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CD3TCR复合物抗体诱导不成熟胸腺细胞亚群的凋亡
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作者 李红梅 王宏程 +2 位作者 张华刚 孔宪涛 陈慰峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期232-235,共4页
目的 :采用AnnexinV ,PI染色 ,流式细胞仪分析的方法、DNA琼脂糖电泳法检测不同CD3 TCR复合物抗体对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的促凋亡作用。方法 :新鲜分离胸腺细胞 ,加入PMA、anti TCR +anti CD2 8mAb ,anti TCRmAb等培养 2 0小时 ,Annex... 目的 :采用AnnexinV ,PI染色 ,流式细胞仪分析的方法、DNA琼脂糖电泳法检测不同CD3 TCR复合物抗体对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的促凋亡作用。方法 :新鲜分离胸腺细胞 ,加入PMA、anti TCR +anti CD2 8mAb ,anti TCRmAb等培养 2 0小时 ,AnnexinV ,PI ,CD4 ,CD8细胞染色以及TCR三染 ,进行FACS分析 ,同时抽提培养细胞DNA进行琼脂糖电泳。结果 :PMA +IONO诱导胸腺T细胞的凋亡作用最强 ,anti TCR +anti CD2 8mAb次之 ,anti TCRmAb最弱。结论 :AnnexinV ,PI细胞染色 ,流式细胞仪分析的方法可以灵敏检测T淋巴细胞的凋亡 ;anti TCR +anti CD2 8mAb能明显增强anti TCRmAb促不成熟的CD4 + CD8+TCR+ 和CD4 + TCR+ 细胞的凋亡作用 ;不成熟T细胞经TCR与自身抗原结合的活性过程能产生克隆删除从而产生自我耐受。 展开更多
关键词 cd3/tcr复合物抗体 诱导 不成熟胸腺细胞亚群 凋亡
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系统性红斑狼疮患者T细胞TCR/CD3复合物介导的信号传导研究
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作者 杨庆永 廖元兴 +1 位作者 王宗发 杨慧兰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期57-59,共3页
目的 :证实SLE患者T细胞功能异常是否与其生物化学信号转导异常有关。方法 :用CD3单抗与羊抗鼠二抗IgG相交联刺激T细胞并用Thapsigargin和EGTA干预后 ,分别用粘附细胞仪连续观察 1 0minT细胞 [Ca2 +]i的变化 ,并评价[Ca2 +]i反应与CD3... 目的 :证实SLE患者T细胞功能异常是否与其生物化学信号转导异常有关。方法 :用CD3单抗与羊抗鼠二抗IgG相交联刺激T细胞并用Thapsigargin和EGTA干预后 ,分别用粘附细胞仪连续观察 1 0minT细胞 [Ca2 +]i的变化 ,并评价[Ca2 +]i反应与CD3分子和InsP3 生成量的相关性。结果 :正常人和SLE患者T细胞 [Ca2 +]i反应的基准值相似 (P =0 1 0 5) ;SLE患者T细胞的 [Ca2 +]i反应高峰值、平台值明显高于正常对照 (P <0 0 0 1 ,P <0 0 0 1 ) ;加入Thapsigargin后二者 [Ca2 +]i反应无显著差异 ,而加入EGTA后二者 [Ca2 +]i反应有显著差异 ;二者的T细胞CD3阳性率和InsP3 生成量无差异 (P =0 665 ,P =0 537)。结论 :SLE患者T细胞TCR CD3介导的信号转导途径存在异常 ;SLE患者T细胞功能异常可能是因细胞内生物化学信号途径异常所致。 展开更多
关键词 钙离子 tcr/cd3复合物 系统性红斑狼疮 信号转导 T细胞
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SLE患者T细胞TCR/CD3复合物介导的[Ca^(++)]i反应与患者临床特征相关性的研究
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作者 杨庆永 廖元兴 +1 位作者 王宗发 杨慧兰 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期749-750,共2页
为研究SLE患者原发的T细胞功能异常与TCR/CD3复合物介导生物化学信号转导异常相关,及与其临床特征的相关性。用尼龙柱分离肝素化的静脉血得到T细胞悬液,用CD3单抗与羊抗鼠二抗IgG相交联刺激T细胞,粘附细胞仪连续观察10min,观察T细胞犤C... 为研究SLE患者原发的T细胞功能异常与TCR/CD3复合物介导生物化学信号转导异常相关,及与其临床特征的相关性。用尼龙柱分离肝素化的静脉血得到T细胞悬液,用CD3单抗与羊抗鼠二抗IgG相交联刺激T细胞,粘附细胞仪连续观察10min,观察T细胞犤Ca++犦i的变化,并分析其与患者的临床特征相关性。发现正常人和SLET细胞的[Ca++]i反应的基准值相似(P=0.105),SLE患者T细胞高峰值和平台值均明显高于正常对照(P<0.001,P<0.001),且与患者临床特征无关。 展开更多
关键词 钙离子 tcr/cd3复合物 系统性红斑狼疮 T细胞 信号转导
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抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定
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作者 武国军 王禾 +5 位作者 王栋 于磊 王智 袁建林 张波 药立波 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期545-548,共4页
目的 将抗人CD3单链抗体 (scFv) /人 p5 3四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞 ,进行真核表达和活性测定。方法 将抗人CD3scFv /人 p5 3四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,转染HeLa细胞进行表达 ,表达产物纯化... 目的 将抗人CD3单链抗体 (scFv) /人 p5 3四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞 ,进行真核表达和活性测定。方法 将抗人CD3scFv /人 p5 3四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,转染HeLa细胞进行表达 ,表达产物纯化后利用流式细胞仪进行活性测定。结果 表达产物经SDS PAGE和Westernblot证实 ,为Mr约35 0 0 0的特异蛋白条带。纯化后经流式细胞仪检测 ,可特异性地结合人外周血单个核细胞 (PBMCs) ,亲和力高于scFv。结论 获得了可与PBMCs特异性结合的抗人CD3scFv四聚体 。 展开更多
关键词 SCFV 抗人cd3单链抗体 基因 HELA细胞 T细胞抗原受体 tcr
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SLE患者T细胞TCR/CD3介导[Ca^(2+)]i反应与InsP_3生成量的相关性
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作者 杨庆永 廖元兴 +1 位作者 王宗发 杨慧兰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期142-144,共3页
目的 :研究SLE患者T细胞功能异常是否与TCR/CD3复合物介导的生物化学信号传导异常有关 ,以及这种信号转导异常与InsP3 生成量的相关性。方法 :用尼龙柱分离肝素化的静脉血得到T细胞并制备其悬液 ,用流式细胞术测定CD3+细胞的阳性率。将... 目的 :研究SLE患者T细胞功能异常是否与TCR/CD3复合物介导的生物化学信号传导异常有关 ,以及这种信号转导异常与InsP3 生成量的相关性。方法 :用尼龙柱分离肝素化的静脉血得到T细胞并制备其悬液 ,用流式细胞术测定CD3+细胞的阳性率。将抗CD3单抗与羊抗鼠IgG相交联刺激T细胞后 ,用粘附细胞仪连续观察 10min ,观察T细胞胞内游离Ca2 + 的变化。用流式细胞术 ,检测正常人和SLE患者T细胞上CD3+ 表达的阳性率是否有差异。用InsP3 放射受体试剂盒检测InsP3 的生成量。结果 :①用尼龙柱吸附除去B细胞得到T细胞悬液 ,用流式细胞术检测CD3+ 细胞的阳性率占90 %以上。②正常人和SLE患者T细胞的 [Ca2 + ]i反应的基准值相似 (P =0 .10 5 ) ,SLE患者T细胞的 [Ca2 + ]i反应的高峰值、平台值明显高于正常对照 (P <0 .0 0 1)。③正常人和SLE患者T细胞上CD3+ 表达的阳性率没有差异 (P =0 .6 6 5 )。④二者InsP3 的生成量无差异 (P =0 .5 37)。结论 :SLE患者T细胞TCR/CD3介导的 [Ca2 + ]i反应存在异常 ,这种异常与InsP3 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 T细胞 tcr/cd3复合物 信号传导 钙离子 InsP3 SLE
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TCR/CD3介导T细胞活化的信号途径 被引量:7
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作者 陈采凤 刘彦信 郑德先 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期970-975,共6页
关键词 tcr/cd3复合物 T细胞活化 信号途径 介导作用 MHC-抗原肽复合物 协同刺激信号 激活诱导的细胞死亡 特异性抗原
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