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新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒
被引量:
5
1
作者
黄元媛
黄宗海
+4 位作者
陈建发
汤福祥
杨文宇
郑全
车小燕
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第1期117-120,共4页
目的 应用简化的细菌内同源重组法高效制备含血管内皮细胞生长因子(VEGF)启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒。方法 先以氯化钙法替代电穿孔法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入BJ5183细菌,制备BJ5183pAdEasy-1细菌;再以后者作感受...
目的 应用简化的细菌内同源重组法高效制备含血管内皮细胞生长因子(VEGF)启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒。方法 先以氯化钙法替代电穿孔法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入BJ5183细菌,制备BJ5183pAdEasy-1细菌;再以后者作感受态细菌,与线性化的转移质粒pAdtrack-VEGFP-CDglyTK进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-VEGFP-CDglyTK,转染293细胞,制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒。结果 构建重组腺病毒质粒的成功率为60%(6/10)。转染293细胞后7~12d可收获病毒。结论 简化的细菌内同源重组法简便易行,重组效率较高,易于推广应用。
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关键词
制备
VEGF
启动子
cd/tk融合基因
重组腺病毒
血管内皮细胞生长因子
基因
治疗
肿瘤
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职称材料
题名
新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒
被引量:
5
1
作者
黄元媛
黄宗海
陈建发
汤福祥
杨文宇
郑全
车小燕
机构
第一军医大学珠江医院普通外科
第一军医大学珠江医院中心实验室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第1期117-120,共4页
基金
国家"863"计划生物和现代农业技术研究基金(2001AA217171)
广东省自然科学基金重点项目(013072)~~
文摘
目的 应用简化的细菌内同源重组法高效制备含血管内皮细胞生长因子(VEGF)启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒。方法 先以氯化钙法替代电穿孔法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入BJ5183细菌,制备BJ5183pAdEasy-1细菌;再以后者作感受态细菌,与线性化的转移质粒pAdtrack-VEGFP-CDglyTK进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-VEGFP-CDglyTK,转染293细胞,制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒。结果 构建重组腺病毒质粒的成功率为60%(6/10)。转染293细胞后7~12d可收获病毒。结论 简化的细菌内同源重组法简便易行,重组效率较高,易于推广应用。
关键词
制备
VEGF
启动子
cd/tk融合基因
重组腺病毒
血管内皮细胞生长因子
基因
治疗
肿瘤
Keywords
adenovirus vec tor
vascular endothelial growth factor promoter
gene therapy
neoplasm
分类号
R73-3 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒
黄元媛
黄宗海
陈建发
汤福祥
杨文宇
郑全
车小燕
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004
5
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