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CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究被引量：2: 1; 作者王立勇刘秀明 +6 位作者张玲姚娜王德仲历雯清蔡静波李海燕姜潮《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第12期112-120,共9页; 【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索... 展开更多; 关键词红花愈伤组织悬浮细胞农杆菌介导表达载体 cd20复合片段抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合抗CD_(20)抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定被引量：5: 2; 作者赖增祖熊冬生 +4 位作者范冬梅彭辉许元富朱祯平杨纯正《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期521-524,共4页; 目的 :构建抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达。方法 :利用PCR方法从抗CD2 0 单链抗体 (ScFv)表达载体上扩增抗CD2 0 抗体轻链可变区基因 (VL)、重链可变区基因 (VH) ,然后将VH、VL 基因重组到Fa... 展开更多; 关键词单克隆抗体嵌合抗体Fab片段 cd20 大肠杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合抗CD20抗体片段F(ab’)_2的表达及活性被引量：4: 3; 作者郑梦杰熊冬生 +3 位作者彭晖范冬梅朱祯平杨纯正《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期596-599,共4页; 目的 :为了简化生产步骤 ,提高抗体蛋白的生物活性 ,探索在工程菌体内直接进行抗CD2 0F(ab’) 2 的高效率分泌性表达。方法 :采用单因素考察法优化培养条件 ,使蛋白G柱和S2 0 0 HR分子筛柱分离纯化目的蛋白 ,用MTT法检测抗CD2 0F(ab’)... 展开更多; 关键词嵌合抗cd20抗体片段F(ab')2 基因工程抗体 B-淋巴细胞 B淋巴细胞瘤治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建被引量：3: 4; 作者彭晖杨纯正 +4 位作者范冬梅郑梦杰赖增祖熊冬生朱祯平《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期4-8,共5页; 分别以抗CD2 0 Fab’轻链和Fd段的氨基酸一级序列为探针 ,在PDB数据库中搜寻与其同源性高的蛋白作为参考蛋白 ,利用InsightII/MSI的同源蛋白质结构模建系统(homology)在SGI计算机图形工作站上模建轻链和Fd段的三维空间结构后 ,搭建成抗C... 展开更多; 关键词同源建模在 cd20 抗体Fab'片段三维结构蛋白 B淋巴细胞瘤药物治疗嵌合抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究被引量：2: 1; 作者王立勇刘秀明张玲姚娜王德仲历雯清蔡静波李海燕姜潮; 机构吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心吉林农业大学中药材学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第12期112-120,共9页; 基金 "十二五"国家高新技术研究与发展计划项目(2011AA100606) 吉林省科技厅项目(20150623024TC-11) +1 种基金国家自然科学基金项目(31101172 31501366); 文摘【目的】研究用红花愈伤组织建立红花悬浮细胞培养体系的条件,并利用红花悬浮细胞通过农杆菌介导转化法表达CD20复合片段抗体。【方法】以红花子叶为外植体,研究不同种类激素组合对愈伤诱导率的影响,筛选优质愈伤组织进行悬浮培养,探索不同初始接种量、蔗糖质量分数、水解酪蛋白质量浓度对红花悬浮细胞生长的影响。将CD20复合片段抗体基因两端引入XmaⅠ/EcoRⅠ酶切位点,并将其与pEASY-T1和pBasta载体相连,构建pEASY-T1-CD20克隆载体和pBasta-CD20表达载体,再将构建的pBasta-CD20表达载体转入根瘤农杆菌,利用根瘤农杆菌介导红花悬浮细胞转化法表达CD20复合片段抗体。【结果】红花子叶愈伤诱导最佳条件为MS+NAA 2mg/L+6-BA 0.5mg/L、温度(25±0.1)℃、光照70μmol/(m2·s)连续光照,继代培养条件为MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、30μmol/(m2·s)连续光照、温度(25±0.1)℃。悬浮细胞体系培养最佳条件为不加琼脂粉的MS+NAA 1mg/L+6-BA 0.5mg/L、接种量2.5g(50mL培养基)、蔗糖质量分数2%、水解酪蛋白800mg/L。pBastaCD20表达载体构建成功,且目的蛋白在红花悬浮细胞中成功表达。【结论】成功构建了红花悬浮细胞培养体系,并用该体系成功表达了CD20复合片段抗体。; 关键词红花愈伤组织悬浮细胞农杆菌介导表达载体 cd20复合片段抗体; Keywords safflower callus suspension cells agrobacterium-mediated transformation expression vec-tors cd20 complex antibody fragment; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合抗CD_(20)抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定被引量：5: 2; 作者赖增祖熊冬生范冬梅彭辉许元富朱祯平杨纯正; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期521-524,共4页; 基金 863计划资助!项目(10 2 0 9 0 3 0 3); 文摘目的 :构建抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达。方法 :利用PCR方法从抗CD2 0 单链抗体 (ScFv)表达载体上扩增抗CD2 0 抗体轻链可变区基因 (VL)、重链可变区基因 (VH) ,然后将VH、VL 基因重组到Fab表达载体pYZF中 ,构建抗CD2 0 Fab表达载体pYZF1cd2 0 ,并在 2 7C7菌中高效表这。结果 :经Fab表达载体转化的 2 7C7菌株 ,进行表达培养 ,经分离纯化获得具有CD2 0 特异结合活性的Fab片段 ,竞争性免疫荧光抑制实验表明 ,表达产物Fab片段能竞争性抑制鼠源性抗CD2 0 抗体HI47和CD2 0 表达细胞Raji细胞结合。结论 :在大肠杆菌中高效可溶性分泌表达有活性的抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段。; 关键词单克隆抗体嵌合抗体Fab片段 cd20 大肠杆菌; Keywords Monoclonal antibody Chimeric Fab antibody frament cd 20; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合抗CD20抗体片段F(ab’)_2的表达及活性被引量：4: 3; 作者郑梦杰熊冬生彭晖范冬梅朱祯平杨纯正; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液研究所; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期596-599,共4页; 基金 863计划资助项目项目课题号 (863 10 2 0 9 0 3 0 3 ) 863中试基金资助; 文摘目的 :为了简化生产步骤 ,提高抗体蛋白的生物活性 ,探索在工程菌体内直接进行抗CD2 0F(ab’) 2 的高效率分泌性表达。方法 :采用单因素考察法优化培养条件 ,使蛋白G柱和S2 0 0 HR分子筛柱分离纯化目的蛋白 ,用MTT法检测抗CD2 0F(ab’) 2 抑制Daudi细胞体外生长的活性。结果 :发现用论文所选定的最适培养条件 ,抗CD2 0F(ab’) 2 的产量有了明显提高 ,从1 9～ 2 .2mg L达到了 3 7～ 4 3mg L ,F(ab’) 2 在表达产物中所占的比例也从 9 7%～ 13 2 %提高到了 38 1%～ 4 6 8% ;使用S2 0 0 HR分子筛柱对蛋白G柱亲和纯化后的产物进一步分离纯化 ,可以使F(ab’) 2 的纯度达到 85 %以上 ;MTT法检测结果证明F(ab’) 2 抑制Daudi细胞生长的IC50 值为 14 6 μg ml,而Fab’为 39 5 μg ml。结论 :实现了抗CD2 0F(ab’) 2 在工程菌体内的高效率分泌性表达 ,而且所表达的抗CD2 0F(ab’) 2 比抗CD2; 关键词嵌合抗cd20抗体片段F(ab')2 基因工程抗体 B-淋巴细胞 B淋巴细胞瘤治疗; Keywords Gene engineering antibody Anti cd20F(ab') 2 B lymphocyte; 分类号 R733.4 [医药卫生—肿瘤] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建被引量：3: 4; 作者彭晖杨纯正范冬梅郑梦杰赖增祖熊冬生朱祯平; 机构中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第12期4-8,共5页; 基金 86 3计划 ( 86 3 10 2 0 9 0 3 0 3) 国家自然科学基金 ( 3990 0 186 )资助项目; 文摘分别以抗CD2 0 Fab’轻链和Fd段的氨基酸一级序列为探针 ,在PDB数据库中搜寻与其同源性高的蛋白作为参考蛋白 ,利用InsightII/MSI的同源蛋白质结构模建系统(homology)在SGI计算机图形工作站上模建轻链和Fd段的三维空间结构后 ,搭建成抗CD2 0 嵌合抗体片段Fab’的空间构象 ,并对模建蛋白进行分子力学和分子动力学优化。对优化后的模建蛋白的合理性验证显示 ,模建蛋白的三维结构是合理而可信的。; 关键词同源建模在 cd20 抗体Fab'片段三维结构蛋白 B淋巴细胞瘤药物治疗嵌合抗体; Keywords Homology modeling, cd 20 , Fab' fragment; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	CD20片段抗体在红花悬浮细胞中的表达研究	王立勇刘秀明张玲姚娜王德仲历雯清蔡静波李海燕姜潮	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	嵌合抗CD_(20)抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定	赖增祖熊冬生范冬梅彭辉许元富朱祯平杨纯正	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2000	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	嵌合抗CD20抗体片段F(ab’)_2的表达及活性	郑梦杰熊冬生彭晖范冬梅朱祯平杨纯正	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	嵌合抗CD_(20)抗体Fab’片段三维结构的同源模建	彭晖杨纯正范冬梅郑梦杰赖增祖熊冬生朱祯平	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2001	3	在线阅读下载PDF 职称材料