt
1
TypeⅡalveolar epithelial cells
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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作者
出处
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1
金水缓纤方调控CD38/NAD^(+)-SIRT1轴延缓AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的机制研究
蔡宇
王宇
沈俊岭
游梦月
韩瑞婷
余海滨
《海南医科大学学报》
北大核心
2025
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