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T细胞共刺激分子CD28活化在多发性骨髓瘤发病中的作用及可能机制
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作者 张阳敏 张立莹 +1 位作者 凌华毓 傅晋翔 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第4期1079-1085,共7页
目的:探讨由活化CD28介导的信号在促进多发性骨髓瘤(MM)生存和代谢适应性中的作用及可能机制。方法:流式细胞术分析MM细胞株XG2、XG1、RPMI 8226和U266表面CD28的表达,选择CD28表达高/低二种MM细胞株,体外观察高糖或激活CD28对MM细胞增... 目的:探讨由活化CD28介导的信号在促进多发性骨髓瘤(MM)生存和代谢适应性中的作用及可能机制。方法:流式细胞术分析MM细胞株XG2、XG1、RPMI 8226和U266表面CD28的表达,选择CD28表达高/低二种MM细胞株,体外观察高糖或激活CD28对MM细胞增殖、细胞周期、迁移及凋亡的影响;sh RNA敲低CD28表达后采用荧光标记的葡萄糖类似物(2-NBDG)分析激活CD28对MM细胞葡萄糖摄取率及MM耐药性的影响,实时定量PCR检测MM细胞Glut1/4、Hk II和Fasn基因的表达变化。结果:流式细胞术分析提示检测的4株MM细胞株均表达CD28分子,其中U266的阳性率最高。体外实验证实激活CD28可以显著上调Glut4及Hk II的表达,促进MM细胞的代谢重构,上调2-NBDG/葡萄糖的摄取,增加能量代谢,从而有利于细胞增殖及迁移能力上调,使S期及G2期细胞增多。同时,MM细胞表面CD28活化后可上调其对硼替佐米或地塞米松的抗药性。结论:MM异常高表达CD28,激活CD28可促进MM细胞上调葡萄糖摄取,从而促进MM细胞增殖和增强耐药。 展开更多
关键词 cd28 多发性骨髓瘤 细胞增殖 化疗抵抗
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国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备CAR-T细胞的性能对比
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作者 魏献政 张书瑜 +5 位作者 金钰航 王璞 王旭 郑骏年 刘丹 施明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第5期492-497,共6页
目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案。方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激... 目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案。方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激活T细胞,T细胞激活72 h后使用CAR慢病毒感染制备CAR-T细胞。分别在慢病毒感染后的第2、4、7天计数,监测CAR-T细胞增殖情况;感染5 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞阳性率;感染8 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞的CD4/CD8分型情况和PD1+TIM3+耗竭细胞比例。结果:国产CD3/CD28激活磁珠与进口磁珠制备的CAR-T细胞CD4/CD8分型相似,CAR-T细胞阳性率略低于进口磁珠(53.7%vs 57.9%),但CAR-T细胞扩增较进口磁珠增加1倍左右,耗竭水平仅为进口磁珠的一半(4.21%vs 7.91%)。此外,国产磁珠的使用量低于进口磁珠,有利于降低CAR-T细胞研发和生产成本。结论:国产CD3/CD28激活磁珠用于制备CAR-T细胞总体性能不劣于进口磁珠,有潜力作为进口磁珠的备用或替代方案。 展开更多
关键词 CD3/cd28激活磁珠 CAR-T细胞制备 性能对比 国产替代
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类风湿关节炎患者外周血CD4^(+)CD28^(-)T细胞亚群免疫功能相关分子的表达分析
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作者 林倩 张诚 +3 位作者 张杰 黄会娜 李霞 王冠 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期2087-2091,共5页
目的:探讨CD4^(+)CD28^(-)T细胞的活化途径及其在类风湿关节炎(RA)中的具体作用。方法:分离RA患者及健康人外周血单个核细胞(PBMCs),流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例、活化水平以及穿孔素和TNF-α的表达情况,并分析CD4^(+)CD28^... 目的:探讨CD4^(+)CD28^(-)T细胞的活化途径及其在类风湿关节炎(RA)中的具体作用。方法:分离RA患者及健康人外周血单个核细胞(PBMCs),流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例、活化水平以及穿孔素和TNF-α的表达情况,并分析CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例与年龄、C反应蛋白、抗-环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)和血沉(ESR)的相关性。流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞Toll样受体(TLR)2表达。采用抗-CD3抗体和TLR2激动剂单独或联合刺激纯化的RA患者CD4+T细胞,流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞活化水平和细胞因子分泌情况。结果:RA患者CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例高于健康人(P<0.05),且与RF和ESR呈正相关(r=0.5541,P<0.01;r=0.3634,P<0.01)。与CD4+CD28+T细胞相比,RA患者的CD4^(+)CD28^(-)T细胞CD25表达下调(P<0.01),CD40L及TLR2表达上调(P<0.01;P<0.0001),且分泌更多的穿孔素和TNF-α(P<0.001;P<0.001)。TLR2激动剂刺激后RA患者CD4^(+)CD28^(-)T细胞CD40L和CD25表达及穿孔素、TNF-α的分泌均无显著变化。结论:RA患者体内CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例增加,其分泌大量穿孔素和TNF-α,可能参与RA的炎症状态和关节损伤,但TLR2不能替代CD28激活CD4^(+)CD28^(-)T细胞。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 CD4^(+)cd28^(-)T细胞 TOLL样受体2 TNF-α 穿孔素
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免疫受体CD28受力激活中信号跨膜转导的分子机制 被引量:1
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作者 张勇 韩旭凌 娄继忠 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期293-293,共1页
目的免疫细胞表面存在一类免疫受体蛋白,其拓扑结构相似,都具有单次跨膜区和胞内无序区,如CD28、PD1等,在与配体结合后被活化,调节免疫功能。他们的活化机制还不清楚。本文旨在确定受体配体结合后加载在其间的力在活化过程中起到的作用... 目的免疫细胞表面存在一类免疫受体蛋白,其拓扑结构相似,都具有单次跨膜区和胞内无序区,如CD28、PD1等,在与配体结合后被活化,调节免疫功能。他们的活化机制还不清楚。本文旨在确定受体配体结合后加载在其间的力在活化过程中起到的作用,并阐明其后的力信号跨膜转导的分子机制。方法利用分子模拟,荧光成像以及力探针等方法,以CD28和PD1为例,研究他们受力前后在细胞膜上的状态以及相应的功能。结果利用荧光成像和分子模拟确认了在活化前,CD28无稳定结构的胞内域离膜很近,部分关键残基插入细胞膜中,形成自抑制状态;然后利用力探针和荧光成像发现力可以使CD28的胞内域远离细胞膜,增强免疫细胞的活化。分子模拟结果显示力致细胞膜的形变影响PIP2的聚集程度,而CD28胞内域与膜的作用受磷脂影响,PIP2会弱化CD28胞内域的插膜。对PD1的类似研究也发现了类似规律,但强度相对于CD28较弱。结论力通过改变细胞膜的形状,使得膜上的磷脂发生重排,引起此类免疫受体自抑制的状态的削弱,从而将其活化。研究结果为理解力信号是如何跨膜转导到胞内提供了新的视角。 展开更多
关键词 抑制状态 免疫受体 cd28 荧光成像 分子模拟 细胞膜 免疫细胞 跨膜转导
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免疫性血小板减少症患者外周血CD4^(+)CD28-T细胞数量及功能分析 被引量:1
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作者 李伟平 白自然 +2 位作者 田渝琴 尹春来 李霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2623-2627,共5页
目的:研究免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血CD4^(+)CD28-T细胞比例及功能,深入了解ITP的发病机制。方法:选取2021年1月至2022年6月于大连医科大学附属第二医院就诊的ITP患者30例及30例性别、年龄匹配的健康人作为对照,收集外周抗凝血... 目的:研究免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血CD4^(+)CD28-T细胞比例及功能,深入了解ITP的发病机制。方法:选取2021年1月至2022年6月于大连医科大学附属第二医院就诊的ITP患者30例及30例性别、年龄匹配的健康人作为对照,收集外周抗凝血提取单个核细胞(PBMC),流式细胞术分析PBMC中CD4^(+)CD28-T细胞比例及功能,ELISA检测ITP患者血浆中IL-18、IL-18BP含量,IL-18刺激PBMC,流式细胞术检测IL-18刺激前后CD4^(+)CD28-T细胞比例。结果:ITP患者外周血CD4^(+)CD28-T细胞比例明显高于健康对照组,且IFN-γ和TNF-α分泌能力更强;ITP患者血浆中IL-18含量上调;IL-18刺激可提高ITP患者PBMC中CD4^(+)CD28-T细胞比例。结论:ITP患者外周血中CD4^(+)CD28-T细胞比例升高,分泌炎症因子的能力更强。 展开更多
关键词 ITP CD4^(+)cd28-T IL-18
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CD4^(+)CD28^(−)T细胞的特点及其在疾病中的作用研究进展 被引量:1
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作者 林倩 王子龙 +1 位作者 王冠 刘畅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1779-1784,1788,共7页
在健康的年轻人体内,传统CD4^(+)T细胞的CD28表达高达97.5%,而研究发现在老年人、慢性炎症和持续感染的患者体内CD4^(+)T细胞的CD28阳性率显著下降,甚至不足50%,即出现CD4^(+)CD28^(−)T细胞积累。CD4^(+)CD28^(−)T细胞是一群独特的CD4^(... 在健康的年轻人体内,传统CD4^(+)T细胞的CD28表达高达97.5%,而研究发现在老年人、慢性炎症和持续感染的患者体内CD4^(+)T细胞的CD28阳性率显著下降,甚至不足50%,即出现CD4^(+)CD28^(−)T细胞积累。CD4^(+)CD28^(−)T细胞是一群独特的CD4^(+)T细胞亚群,本文综述了该亚群的表型特征、功能特点及其在慢性病毒感染、自身免疫病和心血管疾病中的作用,为CD4^(+)CD28^(−)T细胞相关疾病的治疗和预后改善提供了新策略。 展开更多
关键词 CD4^(+)cd28^(−)T细胞 炎症反应 细胞毒性
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CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的影响
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作者 张安迪 魏筱萱 +9 位作者 郭佳媛 金香淑 张琳琳 李菲 谷振阳 薄剑 窦立萍 刘代红 李猛 高春记 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期896-905,共10页
目的:探讨CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植(haplo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法:回顾性分析60例行haplo-HSCT的血液病患者移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与aGVHD的关系,并比较不同CD8^(+)CD28^(-)T... 目的:探讨CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植(haplo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法:回顾性分析60例行haplo-HSCT的血液病患者移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与aGVHD的关系,并比较不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间慢性移植物抗宿主病(cGVHD)、感染及预后的差异。结果:60例行haplo-HSCT患者中有40例发生aGVHD,发生率为66.67%,中位发生时间为32.5(20-100)天。Haplo-HSCT后30天,aGVHD组CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数显著低于无aGVHD组(P=0.03)。ROC曲线表明移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测aGVHD的易感性。移植后30天低细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数<0.06/μl)患者的aGVHD发生率显著高于高细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数≥0.06/μl,P=0.011)。多因素Cox回归分析进一步验证了移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数是aGVHD发生的独立风险因素,低细胞计数组aGVHD的发生风险是高细胞计数组的2.222倍(P=0.015)。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染的发生无统计学差异。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组的总生存率、非复发相关死亡率、复发率没有显示出明显的统计学差异。结论:行haplo-HSCT后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞延迟重建的患者更易发生aGVHD,并且CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测其易感性。单倍型造血干细胞移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染无关,且与移植后的生存预后无显著相关。 展开更多
关键词 CD8^(+)cd28^(-)T细胞 单倍型造血干细胞移植 急性移植物抗宿主病
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原发性肝癌患者CD8^+CD28^-和CD8^+CD28^+细胞亚群的分析 被引量:18
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作者 裘宇容 杨春莉 +1 位作者 陈炼波 王前 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期72-73,共2页
目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达。方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28-)的表达进行检测。结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD... 目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达。方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28-)的表达进行检测。结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD8+CD28+细胞百分率降低,CD8+ CD28-细胞百分率升高,与对照组相比具有显著性差异。CD8+CD28+、CD8+CD28-细胞百分率与CD8+T细胞百分率的相关性研究表明,CD8+CD28-细胞数与CD8+T细胞数之间呈正相关。结论HCC病人CD8+细胞升高,CD8+细胞上CD28分子的表达是异常的,即CD8+CD28细胞数升高,CD8+CD28+细胞数降低;CD8+T细胞的升高是CD8+CD28-细胞亚群升高的结果。+++- 展开更多
关键词 原发性肝癌 CD8^+cd28^+ CD8^+cd28^- 细胞亚群
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抗人CD28激发性单抗对T细胞淋巴瘤的抑制作用研究 被引量:2
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作者 胡玲玲 陈昌友 +4 位作者 张益红 郭静雅 陆海波 旬神美 邱玉华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期880-883,共4页
目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Ju... 目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Jurkat细胞体外增殖的影响;将Jurkat细胞株接种于裸鼠腋下,建立Jurkat细胞荷瘤裸鼠模型;经瘤内多点注射2F5(注射剂量1μg/mm3),逐日观察肿瘤的大小和裸鼠的生存状态。结果:2F5能够识别Jurkat细胞表面CD28分子,阳性结合率可达93.37%;2F5与Jurkat细胞共培养后,显微镜下观察可见胞质中出现黑色颗粒,胞膜破裂,细胞的折光性和立体感减弱;MTT法分析结果显示,抗CD28单抗对Jurkat细胞的体外增殖具有明显的抑制作用;将Jurkat细胞接种35只裸鼠(成瘤率达70%);经瘤内多点注射2F5,35天后荷瘤小鼠体内肿瘤的生长速率明显降低;而生理盐水对照组肿瘤生长无明显改变。结论:鼠抗人CD28单克隆抗体2F5通过与Jurkat细胞表面膜型CD28分子结合对其增殖具有明显的抑制作用,提示CD28分子可作为治疗T淋巴瘤的一个潜在靶点,抗体对治疗CD28分子阳性的肿瘤具有潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 cd28 鼠抗人cd28单克隆抗体 T淋巴细胞瘤
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鼠抗人CD28分子单克隆抗体的研制及生物学特性研究 被引量:22
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作者 邱玉华 张学光 +2 位作者 季玉红 居颂光 王廷 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期368-370,共3页
目的制备鼠抗人CD28分子的单克隆抗体(mAb),研究其在T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法以小鼠淋巴瘤细胞转染人CD28基因的细胞株(CD28-T)为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株。以体内诱生法... 目的制备鼠抗人CD28分子的单克隆抗体(mAb),研究其在T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法以小鼠淋巴瘤细胞转染人CD28基因的细胞株(CD28-T)为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株。以体内诱生法生产腹水,并以免疫亲和层析法对其纯化。以快速定性试纸法鉴定mAb的Ig亚类,竞争抑制法分析mAb识别的抗原表位,3H-TdR掺入法研究mAb对T细胞的刺激效应。结果成功地获得了5株分泌特异性抗人CD28 mAb的杂交瘤细胞株,鉴定的1株(克隆18G8)属IgG2a,腹水效价(流式细胞仪分析)达1:2 400以上。该mAb能60%阻断标准鼠抗人CD28抗体与相应抗原的结合,提示其识别的抗原表位与标准mAb不完全相同。mAb 18G8可取代B7-1分子介导的协同刺激信号,促进人外周血T细胞增殖(SI=7)。结论18G8是1株功能性mAb,具有重要的研究和应用价值。 展开更多
关键词 cd28分子 协同刺激信号 杂交瘤 单克隆抗体 增殖效应
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5株鼠抗人CD28单克隆抗体的研制及生物学特性的研究 被引量:11
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作者 孙中文 陶然 +4 位作者 陆艳红 石云杰 於葛华 邱玉华 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期406-410,共5页
目的:制备鼠抗人CD28分子功能性单克隆抗体,研究其对T细胞活化、增殖及信号转导等方面的生物学效应。方法:以天然高表达CD28分子的人多发性骨髓瘤细胞株U266和小鼠淋巴瘤细胞转人CD28基因细胞株CD28-T分别作为免疫原和检测细胞株,采用B... 目的:制备鼠抗人CD28分子功能性单克隆抗体,研究其对T细胞活化、增殖及信号转导等方面的生物学效应。方法:以天然高表达CD28分子的人多发性骨髓瘤细胞株U266和小鼠淋巴瘤细胞转人CD28基因细胞株CD28-T分别作为免疫原和检测细胞株,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行单抗的研制;以快速定性试纸法鉴定单抗亚类;腹水诱生法和免疫亲和层析法进行单抗的制备和纯化;经间接免疫荧光法分析单抗对不同细胞膜表面CD28分子的识别;采用竞争抑制法分析单抗识别的抗原位点;利用3H-TdR掺入法分析单抗对PBTC的刺激效应和免疫荧光法分析PBTC活化前后的表型变化。结果:成功获得5株鼠抗人CD28功能性单克隆抗体,分别命名为2D5、2F5、3B6、3F8和8G8,其中2D5为IgG2a亚类,其余均为IgG1亚类;流式细胞仪分析结果显示,5株单抗均能良好识别CD28-T、U266、XG1和Jurkat细胞表面的CD28分子;竞争抑制试验表明,2D5和8G8能完全阻断标准抗人CD28单抗与U266膜CD28分子的结合,其余3株为部分阻断;3H-TdR掺入法实验结果表明,单抗8G8联合激发型CD3单抗能明显促进PBTC的增殖,刺激指数为7.4,活化细胞CD4、CD25、ICOS、41BB及OX40分子的表达上调。结论:5株单抗均为抗人CD28单克隆抗体,具有重要的基础研究及潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 cd28 杂交瘤 单克隆抗体 增殖效应 协同刺激分子
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人外周血CD8^+T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的老年性改变 被引量:12
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作者 邱海霞 何贤辉 +4 位作者 刘毅 蔡小嫦 肇静娴 王南 曾耀英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期477-480,共4页
目的 :通过对健康老年人与青年人外周血CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7表达水平的比较性研究 ,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法 :采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组 ( 2 0 - 35岁 )与老年组 ( 6 0 - 75岁 )外周血CD8+CD2 8+、CD8... 目的 :通过对健康老年人与青年人外周血CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7表达水平的比较性研究 ,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法 :采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组 ( 2 0 - 35岁 )与老年组 ( 6 0 - 75岁 )外周血CD8+CD2 8+、CD8+CD5 6 +及CD8+CD5 7+T细胞水平。结果 :老年组外周血CD8+CD2 8+T细胞明显低于青年组 ,阳性百分率分别为 34 0 7± 5 2 9和 49 84± 7 43(P <0 0 5 ) ;而老年组CD8+CD5 6 +T细胞及CD8+CD5 7+T细胞均明显高于青年组 ,前者阳性百分率分别为 6 6 0± 2 40和 2 10± 0 35 ,后者阳性百分率分别为 41 82± 6 0 1和2 2 89± 2 80 (P <0 0 5 )。结论 :老年人CD8+T细胞CD2 8、CD5 6及CD5 7的表达率均随年龄增长有明显改变 ;CD2 8表达下降可能是引起免疫系统功能降低的重要原因 ,而CD5 6、CD5 7表达水平的增加则可能是机体对细胞免疫功能下降的一种代偿性适应。 展开更多
关键词 人外周血 CD8^+T细胞cd28 CD56 CD57 表达 老年性改变 免疫衰老 细胞学机制
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骨髓间充质干细胞通过上调CD8^+CD28^-T细胞抑制T细胞的增殖 被引量:17
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作者 张伟 葛薇 +4 位作者 李长虹 尤胜国 韩钦 邓为民 赵春华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期666-669,共4页
本研究旨在探讨CD8+ CD2 8- T细胞在间充质干细胞 (MSC)抑制T细胞增殖中的作用。应用尼龙毛柱分离T淋巴细胞 ,再经CD8磁珠分选出CD8+ T淋巴细胞 ;用植物血凝素 (PHA)刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞 ,应用MTT法测定T细胞的增殖 ... 本研究旨在探讨CD8+ CD2 8- T细胞在间充质干细胞 (MSC)抑制T细胞增殖中的作用。应用尼龙毛柱分离T淋巴细胞 ,再经CD8磁珠分选出CD8+ T淋巴细胞 ;用植物血凝素 (PHA)刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞 ,应用MTT法测定T细胞的增殖 ;应用流式细胞术分别检测与或未与MSC共培养 8天的CD8+ T细胞亚群的变化及用PHA刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞亚群的变化。结果表明 ,MSC抑制PHA刺激引起的CD8+ T细胞的增殖 ,且这种抑制作用是剂量依赖性的 ;流式细胞术结果显示 ,与未经MSC处理的CD8+ T细胞相比 ,MSC显著上调共培养 8天的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群 ,及经PHA作用 72小时后的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群。结论 :MSC通过上调CD8+ CD2 8- T细胞发挥抑制作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 CD8^+cd28^-T细胞 T细胞 免疫调节
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协同刺激分子4-1BB和CD28对人外周血不同T细胞亚群的激活作用 被引量:6
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作者 吴俊英 钱峰 +2 位作者 吕合作 王伟 李柏青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期533-536,共4页
目的 :探讨 4 1BB/ 4 1BBL协同刺激信号在CD4 + 和CD8+ T细胞活化、增殖中的作用 ,并与CD2 8/B7信号作比较。方法 :用抗CD3单抗 (mAb)刺激人外周血单个核细胞 (PBMC)。用阻断型抗 4 1BBLmAb和抗CD80mAb ,分别阻断 4 1BB/ 4 1BBL和C... 目的 :探讨 4 1BB/ 4 1BBL协同刺激信号在CD4 + 和CD8+ T细胞活化、增殖中的作用 ,并与CD2 8/B7信号作比较。方法 :用抗CD3单抗 (mAb)刺激人外周血单个核细胞 (PBMC)。用阻断型抗 4 1BBLmAb和抗CD80mAb ,分别阻断 4 1BB/ 4 1BBL和CD2 8/B7 1协同刺激信号。利用流式细胞术 (FCM)检测CD4 + T细胞、CD8+ T细胞的增殖率、CD8/CD4T细胞的比值变化和细胞分泌IFN γ的情况。结果 :用抗 4 1BBLmAb和抗CD80mAb阻断相应的协同刺激途径后 ,CD4 + 和CD8+ T细胞的增殖和细胞分泌IFN γ的水平均明显下降。培养 8d,抗CD3mAb单独刺激组CD8/CD4T细胞的比值为 1.98± 0 .0 6 ;抗 4 1BBLmAb阻断组CD8/CD4T细胞的比值下降为 0 .96±0 .0 3;而在抗CD80mAb阻断组 ,其比值上升为 2 .6 9± 0 .16。结论 :4 1BB分子可在CD4 + T细胞和CD8+ T细胞的活化、增殖中提供协同刺激信号。 4 1BB分子所介导的协同刺激信号 ,在CD8+ T细胞活化及增殖中发挥了更为重要的作用 ;而CD2 8分子所介导的协同刺激信号则更有利于CD4 + 展开更多
关键词 4-1BB cd28 增殖 活化
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冠心病患者外周血CD4^+CD28^-T细胞和CD4^+CD25^+T细胞亚群变化 被引量:6
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作者 赵一俏 傅强 +5 位作者 李志梁 严全能 吴宏超 缪绯 吕永恒 刘映峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期474-476,共3页
目的探讨冠心病患者外周血CD4^+CD28^-T细胞和CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)亚组的变化及意义。方法入选病例为我院从2005年6月到2005年12月共28例行冠状动脉支架术治疗的冠心病患者(不稳定性心绞痛16例、稳定性心绞痛12例),以同时冠脉... 目的探讨冠心病患者外周血CD4^+CD28^-T细胞和CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)亚组的变化及意义。方法入选病例为我院从2005年6月到2005年12月共28例行冠状动脉支架术治疗的冠心病患者(不稳定性心绞痛16例、稳定性心绞痛12例),以同时冠脉造影正常11例胸痛综合症患者为对照。借助三色荧光标记技术对外周血CD4^+CD28^-T细胞和CD4^+CD25^+Treg占CD4^+T细胞比例进行流式细胞术测定。结果不稳定性心绞痛患者外周血Treg/CD4^+T细胞比例[(6.55±2.45)%]显著低于稳定性心绞痛组[(14.01±4.92)%]和胸痛综合征组[(13.55±3.87)%](P<0.05),而CD4+CD28-/CD4+T细胞比例[(10.55±4.76)%]则明显高于稳定性心绞痛组[(2.64±1.33)%]和胸痛综合征组[(2.75±1.55)%](P<0.05)。结论不稳定性心绞痛患者外周血Treg比例减少而CD4+CD28-T细胞比例升高,Treg比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了动脉粥样硬化的发生发展。 展开更多
关键词 冠心病 不稳定性心绞痛 T淋巴细胞 T淋巴细胞亚群 自身免疫 CD4 cd28 CD25
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CD3和CD28单克隆抗体联合作用对CIK细胞及其亚群增殖及功能的影响 被引量:7
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作者 李玉 韩娇玲 +7 位作者 张震 王菲 李红 黄建敏 赵璇 杨黎 黄岚 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期255-260,共6页
目的:探讨CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞及其亚群增殖及功能的影响。方法:采集2014年6月至2015年6月在郑州大学第一附属医院接受生物细胞治疗的20例肿瘤患者(肾癌6例,肺癌5例,肝... 目的:探讨CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞及其亚群增殖及功能的影响。方法:采集2014年6月至2015年6月在郑州大学第一附属医院接受生物细胞治疗的20例肿瘤患者(肾癌6例,肺癌5例,肝癌、乳腺癌和恶性黑素瘤各2例,胆囊癌、淋巴瘤和卵巢癌各1例)的外周血,每例外周血均分为4组(对照组,单用CD3单抗组,单用CD28单抗组,CD3和CD28单抗联合作用组)进行CIK细胞的诱导培养。用CFSE染色检测CIK细胞的增殖能力;ELISA检测CIK细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2的水平;磁珠分选CIK细胞亚群CD4+、CD8+和CD56+细胞,然后用ELISA检测对CIK细胞亚群分泌IFN-γ、TNF-α和IL-2能力的影响。结果:CD3/CD28单抗联合作用(PI=59.35)对CIK细胞的增殖能力的影响与单独使用CD3单抗(PI=64.4)相比效果并不明显,但是可以刺激CIK细胞分泌较高水平的IFN-γ和TNF-α[IFN-γ:(384.6±263.1)vs(201.5±271.5)pg/ml,P=0.0361;TNF-α:(4.795±1.251)vs(2.835±0.443)pg/ml,P=0.0265];进一步分析发现,两单抗的联合作用可增强亚群细胞CD8+分泌IFN-γ、CD56+分泌IL-2和TNF-α的活性,从而起到对淋巴细胞功能的增强作用。结论:CD3与CD28单抗联合作用不能增强CIK的增殖能力,但可以在一定程度上增强CIK细胞的功能,在肿瘤的细胞免疫治疗应用中具有一定的潜力。 展开更多
关键词 CD3单克隆抗体 cd28单克隆抗体 细胞因子诱导的杀伤细胞 IFN-Γ TNF-α IL-2 肿瘤免疫治疗
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CD8^+CD28^+/CD8^+CD28^-T细胞平衡预测炎症性肠病患者并发消化道出血的价值 被引量:5
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作者 戴世学 顾红祥 +12 位作者 武钢 钟涛 菅洪健 湛永乐 张旻海 高勇 徐俊 陈东升 廖广捷 封艳玲 刘洪波 邹颖 迟宏罡 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1609-1615,共7页
目的评价CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-T细胞平衡在预测炎症性肠病(IBD)患者并发消化道出血(GH)的作用与价值。方法收集IBD患者49例,其中溃疡性结肠炎(UC)30例,克罗恩病(CD)19例,使用流式细胞术检测外周血CD8^+CD28^+及CD8^+CD28-T细胞T细胞... 目的评价CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-T细胞平衡在预测炎症性肠病(IBD)患者并发消化道出血(GH)的作用与价值。方法收集IBD患者49例,其中溃疡性结肠炎(UC)30例,克罗恩病(CD)19例,使用流式细胞术检测外周血CD8^+CD28^+及CD8^+CD28-T细胞T细胞的百分含量,对患者进行为期1年的随访,使用受试者工作特征(ROC)曲线法评价CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-T细胞平衡(比值)在预测IBD患者出现GH的效能,并使用Kaplan-Meier生存分析法比较不同因素下的持续缓解时间(LTR)差异,并对相关指标进行相关性分析。结果 (1)CD组的免疫抑制剂、激素及生物制剂(BA)使用率均显著高于UC组(P=0.003、0.043及0.002);(2)UC组患者的CD8^+CD28^+T细胞显著高于CD组(t=3.022,P=0.004);(3)ROC结果显示CD8^+CD28^+T细胞、CD8^+CD28-T细胞及CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-比值三者在预测GH方面均具有良好的效能(均为P<0.01),但以CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-最优[曲线下面积(AUC)为0.977,P=0.000],截值分析显示当CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-比值取值为1.14时(13.95%/12.24%),其对应的敏感度达93.3%,特异度为91.2%;(4)未使用BA及未行手术治疗的IBD患者算术及中位LTR均显著长于使用BA及已行手术的IBD患者(分别为χ2=9.730,P=0.002;χ2=15.981,P=0.000);(5)Spearman分析显示CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-与BA及手术均成显著相关性(P=0.009、0.038)。结论外周血CD8^+CD28^+T细胞降低或CD8^+CD28-T细胞升高与IBD患者出现GH密切相关,CD8^+CD28^+/CD8^+CD28-平衡预测GH的敏感度及特异度均高,尤其是在比值为1.14时;该平衡与生物制剂及手术存在显著相关性。 展开更多
关键词 炎症性肠病 活动期 消化道出血 CD8+cd28+/CD8+cd28-平衡 预测
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抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β的表达 被引量:8
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作者 骆群 吕明 +1 位作者 于鸣 黎燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期547-551,共5页
为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β(TGF-β)表达等相关免疫学指标。结果表明,在抗CD2... 为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β(TGF-β)表达等相关免疫学指标。结果表明,在抗CD28抗体的协同作用下,抗CD3抗体的刺激活性明显提高,CD8+CD25+细胞比例明显增加,TGF-β的表达下调。结论:抗CD28抗体协同刺激可以提供第二信号,使T淋巴细胞充分活化。 展开更多
关键词 抗CD3抗体 cd28抗体 TGF-Β T细胞
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慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达研究 被引量:6
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作者 王沂芹 柏健鹰 +5 位作者 傅晓岚 张静波 王惠明 赵婷婷 徐文越 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期342-344,共3页
目的检测慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达情况。方法利用MHC-Ⅰ-肽五聚体(pentamer)技术结合流式多色分析技术,直接离体情况下(direct ex vivo)检测慢性乙型肝炎患者3个HLA-A2限制性的HBV表位特异性CTL表达CD28的情况。结... 目的检测慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达情况。方法利用MHC-Ⅰ-肽五聚体(pentamer)技术结合流式多色分析技术,直接离体情况下(direct ex vivo)检测慢性乙型肝炎患者3个HLA-A2限制性的HBV表位特异性CTL表达CD28的情况。结果在22例HLA-A2^+患者中,检测出HBcAg(18—27)特异性CTL有13例,频率为0.05%-0.16%;CD28^+的HBcAg(18—27)特异性CTL的百分比为40%(23%-61%)。检测出HBeAg(335—343)有8例,频率为0.05%-0.24%;CD28%+的HBeAg(335—343)特异性CTL的百分比为43%(36%-60%)。检测出HBp(575—583)特异性CTL有9例,频率为0.05%-0.19%;CD28^+的HBpAg(575—583)特异性CTL的百分比为61%(45%-70%)。结论不同HBV抗原表位特异性CTL的CD28表达情况不同。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 细胞毒性T淋巴细胞 cd28 MHC-Ⅰ-肽五聚体
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对一个CDR区发生突变的改形抗CD28重链单域抗体的研究 被引量:4
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作者 程巨龙 王祥斌 +5 位作者 刘晶 顾莹 张众 方敏 姚新生 黄华梁 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第4期11-15,共5页
在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较... 在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较发现 ,该改形抗体在CDR2区 53位缺失Ala氨基酸残基 ;而在 65a位上插入一个Arg氨基酸残基。在CDR3区缺少Asp95,Lys96,Gly97,Tyr98氨基酸残基。在FR3区缺少Lys82a ,Ser82b ,Leu82c氨基酸残基。由于该序列发生的突变较大 ,作者进一步对其进行了研究。该改形抗CD2 8VH 单域抗体基因与人c myc及人IgG3’CL绞链区基因在大肠杆菌中融合表达。融合表达包涵体经复性 ,纯化处理后 ,仍具有较高与人CD2 8分子结合活性。 展开更多
关键词 cd28 改形抗体 单域抗体 突变体 免疫学活性 基因工程 基因疗法 T细胞
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