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人参总皂甙协同造血生长因子体外诱导CD34^+造血干/祖细胞扩增与分化的作用 被引量:16
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作者 王建伟 王亚平 +1 位作者 王莎莉 姜蓉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期959-963,共5页
为探讨人参总皂甙(totalsaponins of panaxginseng,TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC)扩增与分化的作用,收集人脐血、骨髓细胞并采用StemsepTM干细胞分选系统分离纯化CD34+HSC/HPC,用不同剂量TSPG加入不同组合... 为探讨人参总皂甙(totalsaponins of panaxginseng,TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34+造血干/祖细胞(HSC/HPC)扩增与分化的作用,收集人脐血、骨髓细胞并采用StemsepTM干细胞分选系统分离纯化CD34+HSC/HPC,用不同剂量TSPG加入不同组合的造血生长因子进行培养,检测细胞总数、CD34+细胞和CD33+细胞比例及集落形成细胞总数(CFC)、粒系祖细胞(CFU-GM)数量变化。结果显示:10-70μg/mlTSPG均可不同程度地提高脐血细胞总数、CFC数和CD34+细胞数,50μg/ml是最佳刺激浓度,可使细胞总数、CFC数和CD34+细胞数分别增至(2470.5±79.96)×103、(53.96±4.29)×100%和(21.86±3.09)×100%;20μg/ml是液体培养诱导骨髓CD34+细胞向粒系分化的最佳浓度,可使细胞总数、CFU-GM和CD33+细胞分别增至(133.2±9.03)×103、(26.78±1.91)×100%和(16.98±1.73)×100%;甲基纤维素半固体培养检测显示,TSPG(10-50μg/ml)均能提高CD34+细胞形成CFU-GM的集落产率,以TSPG20μg/ml效果最为明显。结论:合适剂量的TSPG能够促进CD34+造血干/祖细胞体外扩增与定向诱导分化。 展开更多
关键词 人参总皂甙 ^cd34^+造血/祖细胞 细胞扩增 细胞分化
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脐血CD34^+造血干/祖细胞基因表达图谱的研究 被引量:3
2
作者 李群良 蔡海波 +1 位作者 刘启威 谭文松 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期59-62,共4页
目的通过脐血CD34+造血干/祖细胞的基因表达分析,理解造血干/祖细胞生物学特性。方法利用Min-iMACS免疫磁珠法从脐血细胞中分离CD34+造血干/祖细胞,提取总RNA,用SMART-PCR技术从微量RNA中扩增产生足够量的cDNA用于高密度点阵膜分析检测C... 目的通过脐血CD34+造血干/祖细胞的基因表达分析,理解造血干/祖细胞生物学特性。方法利用Min-iMACS免疫磁珠法从脐血细胞中分离CD34+造血干/祖细胞,提取总RNA,用SMART-PCR技术从微量RNA中扩增产生足够量的cDNA用于高密度点阵膜分析检测CD34+造血干/祖细胞表达的基因。结果在所检测的588个基因中,发现63个基因具有显著的表达水平,其中18个基因强表达。这些基因主要涉及造血干细胞增殖、分化、应激响应、凋亡、转录调节以及细胞周期等。结论对理解脐血干/祖细胞生物学性质以及指导造血干细胞体外培养提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 脐血 ^cd34^+造血/祖细胞 SMART—PCR 高密度点阵膜
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青蒿琥酯对K562细胞和脐血CD34^+造血干/祖细胞的选择性作用 被引量:1
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作者 林雪梅 田雪莲 +3 位作者 杨慧 宋姝丹 王莎莉 王亚平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1939-1942,共4页
目的探讨青蒿琥酯(artesunate,AST)对K562细胞和正常造血干/祖细胞是否具有选择性作用。方法选用K562细胞及脐血CD34+造血干/祖细胞,加入不同浓度AST。MTT法检测药物对上述两种细胞增殖的影响;甲基纤维素半固体培养法考察AST对其体外扩... 目的探讨青蒿琥酯(artesunate,AST)对K562细胞和正常造血干/祖细胞是否具有选择性作用。方法选用K562细胞及脐血CD34+造血干/祖细胞,加入不同浓度AST。MTT法检测药物对上述两种细胞增殖的影响;甲基纤维素半固体培养法考察AST对其体外扩增和多向分化能力的影响;以流式细胞术Annexin V-FITC-PI双染定量检测细胞凋亡率;Western blot方法检测BCR-ABL融合蛋白的表达。结果青蒿琥酯对K562细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用(P<0.01),并存在时效和量效关系,对集落抑制作用明显(P<0.01)。青蒿琥酯在12.5~25μg/ml作用48h对脐血CD34+造血干/祖细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用不明显(P>0.05),对集落生成亦无明显抑制作用(P>0.05)。经青蒿琥酯作用48h,K562细胞BCR-ABL蛋白以剂量依赖方式被降解(P<0.01)。结论青蒿琥酯在一定浓度范围内对K562细胞具有选择性抑制增殖和诱导凋亡的作用,对脐血CD34+造血干/祖细胞影响较小。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 K562细胞 ^cd34^+造血/祖细胞 增殖 分化 凋亡
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2型重组腺相关病毒对人脐血CD34^+造血干/祖细胞的转导效率研究 被引量:3
4
作者 陈焱 陈方平 +3 位作者 彭建强 吴小兵 吴新华 傅敢 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期576-578,共3页
为探讨 2型重组腺相关病毒 (rAAV 2 )载体能否有效地转导脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,采用rAAV 2 /GFP感染经免疫磁珠法分离的脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,在荧光显微镜下观察GFP的表达。结果显示 ,转导 19小时后感染复数 (MOI)为 2× 1... 为探讨 2型重组腺相关病毒 (rAAV 2 )载体能否有效地转导脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,采用rAAV 2 /GFP感染经免疫磁珠法分离的脐血CD34+造血干 /祖细胞 ,在荧光显微镜下观察GFP的表达。结果显示 ,转导 19小时后感染复数 (MOI)为 2× 10 5时 ,CD34+细胞GFP基因的表达率为 4 3%。结论 :rAAV 2能有效地转导脐血CD34+造血干 /祖细胞。 展开更多
关键词 2型重组腺相关病毒 脐血 造血细胞 祖细胞 ^cd34^+细胞 AAV-2
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CD34^+造血干/祖细胞蛋白质组双向电泳图谱的建立 被引量:5
5
作者 魏永强 冯茹 +1 位作者 易正山 刘启发 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第11期1161-1164,共4页
目的探讨骨髓(BM)和动员后外周血(MPB)CD34+细胞的蛋白质差异表达情况。方法应用免疫磁珠法分离、纯化正常人骨髓和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员后外周血单个核细胞(MNCs)中的CD34+细胞,冻融法提取CD34+细胞的全细胞蛋白质进行双向电... 目的探讨骨髓(BM)和动员后外周血(MPB)CD34+细胞的蛋白质差异表达情况。方法应用免疫磁珠法分离、纯化正常人骨髓和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员后外周血单个核细胞(MNCs)中的CD34+细胞,冻融法提取CD34+细胞的全细胞蛋白质进行双向电泳,并对电泳结果进行图像分析。结果纯化后CD34+细胞的平均纯度为(92.33±2.65)%;每次纯化获得的CD34+细胞数平均为(1.12±0.42)×106个。优化的双向电泳技术获得较为理想的蛋白质组图谱,显示出不同来源的CD34+细胞存在不同的蛋白质表达。结论免疫磁珠联合双向电泳适用于造血干/祖细胞的蛋白质组研究,骨髓和动员后外周血CD34+细胞的蛋白质表达存在差异。 展开更多
关键词 ^cd34^+ 造血细胞 造血祖细胞 蛋白质组 双向电泳图谱 基因表达 外周血 单个核细胞
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人类CD34^+造血干/祖细胞的分子生物学特性 被引量:3
6
作者 奚永志 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期317-323,共7页
造血干/祖细胞(HSC/HPC)以有序的不同年龄等级结构状态存在于体内,它们的增殖、分化、成熟及程序死亡是一个连续的动态过程。CD34抗原是目前所能认识表达在HSC/HPC表面上的最早抗原分子,对其分子结构的研究使人... 造血干/祖细胞(HSC/HPC)以有序的不同年龄等级结构状态存在于体内,它们的增殖、分化、成熟及程序死亡是一个连续的动态过程。CD34抗原是目前所能认识表达在HSC/HPC表面上的最早抗原分子,对其分子结构的研究使人们更加认识到CD34+HSC/HPC的不同功能亚群、表达范围及其它生物学特征,诸如细胞周期状态、光散射性、造血生长因子受体(HGFsR)P糖蛋白(Pgn)或多药耐药基因(MDR)的表达以及对活性染料的摄取等,从而完善并更新了现代HSC的概念及正常造血调控的基本模式。 展开更多
关键词 cd34抗原 造血 祖细胞 分子生物学特性
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血管内皮生长因子体外诱导CD34^+造血干/祖细胞信号传导与转录活化因子的活化
7
作者 叶枫 叶大风 +2 位作者 谢幸 陈怀增 吕卫国 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期12-17,共6页
目的通过对血管内皮生长因子(VEGF)诱导CD34+造血干/祖细胞内信号传导与转录活化因子(STAT)活化的研究,探索VEGF作用于CD34+造血干/祖细胞的分子机制及其信号传导途径。方法利用磁活化细胞分选系统(MACS)分离并纯化脐血CD34+造血干/祖细... 目的通过对血管内皮生长因子(VEGF)诱导CD34+造血干/祖细胞内信号传导与转录活化因子(STAT)活化的研究,探索VEGF作用于CD34+造血干/祖细胞的分子机制及其信号传导途径。方法利用磁活化细胞分选系统(MACS)分离并纯化脐血CD34+造血干/祖细胞,体外以重组人细胞因子VEGF(50ng/ml)持续刺激不同时间(0,15,30,45,60,90min)后,提取细胞总蛋白,用Westernblot检测CD34+造血干/祖细胞内STAT-3和STAT-5磷酸化;免疫细胞化学鉴定CD34+造血干/祖细胞表面VEGF受体-2(VEGFR2)的表达,以及VEGF刺激不同时间后CD34+造血干/祖细胞内磷酸化STAT-3和STAT-5有无发生转核;采用能与VEGFR2特异性结合的七肽ATWLPPR封闭VEGF与VEGFR2的结合,Westernblot观察STAT-3和STAT-5的磷酸化是否被相应阻断。结果Westernblot检测结果显示,CD34+细胞在VEGF刺激下,STAT-3和STAT-5均发生了磷酸化,50ng/mlVEGF作用15min后,即可检测到磷酸化的STAT-3和STAT-5的表达,并分别在30和45min时达到峰值;之后开始下降,到90min时均已检测不到,不同刺激时间组间有显著性差异(P=0.0001)。免疫细胞化学显示VEGF能诱导磷酸化STAT-3发生转核并且在作用30min时最为显著,不同刺激时间组间有显著性差异(P=0.0001),而磷酸化STAT-5在VEGF刺激的各时间组均未出现明显的转? 展开更多
关键词 ^cd34^+造血/祖细胞 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体 信号传导与转录活化因子
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脐血单个核细胞和CD34^+细胞体外扩增造血干/祖细胞
8
作者 王斌 康自珍 +1 位作者 迟占有 谭文松 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期592-596,共5页
考察了脐血单个核细胞 ( MNC)和 CD3 4 +富集细胞在 SCF+IL- 3 +IL- 6 +FL+Tpo细胞因子组合下的体外扩增特性。实验发现 :CD3 4 +富集细胞具有很高的扩增潜力 ,通过 3周培养总细胞扩增了 ( 883 .2± 3 2 2 .4)倍 ,而 MNC仅扩增了 ( ... 考察了脐血单个核细胞 ( MNC)和 CD3 4 +富集细胞在 SCF+IL- 3 +IL- 6 +FL+Tpo细胞因子组合下的体外扩增特性。实验发现 :CD3 4 +富集细胞具有很高的扩增潜力 ,通过 3周培养总细胞扩增了 ( 883 .2± 3 2 2 .4)倍 ,而 MNC仅扩增了 ( 5 3 .3± 6 .2 )倍。对比细胞集落生成和 CD3 4 +细胞的扩增发现 ,MNC的集落密度由最初的 ( 2 70 .9± 5 4 .9) CFCs/ 1 0 5cells上升至第 7天的( 1 496 .3± 41 7.7) CFCs/ 1 0 5cells,CD3 4 +细胞百分比则由最初的 ( 0 .99± 0 .1 8) %上升至第 7天的( 4.4± 1 .9) % ,而 CD3 4 +富集细胞在培养过程中 ,虽然集落总数和 CD3 4 +细胞总数始终呈上升趋势 ,但是其集落密度和 CD3 4 + 细胞百分比则始终呈下降趋势。在两种起始细胞培养中 ,CFU- GM(粒细胞 -巨噬细胞集落形成单位 )在集落中的含量逐渐增加 ,BFU- E(爆式红细胞集落形成单位 )含量则逐渐降低。在 3周的短期培养中 ,MNC可以得到更多的集落形成细胞 ( CFC)和 CD3 4 展开更多
关键词 造血/祖细胞 脐血 MNC ^cd34^+细胞 体外扩增
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人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响 被引量:6
9
作者 郝牧 漆佩静 +5 位作者 李刚 孟恒星 徐燕 李长虹 王亚非 邱录贵 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-75,共5页
目的探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响。方法将3.5×10~5个脐血CD34^+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经^(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠... 目的探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响。方法将3.5×10~5个脐血CD34^+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经^(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠体内,观察移植后6周内小鼠外周血象的变化情况。于移植后第6周处死小鼠,采用流式细胞术检测小鼠骨髓、脾脏及外周血人源细胞(hCD45^+)含量,并分别检测小鼠骨髓中人源淋巴系(CD3/CD19)、粒系(CD33)、单核系(CD14)、血小板(CD61)、红系(CD235a)等各系血细胞比例,比较间充质干细胞共移植对CD34^+细胞植入率的影响。结果移植后3周,两组小鼠外周血象开始有不同程度恢复;移植后6周,共移植组外周血白细胞和血小板计数均已达高峰,明显高于单移植组(P<0.05),两组小鼠的红细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。移植后6周,共移植组骨髓及外周血中人源细胞hCD45^+CD34^+比例分别为(42.66±2.57)%和(4.74±1.02)%,明显高于单移植组的(25.27±1.67)%和(1.19±0.54)%(P=0.006)。移植后6周,共移植组小鼠骨髓内的CD19^+、CD33^+、CD14^+、CD61^+和CD235a^+细胞比例均明显高于单移植组(P<0.05),CD3^+T淋巴细胞比例明显低于单移植组(P=0.003);CD19^+ B淋巴细胞得到优势扩增,明显高于其他各系血细胞比例(P<0.05)。结论脐带间充质干细胞与脐血CD34^+细胞共移植可促进造血干细胞的植入,缩短CD34^+细胞移植后造血恢复时间。 展开更多
关键词 人脐带间充质细胞 ^cd34^+细胞 造血重建 造血细胞移植
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人正常骨髓CD34^+造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力 被引量:2
10
作者 奚永志 孔繁华 +4 位作者 张双喜 金荔 陈兴国 唐佩弦 魏文 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期253-255,共3页
根据阳性选择策略,采用CIMS-100免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓CD34+造血细胞,然后将其在含Epo+GM-CSF+IL-3+IL-6+SCF(简EGIS)组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增4周,定期进... 根据阳性选择策略,采用CIMS-100免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓CD34+造血细胞,然后将其在含Epo+GM-CSF+IL-3+IL-6+SCF(简EGIS)组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增4周,定期进行单个核细胞计数、BFU-E及CFU-Mix的培养。经FACS鉴定所富集的CD34+造血细胞纯度平均>90%。人正常骨髓CD34+造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞,最高可扩增1770倍。与HPP-CFC和CFU-GM相反,BFU-E和CFU-Mix扩增量较低,最高仅为2.36和2.4倍,且仅在第1周出现,随后迅速减少至停止。 展开更多
关键词 cd34 造血细胞 体外扩增 造血祖细胞
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外周血CD34^+造血干细胞加适量T细胞输注进行HLA半相合的异体移植 被引量:4
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作者 梁辉 王昀 +3 位作者 郭若冰 程志英 薛惠良 顾龙君 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期28-30,53,共4页
对1例Ph+染色体的急淋患儿进行母子间HLA半相合的异体外周血造血干细胞移植 ,为避免由于HLA不相合所产生的由T细胞介导的严重移植物抗宿主病(GVHD) ,采用了CD34+细胞正性分离去除淋巴细胞 ;同时为避免由于T细胞过度去除而引起宿主抗移... 对1例Ph+染色体的急淋患儿进行母子间HLA半相合的异体外周血造血干细胞移植 ,为避免由于HLA不相合所产生的由T细胞介导的严重移植物抗宿主病(GVHD) ,采用了CD34+细胞正性分离去除淋巴细胞 ;同时为避免由于T细胞过度去除而引起宿主抗移植物反应(HVG)导致植入失败 ,在移植次日又加入部分T细胞 ,使病儿接受CD34 +细胞6×106/kg 和CD3 +细胞1.05×107/kg。结果 :随访1年来 ,红系、粒系和巨核系均恢复正常 ,临床上仅出现一过性的IIOaGVHD以及轻微的局限于口唇粘膜的cGVHD。STR位点DNA检验以及染色体检查 :移植后 +180天受体已从供体型嵌合体转为完全供体型 ,病儿获得植入成功。结果表明 ,常规剂量的CD34 +细胞移植加以适量CD3 +T细胞 ,可克服HLA部分不相配的难点 ,减轻GVHD ,同时也可避免由于过度的T细胞去除而出现的HVG。 展开更多
关键词 母子HLA半相合PBSCT ^cd34^+细胞纯化移植 ^部份cd3^+细胞同时回输 异体造血细胞移植
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免疫磁珠法纯化小鼠CD34^+造血干细胞 被引量:3
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作者 林芸 孟凡义 杨艺 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期908-909,共2页
目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞。方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力。结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%~85.38%),回收率47.54%(范... 目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞。方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力。结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%~85.38%),回收率47.54%(范围40.50%~54.31%),纯化前后细胞活力不受影响(P=0.169)。结论应用MiniMACS纯化小鼠骨髓可获得高纯度CD34+细胞,并不影响细胞活力。 展开更多
关键词 ^cd34^+ 免疫磁珠法 纯化 骨髓 造血细胞 移植物抗宿主病
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Flt3和c-kit在脐血CD34^+干/祖细胞中功能性表达及意义 被引量:1
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作者 马艳萍 邹萍 +1 位作者 肖娟 黄世昂 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期277-280,共4页
为了解作用于早期造血的细胞因子受体Flt3和c-kit在脐血CD34^+造血干/祖细胞中的表达及功能,从蛋白和基因水平对其进行了研究。采用常规双色直接免疫荧光标记法,使用流式细胞术测定新鲜分离的和体外不同培养时间的脐血CD34^+造血干/祖... 为了解作用于早期造血的细胞因子受体Flt3和c-kit在脐血CD34^+造血干/祖细胞中的表达及功能,从蛋白和基因水平对其进行了研究。采用常规双色直接免疫荧光标记法,使用流式细胞术测定新鲜分离的和体外不同培养时间的脐血CD34^+造血干/祖细胞中Flt3和c-kit蛋白水平的表达,用RT-PCR法测定Flt3和c-kit的mRNA水平表达,并在体外对受体功能进行了探讨。研究结果显示,新鲜脐血CD34^+细胞中(68.8±15.4)%为Flt3^+,(50.6±12.7)%为c-kit^+,随着体外培养时间的延长,二者表达逐渐下降。结论:脐血CD34^+造血干/祖细胞在体外液体培养条件下Flt3和c-kit阳性表达可维持2-3周,其配体FL和SCF在培养的第1周内对细胞扩增效果最显著。 展开更多
关键词 脐血 ^cd34^+细胞 造血/祖细胞 FLT3 C-KIT 细胞分子 受体-配体网络系统 直接免疫荧光标记法 流式细胞
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骨髓造血干/祖细胞及CD4^+/CD8^+比值联合测定在再生障碍性贫血患者诊疗中的价值 被引量:4
14
作者 赵艳明 张强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第8期1347-1349,共3页
目的:探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血T细胞亚群CD3+CD4+(CD4+)/CD3+CD8+(CD8+)比值和骨髓造血细胞体外集落形成的变化、相关性及其联合检测在AA患者临床诊疗中的价值。方法:应用甲基纤维素半固体体外集落试验对AA患者骨髓单个核细胞... 目的:探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血T细胞亚群CD3+CD4+(CD4+)/CD3+CD8+(CD8+)比值和骨髓造血细胞体外集落形成的变化、相关性及其联合检测在AA患者临床诊疗中的价值。方法:应用甲基纤维素半固体体外集落试验对AA患者骨髓单个核细胞培养,观察混合集落形成情况;流式细胞术分析AA患者外周血CD4+/CD8+阳性细胞比值变化,依据CD4+/CD8+比值将AA(59/70)患者分为比值正常型、比值倒置型和比值超高型三个免疫亚型。结果:59例有集落或集簇生成的AA患者,其中比值倒置型占45.8%,比值超高型占20.3%,AA患者组干细胞集落数低于同等条件下对照组的干细胞集落数(35.88对125.26,P<0.001);相关性分析,AA患者骨髓混合集落数与CD8+T细胞数呈负相关(P=0.027),与控制CD4+T细胞影响的CD4+/CD8+比值呈正相关。结论:通过对T细胞亚群CD4+/CD8+比值和骨髓造血干/祖细胞体外集落形成的联合检测可为AA患者临床诊断、分型、病情判断提供重要参考,为临床制订个体化治疗方案提供重要实验依据。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 骨髓造血/祖细胞 cd4+/cd8+比值
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CD34^+造血祖细胞的聚集、CXCR3 mRNA的检测及CXCR3极化的研究
15
作者 王红艳 黄保军 +3 位作者 王明军 郭克泰 秦卫兵 谭锦泉 《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第3期174-177,共4页
目的 研究新鲜分离的和粒细胞单核细胞 集落刺激因子 (granulocytemacrophagecolonystimulatingfactor,GM CSF)刺激的CD34+ 造血祖细胞上CXC趋化性细胞因子受体 3(CXCchemokinereceptor 3 ,CXCR3)mRNA水平表达的区别 ,以及在γ 干扰... 目的 研究新鲜分离的和粒细胞单核细胞 集落刺激因子 (granulocytemacrophagecolonystimulatingfactor,GM CSF)刺激的CD34+ 造血祖细胞上CXC趋化性细胞因子受体 3(CXCchemokinereceptor 3 ,CXCR3)mRNA水平表达的区别 ,以及在γ 干扰素诱导蛋白 10 (IFN γinducibleprotein10 ,γIP 10 )和γ 干扰素诱导的单核因子 (monokineinducedbyIFN γ ,Mig)的作用下 ,GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞的聚集作用和CXCR3分布的变化。方法 采用Northernblotting检测CXCR3mRNA水平的表达 ;2 4孔板细胞培养法观察细胞聚集作用 ;荧光标记抗体染色CXCR3后 ,以共聚焦免疫荧光显微镜观察CXCR3的极化现象。结果 GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞上CXCR3mRNA表达水平明显高于新鲜分离的细胞 ;γIP 10和Mig能够诱导GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞发生聚集现象和CXCR3重新分布现象 ,CXCR3聚集成束 ,并指向特定的方向。结论 GM CSF的刺激作用能够显著性提高CXCR3在CD34+ 造血祖细胞上的表达 ;γIP 10和Mig能够诱导GM CSF刺激的CD34+ 造血祖细胞的聚集作用和CXCR3的极化现象。 展开更多
关键词 GM-CSF cd34 造血祖细胞 CXCR3 MRNA 极化
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动员的外周血干/祖细胞中P21的表达与CD34^+细胞的相关性
16
作者 孙玲 马杰 +4 位作者 杨红旗 孙慧 张茵 刘林湘 邢莹 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2004年第4期631-633,共3页
目的 :检测动员的外周血干 /祖细胞中P2 1的表达及与CD34+ 细胞的相关性 ,探讨其在动员过程中的变化及意义。方法 :选取异基因外周血干细胞移植正常供者 9例和自体外周血干细胞移植者 (急性白血病患者 ) 6例 ,运用流式细胞术检测动员的... 目的 :检测动员的外周血干 /祖细胞中P2 1的表达及与CD34+ 细胞的相关性 ,探讨其在动员过程中的变化及意义。方法 :选取异基因外周血干细胞移植正常供者 9例和自体外周血干细胞移植者 (急性白血病患者 ) 6例 ,运用流式细胞术检测动员的外周血干 /祖细胞中CD34+ 细胞及其亚群 ,用免疫细胞化学的方法检测外周血动员前后P2 1的表达。结果 :动员的外周血干 /祖细胞中P2 1的表达明显高于动员前 ,二者间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;动员的外周血干 /祖细胞中CD34+ 细胞比例与P2 1的表达率呈正相关 (r=0 .5 5 3)。结论 :外周血干 /祖细胞动员过程中P2 1表达增高 ,可能与其促进祖细胞增殖。 展开更多
关键词 P21 ^cd34^+细胞 动员 外周血/祖细胞
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霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD_(34)^+造血细胞的干预作用
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作者 毛辉 殷凯生 +2 位作者 张希龙 李梅梅 王曾礼 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期861-864,F0002,共5页
目的:研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34+造血细胞生物活性的影响,并与糖皮质激素比较,探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法:以卵白蛋白(OVA)致敏并激发BALB/c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组,每组6只,分... 目的:研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34+造血细胞生物活性的影响,并与糖皮质激素比较,探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法:以卵白蛋白(OVA)致敏并激发BALB/c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组,每组6只,分别给予生理盐水(对照,A组)、泼尼松(B组)及霉酚酸酯(C组)灌胃,末次激发后24h分别取支气管肺泡灌洗液(BALF)、外周血及骨髓,测定BALF、外周血中有核细胞的分类计数及骨髓中有核细胞总数;ELISA方法测定外周血中IL-5水平;流式细胞仪测定外周血及骨髓中CD34+造血细胞、CD4+T淋巴细胞占有核细胞的比例;免疫组化结合原位杂交法检测骨髓内表达白细胞介素5(IL-5)受体α链mRNA的CD34+造血细胞(CD34+IL-5RαmRNA+细胞)计数。结果:B、C组哮喘小鼠BALF中细胞总数、EOS计数、外周血中CD34+造血细胞计数及外周血中IL-5水平均低于A组相应指标,且差异有显著性(均P<0.05);C组BALF及外周血中EOS计数、骨髓中CD34+造血细胞计数及CD34+IL-5RαmRNA+细胞计数与B组相应指标比较,差异有显著性(均P<0.05)。结论:霉酚酯酸(MMF)可能抑制嗜酸粒细胞(EOS)、T淋巴细胞的肺内浸润,抑制CD34+造血细胞从骨髓迁移至外周血,它可能主要通过抑制淋巴细胞增殖,减少IL-5的产生,来影响骨髓EOS祖细胞的分化。 展开更多
关键词 哮喘 气道炎症 ^cd34^+ 造血细胞 霉酚酸酯
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高剂量化疗联合自体外周血造血干细胞移植时骨髓及外周血采集物中CD34^+细胞黏附分子的表达
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作者 刘鹏 韩晓红 +3 位作者 石远凯 何小慧 杨晟 艾斌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期816-820,共5页
本研究的目的是应用免疫荧光直接三色标记和流式细胞术 (FCM) ,观测高剂量化疗 (HDC)联合自体外周血造血干细胞移植 (APBSCT)时不同阶段的骨髓及外周血CD3 4 +细胞 ,表达CD5 4、CD4 9d和CD62L的情况 ,探讨不同来源的CD3 4 +细胞表达黏... 本研究的目的是应用免疫荧光直接三色标记和流式细胞术 (FCM) ,观测高剂量化疗 (HDC)联合自体外周血造血干细胞移植 (APBSCT)时不同阶段的骨髓及外周血CD3 4 +细胞 ,表达CD5 4、CD4 9d和CD62L的情况 ,探讨不同来源的CD3 4 +细胞表达黏附分子的差异及其临床意义。将动员前、干细胞采集后和移植结束而骨髓重建后的骨髓样本及每次外周血单个核细胞样本 ,以CD3 4 PE和CD4 5 PerCP标记的同时 ,分别加CD5 4 FITC、CD4 9d FITC、CD62L FITC直接三色荧光标记 ,应用FACS测定CD3 4 +细胞及各黏附分子表达情况 ,并比较不同时段骨髓中各类黏附分子表达的差异 ,以及外周血造血干细胞采集物与动员前骨髓中各类黏附分子表达的差异。结果表明 ,动员前、采集后及移植重建后骨髓中CD3 4 +细胞对CD5 4、CD4 9d和CD62L表达的变化无统计学差异 ;造血干细胞第 1和第 2次采集物之间CD3 4 +细胞对CD5 4、CD4 9d和CD62L的表达变化也无统计学差异 ;而造血干细胞采集物中CD3 4 +、CD4 9+细胞较之动员前骨髓中CD3 4 +CD4 9d+细胞明显减少 (P =0 .0 0 1)。结论 :化疗联合粒细胞集落刺激因子 (G CSF)的动员方法 ,可使骨髓中CD3 4 +细胞的CD4 9d表达下调 ,并使之动员而进入外周血。移植重建后骨髓中CD3 4 +细胞的CD4 展开更多
关键词 自体造血细胞移植 ^cd34^+细胞 黏附分子 骨髓 外周血 化疗
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低温冷冻对脐血CD_(34)^+细胞和造血祖细胞增殖的影响
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作者 胡丽华 余忠清 +2 位作者 曹奎杰 殷开华 张青 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第6期567-568,580,共3页
采用-80℃低温冷冻法,观察冷冻前及冷冻后1、2、3周时单个核细胞(MNC)的回收率,脐血造血前体细胞在体外的增殖力,并用流式细胞仪检测CD34+细胞的百分率。旨在探讨低温冷冻对脐血造血前体细胞的影响。结果表明:脐血... 采用-80℃低温冷冻法,观察冷冻前及冷冻后1、2、3周时单个核细胞(MNC)的回收率,脐血造血前体细胞在体外的增殖力,并用流式细胞仪检测CD34+细胞的百分率。旨在探讨低温冷冻对脐血造血前体细胞的影响。结果表明:脐血冷冻后1、2、3周时MNC的回收率分别为93.6%,91.5%和90.7%(P>0.05);细胞活力分别为98%,97%,95%和91%(P>0.05);CD34+细胞依次为1.20%、1.18%、1.16%和1.17%;CFU-GM,CFU-E冷冻后1、2周时回收率达97%和95%(P>0.05),第3周时达89%(P>0.05)。结果提示:长期冷冻可能导致冷冻之脐血祖细胞产率下降,但对代表造血干细胞的CD34+细胞影响则不大。 展开更多
关键词 脐血 ^cd34^+细胞 低温冷冻 造血祖细胞 细胞增殖
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CD34^+细胞分选在异基因造血干细胞移植中的应用
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作者 邱慧颖 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期975-977,共3页
CD34 +细胞分选可有效去除 T细胞 ,显著降低急慢性移植物抗宿主病 (GVHD)的发生率及严重度 ,对于植入率及疾病复发率无不良影响。随着 CD34 +细胞生物学特性研究的深入及其分离纯化技术的成熟 ,CD34 +细胞分选和移植的应用日益广泛 ,在... CD34 +细胞分选可有效去除 T细胞 ,显著降低急慢性移植物抗宿主病 (GVHD)的发生率及严重度 ,对于植入率及疾病复发率无不良影响。随着 CD34 +细胞生物学特性研究的深入及其分离纯化技术的成熟 ,CD34 +细胞分选和移植的应用日益广泛 ,在拓宽供体来源 (HL A不全相合或半相合移植 )以及提高无关供体移植安全性等方面有良好的应用前景 ,但也存在着不少问题。本文就有关 CD34 +细胞移植中免疫活性细胞数量与移植效果、G- CSF(GM- CSF)和供体淋巴细胞输注的应用、移植并发症以及 HL A半相合 CD34 +细胞移植等问题作一综述。 展开更多
关键词 ^cd34^+细胞 细胞分离 异基因 造血细胞移植
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