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口蹄疫病毒3D蛋白在体外的表达纯化及二级结构分析
被引量:
5
1
作者
韩雪清
刘湘涛
+4 位作者
林祥梅
尹双辉
尚佑军
刘健
梅林
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2005年第5期6-10,共5页
口蹄疫(FMD)是严重影响全球农业经济的高度传染的毁灭性的疫病.3D蛋白是口蹄疫病毒(FMDV)编码的RNA聚合酶,参与病毒RNA的复制.利用PCR扩增得到了FMDV的3D基因片段,然后将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pETFM3D.转...
口蹄疫(FMD)是严重影响全球农业经济的高度传染的毁灭性的疫病.3D蛋白是口蹄疫病毒(FMDV)编码的RNA聚合酶,参与病毒RNA的复制.利用PCR扩增得到了FMDV的3D基因片段,然后将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pETFM3D.转化宿主菌BL21(DE3)后,利用1 mmol/L的IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western boltting分析结果表明,得到了稳定、过量表达的可溶性的3D蛋白质.目的蛋白质经NI亲和层析柱一步纯化就达到95%,再经Q-sepharose柱纯化后达到97%.通过圆二(CD)色谱测定和计算3D蛋白质在不同的pH(2、4、6、8和10)和不同的温度下(25~85℃)的二级结构.上述结果表明,表达的可溶性3D蛋白质具有高表达、易纯化和稳定性好等特点.
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关键词
口蹄疫病毒
3D蛋白
表达纯化
cd分析
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职称材料
食管鳞癌患者血清中可溶性CD44v6和E-钙黏蛋白表达的临床意义
被引量:
4
2
作者
何赢
张军
+5 位作者
王书奎
黄文斌
陈兴国
何帮顺
赵有财
王劲松
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期305-309,共5页
目的:检测食管鳞癌患者血清中可溶性CD44v6(sCD44v6)和可溶性E-钙黏蛋白(sE-cadherin,sE-cad)的表达,探讨这2种可溶性黏附分子表达与食管鳞癌临床病理特征的关系以及这2种可溶性黏附分子在血清中表达的相关性。方法:采集65例食管鳞癌患...
目的:检测食管鳞癌患者血清中可溶性CD44v6(sCD44v6)和可溶性E-钙黏蛋白(sE-cadherin,sE-cad)的表达,探讨这2种可溶性黏附分子表达与食管鳞癌临床病理特征的关系以及这2种可溶性黏附分子在血清中表达的相关性。方法:采集65例食管鳞癌患者、32例糜烂性食管炎患者和35例正常食管者的血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中sCD44v6、sE-cad的表达,并与其临床病理资料对照。结果:血清sCD44v6在食管鳞癌组表达水平明显高于正常食管组及糜烂性食管炎组(P<0.05),正常食管组与糜烂性食管炎组比较无统计学差异(P=0.566);血清sCD44v6水平与食管鳞癌临床病理特征无关。血清sE-cad水平在食管鳞癌组明显高于正常食管组及糜烂性食管炎组(P<0.05),正常食管组与糜烂性食管炎组比较无统计学差异(P=0.708);血清sE-cad水平与食管鳞癌临床病理特征无关。食管鳞癌患者血清中sCD44v6和sE-cad水平无显著相关性(r=-0.057,P=0.651)。结论:血清sCD44v6及sE-cad水平测定有望成为筛查食管鳞癌的血清学指标。
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关键词
酶联免疫吸附测定
基因表达
钙黏着糖蛋白类/
分析
食管肿瘤
肿瘤
鳞状细胞
抗原
cd
44/
分析
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职称材料
山羊EDNRA基因编码区克隆与组织表达规律分析
3
作者
王梦
周靖宣
+4 位作者
占思远
王林杰
李利
张红平
仲涛
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2019年第6期852-859,共8页
【目的】旨在探究EDNRA基因在山羊心脏、肝、脾、肺、肾、大脑、网膜脂肪组织中的表达情况。【方法】采用克隆、测序的方法得到山羊EDNRA基因CDS全长的碱基序列,用生物信息学软件进行序列分析、亲水性/疏水性分析、潜在的信号肽位点分...
【目的】旨在探究EDNRA基因在山羊心脏、肝、脾、肺、肾、大脑、网膜脂肪组织中的表达情况。【方法】采用克隆、测序的方法得到山羊EDNRA基因CDS全长的碱基序列,用生物信息学软件进行序列分析、亲水性/疏水性分析、潜在的信号肽位点分析、亚细胞定位分析、蛋白质的二级结构和三级结构预测及系统进化树分析,最后采用实时荧光定量PCR(qPCR)测定EDNRA基因在山羊心脏、肝、脾、肺、肾、大脑、网膜脂肪组织中mRNA的表达量。【结果】成功克隆了EDNRA的CDS序列,得到山羊EDNRA基因包含一个1 284 bp的最长开放阅读框。该序列编码427个氨基酸,含信号肽序列(第1到第20位氨基酸)以及7型跨膜受体同系物结构域。基因编码产物具有疏水性,属分泌蛋白,有35个磷酸化修饰位点。二级结构主要为α-螺旋。系统进化树分析表明,山羊EDNRA基因和绵羊、牛以及野牛的亲缘关系较近。qPCR结果表明,山羊EDNRA基因在心脏中的表达量最高,在肝、脾、肾、大脑、网膜组织中的表达量较低,而在肺中表达最少。【结论】EDNRA可能在心脏行使功能过程中发挥重要作用。
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关键词
EDNRA基因
cd
S区序列
分析
蛋白结构预测
组织表达规律
山羊
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职称材料
免疫表型分型结合FISH检测自然杀伤细胞淋巴瘤细胞的染色体畸变
4
作者
翁立红
周俊
+1 位作者
张颜明
顾文祥
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
1999年第6期253-256,267,共5页
目的:检测自然杀伤(NK)细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。方法:采用免疫表型分型结合荧光原位杂交(FISH)技术,在单细胞水平检测了3例NK细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。结果:在该3...
目的:检测自然杀伤(NK)细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。方法:采用免疫表型分型结合荧光原位杂交(FISH)技术,在单细胞水平检测了3例NK细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。结果:在该3例中,克隆性的染色体畸变仅见于CD56+ 细胞,在CD3+ 细胞和CD5+ 细胞中未发现相应染色体畸变。结论:实验表明,NK细胞淋巴瘤中,含有染色体畸变的肿瘤细胞局限于CD56+ 、CD3- 和CD5- 的NK细胞群。
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关键词
淋巴瘤
非霍奇金氏/病因学
杀伤细胞
天然
免疫表型分型
染色体畸变
原位杂交
荧光
抗原
cd
56/
分析
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职称材料
题名
口蹄疫病毒3D蛋白在体外的表达纯化及二级结构分析
被引量:
5
1
作者
韩雪清
刘湘涛
林祥梅
尹双辉
尚佑军
刘健
梅林
机构
中国检验检疫科学研究院
中国农业科学院兰州兽医研究所
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2005年第5期6-10,共5页
基金
国家基础研究重大专项(2002BA711A12)
文摘
口蹄疫(FMD)是严重影响全球农业经济的高度传染的毁灭性的疫病.3D蛋白是口蹄疫病毒(FMDV)编码的RNA聚合酶,参与病毒RNA的复制.利用PCR扩增得到了FMDV的3D基因片段,然后将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)上,构建重组表达质粒pETFM3D.转化宿主菌BL21(DE3)后,利用1 mmol/L的IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western boltting分析结果表明,得到了稳定、过量表达的可溶性的3D蛋白质.目的蛋白质经NI亲和层析柱一步纯化就达到95%,再经Q-sepharose柱纯化后达到97%.通过圆二(CD)色谱测定和计算3D蛋白质在不同的pH(2、4、6、8和10)和不同的温度下(25~85℃)的二级结构.上述结果表明,表达的可溶性3D蛋白质具有高表达、易纯化和稳定性好等特点.
关键词
口蹄疫病毒
3D蛋白
表达纯化
cd分析
Keywords
FMD virus
3D protein
expression and purification
circular dichroism analysis
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
食管鳞癌患者血清中可溶性CD44v6和E-钙黏蛋白表达的临床意义
被引量:
4
2
作者
何赢
张军
王书奎
黄文斌
陈兴国
何帮顺
赵有财
王劲松
机构
南京医科大学附属南京医院
南京第一医院
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期305-309,共5页
基金
2008年度南京市医学科技发展基金资助项目(项目编号YKK08095)
文摘
目的:检测食管鳞癌患者血清中可溶性CD44v6(sCD44v6)和可溶性E-钙黏蛋白(sE-cadherin,sE-cad)的表达,探讨这2种可溶性黏附分子表达与食管鳞癌临床病理特征的关系以及这2种可溶性黏附分子在血清中表达的相关性。方法:采集65例食管鳞癌患者、32例糜烂性食管炎患者和35例正常食管者的血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中sCD44v6、sE-cad的表达,并与其临床病理资料对照。结果:血清sCD44v6在食管鳞癌组表达水平明显高于正常食管组及糜烂性食管炎组(P<0.05),正常食管组与糜烂性食管炎组比较无统计学差异(P=0.566);血清sCD44v6水平与食管鳞癌临床病理特征无关。血清sE-cad水平在食管鳞癌组明显高于正常食管组及糜烂性食管炎组(P<0.05),正常食管组与糜烂性食管炎组比较无统计学差异(P=0.708);血清sE-cad水平与食管鳞癌临床病理特征无关。食管鳞癌患者血清中sCD44v6和sE-cad水平无显著相关性(r=-0.057,P=0.651)。结论:血清sCD44v6及sE-cad水平测定有望成为筛查食管鳞癌的血清学指标。
关键词
酶联免疫吸附测定
基因表达
钙黏着糖蛋白类/
分析
食管肿瘤
肿瘤
鳞状细胞
抗原
cd
44/
分析
Keywords
Enzyme-linked immunosorbent assay
Gene expression
Cadherins/analysis
Esophagealneoplasms
Neoplasms, squamous cell
Antigens,
cd
44/analysis
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
山羊EDNRA基因编码区克隆与组织表达规律分析
3
作者
王梦
周靖宣
占思远
王林杰
李利
张红平
仲涛
机构
四川农业大学动物科技学院/畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室
出处
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2019年第6期852-859,共8页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0502002)
国家自然科学基金地区科学基金项目(31860623)
文摘
【目的】旨在探究EDNRA基因在山羊心脏、肝、脾、肺、肾、大脑、网膜脂肪组织中的表达情况。【方法】采用克隆、测序的方法得到山羊EDNRA基因CDS全长的碱基序列,用生物信息学软件进行序列分析、亲水性/疏水性分析、潜在的信号肽位点分析、亚细胞定位分析、蛋白质的二级结构和三级结构预测及系统进化树分析,最后采用实时荧光定量PCR(qPCR)测定EDNRA基因在山羊心脏、肝、脾、肺、肾、大脑、网膜脂肪组织中mRNA的表达量。【结果】成功克隆了EDNRA的CDS序列,得到山羊EDNRA基因包含一个1 284 bp的最长开放阅读框。该序列编码427个氨基酸,含信号肽序列(第1到第20位氨基酸)以及7型跨膜受体同系物结构域。基因编码产物具有疏水性,属分泌蛋白,有35个磷酸化修饰位点。二级结构主要为α-螺旋。系统进化树分析表明,山羊EDNRA基因和绵羊、牛以及野牛的亲缘关系较近。qPCR结果表明,山羊EDNRA基因在心脏中的表达量最高,在肝、脾、肾、大脑、网膜组织中的表达量较低,而在肺中表达最少。【结论】EDNRA可能在心脏行使功能过程中发挥重要作用。
关键词
EDNRA基因
cd
S区序列
分析
蛋白结构预测
组织表达规律
山羊
Keywords
EDNRA gene
cd
S sequence analysis
protein structure prediction
patterns of tissue expression
goat
分类号
S811.5 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
免疫表型分型结合FISH检测自然杀伤细胞淋巴瘤细胞的染色体畸变
4
作者
翁立红
周俊
张颜明
顾文祥
机构
浙江大学医学院
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
1999年第6期253-256,267,共5页
基金
浙江省教委科研基金
文摘
目的:检测自然杀伤(NK)细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。方法:采用免疫表型分型结合荧光原位杂交(FISH)技术,在单细胞水平检测了3例NK细胞淋巴瘤中含有染色体畸变的肿瘤细胞的免疫表型。结果:在该3例中,克隆性的染色体畸变仅见于CD56+ 细胞,在CD3+ 细胞和CD5+ 细胞中未发现相应染色体畸变。结论:实验表明,NK细胞淋巴瘤中,含有染色体畸变的肿瘤细胞局限于CD56+ 、CD3- 和CD5- 的NK细胞群。
关键词
淋巴瘤
非霍奇金氏/病因学
杀伤细胞
天然
免疫表型分型
染色体畸变
原位杂交
荧光
抗原
cd
56/
分析
Keywords
Lymphoma,non Hodgkin's/etiol
Killer cells,natural
Immunophenotyping
Chromosome aberrations
In situ hybridization,fluorescence
Antigens,
cd
56/anal
分类号
R733.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
口蹄疫病毒3D蛋白在体外的表达纯化及二级结构分析
韩雪清
刘湘涛
林祥梅
尹双辉
尚佑军
刘健
梅林
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2005
5
在线阅读
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职称材料
2
食管鳞癌患者血清中可溶性CD44v6和E-钙黏蛋白表达的临床意义
何赢
张军
王书奎
黄文斌
陈兴国
何帮顺
赵有财
王劲松
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
山羊EDNRA基因编码区克隆与组织表达规律分析
王梦
周靖宣
占思远
王林杰
李利
张红平
仲涛
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2019
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
免疫表型分型结合FISH检测自然杀伤细胞淋巴瘤细胞的染色体畸变
翁立红
周俊
张颜明
顾文祥
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
1999
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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