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人CD34分化抗原转录调控序列的克隆与调控表达
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作者 李江琪 郭坤元 +2 位作者 周凌 段连宁 杜江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第4期279-281,共3页
目的 :克隆有特异调控活性的人CD34基因 5′端转录调控序列。方法 :根据已知的CD34抗原基因 5′ 端启动子调控序列 ,自行设计 2对引物 ,用巢式 PCR方法从染色体DNA中成功的克隆 6 6 1bp长度的CD34抗原转录调控序列 (CD34TRS) ,CD34TRS... 目的 :克隆有特异调控活性的人CD34基因 5′端转录调控序列。方法 :根据已知的CD34抗原基因 5′ 端启动子调控序列 ,自行设计 2对引物 ,用巢式 PCR方法从染色体DNA中成功的克隆 6 6 1bp长度的CD34抗原转录调控序列 (CD34TRS) ,CD34TRS片段插入启动子报告质粒 pEGFP 1,观察重组质粒pCD34EGFP在造血系细胞和非造血系细胞中的调控表达作用。结果 :经限制性内切酶酶切鉴定及DNA序列分析证实 ,克隆的CD34启动子序列与文献报道的顺序基本一致 ,能特异调控EGFP基因在造血细胞系细胞K5 6 2中表达。结论 :所克隆的人CD34分化抗原转录调控序列有特异调控真核基因表达作用 ,本研究为构建造血干细胞特异性表达载体奠定了基础。 展开更多
关键词 cd34抗原转录调控序列 克隆 肿瘤 基因治疗
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人CD34抗原基因克隆及鉴定
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作者 舒翠玲 汲言山 +3 位作者 沈倍奋 王建安 孙启鸿 胡美茹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期136-138,共3页
CD34抗原是一个阶段特异性白细胞分化抗原,在早期造血调控方面起着重要的作用。本文采用RT-PCR方法,从高效表达CD34抗原的KG-la细胞系中成功地克隆出CD34抗原全长cDNA,并对重组基因进行了酶切鉴定和序列... CD34抗原是一个阶段特异性白细胞分化抗原,在早期造血调控方面起着重要的作用。本文采用RT-PCR方法,从高效表达CD34抗原的KG-la细胞系中成功地克隆出CD34抗原全长cDNA,并对重组基因进行了酶切鉴定和序列分析。结果表明除胞内区有一碱基改变,其它序列与报道完全一致。 展开更多
关键词 cd34 抗原 基因克隆 序列分析 鉴定
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人CD34抗原基因在HL-60细胞中的转移和表达
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作者 王建安 舒翠玲 +1 位作者 赖春宁 沈倍奋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期368-371,共4页
本实验构建了编码人CD34抗原基因的逆转录病毒表达载体pLXSN-CD34,经Lipofectin基因转移法将其导入ψ2和PA317病毒包装细胞,通过G418选择培养筛选后获得产生重组病毒的包装细胞株PA317/CD34。采用共培养和病毒上清直接感染两种方式,分... 本实验构建了编码人CD34抗原基因的逆转录病毒表达载体pLXSN-CD34,经Lipofectin基因转移法将其导入ψ2和PA317病毒包装细胞,通过G418选择培养筛选后获得产生重组病毒的包装细胞株PA317/CD34。采用共培养和病毒上清直接感染两种方式,分别转染HL-60细胞,并应用PCR,APAAP免疫组化染色和间接免疫荧光法检测人CD34抗原基因的转移和表达。结果表明,人CD34抗原基因在HL-60细胞中成功地获得表达,为进一步研究其结构与功能的关系,对早期造血的调控作用,鉴定筛选相应单克隆抗体和干细胞移植提供了有效的途径。 展开更多
关键词 cd34抗原 转录病毒载体 HL-60细胞 基因转移 基因表达
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小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3的细胞特征及基因表达谱分析 被引量:13
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作者 乐飞 张国平 +2 位作者 金惠铭 史连国 殷莲华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1340-1344,共5页
目的 :对一种小鼠脑组织来源的血管内皮细胞株bEnd .3的主要细胞特征进行研究并做血管内皮细胞生物学功能基因芯片分析。方法 :利用倒置显微镜、扫描和透射电子显微镜观察细胞形态特征 ;免疫细胞化学法显示血管内皮细胞特异性表面标志 ;... 目的 :对一种小鼠脑组织来源的血管内皮细胞株bEnd .3的主要细胞特征进行研究并做血管内皮细胞生物学功能基因芯片分析。方法 :利用倒置显微镜、扫描和透射电子显微镜观察细胞形态特征 ;免疫细胞化学法显示血管内皮细胞特异性表面标志 ;ELISA定量检测PGE2 ;流式细胞术、MTT法研究增殖和凋亡、血管内皮细胞基因芯片研究正常培养bEnd 3基因表达谱。结果 :bEnd 3具备多种典型的微血管内皮细胞 (MVEC)特征 :细胞呈多边形或梭型、呈铺路石样生长 ;存在管腔样结构 (TLS)和毛细血管样网络 ,细胞表面有丰富的微绒毛 ;vW因子、CD34阳性 ;CD31、CD36、CD10 5等也有不同程度的表达 ;细胞高水平分泌前列腺素E2 (PGE2 ) ;多种与正常血管功能密切相关的基因也有不同程度的表达。结论 :bEnd .3保留了MVEC的基本特性 ,可用于心脑血管疾病。 展开更多
关键词 bEnd.3细胞 内皮 von WILLEBRAND因子 抗原 cd34 寡核苷酸序列分析
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