海马体C/EBPβ在痛性糖尿病周围神经病变中的作用及机制研究

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作者 段柯杨 张钰 +2 位作者 王敬萱 王雪莹 孙涛 《中国疼痛医学杂志》 北大核心 2025年第4期259-266,共8页

目的:探讨海马体中CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)在小鼠痛性糖尿病周围神经病变(painful diabetic peripheral neuropathy,PDPN)中的作用及机制。方法:使用简单随机抽样方法将小鼠随机分为4组:对照... 目的:探讨海马体中CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)在小鼠痛性糖尿病周围神经病变(painful diabetic peripheral neuropathy,PDPN)中的作用及机制。方法:使用简单随机抽样方法将小鼠随机分为4组:对照组(Control)、模型组(PDPN)、注射阴性对照腺相关病毒组(PDPN+IE-Control)、注射抑制C/EBPβ的腺相关病毒组(PDPN+IE-CEBP/β),每组8只。通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立小鼠PDPN模型,并通过血糖升高及机械性痛觉过敏确认模型的成功建立。利用脑立体定位技术,向PDPN模型小鼠海马体注射携带C/EBPβshRNA的腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),特异性抑制C/EBPβ表达。检测机械性异常疼痛变化,使用免疫印迹检测海马体中C/EBPβ及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,Caspase-1)、胱天蛋白酶激活的细胞焦亡蛋白D(gasdermin-D,GSDMD)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)等蛋白表达水平。利用RT-qPCR检测海马体中炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA水平,以评估炎症反应。结果:注射AAV-shRNA后,海马体中C/EBPβ表达显著降低,机械性异常疼痛明显缓解,NLRP3、NF-κB、Caspase-1、GSDMD和IL-1β的蛋白表达水平下降,IL-6、IL-1β和TNF-α的mRNA水平显著减少,神经炎症减轻。结论:C/EBPβ在PDPN模型海马体中高表达,通过调控炎症信号通路及神经炎症,参与PDPN的发生和维持。 展开更多

关键词 痛性糖尿病周围神经病变 海马体 c/ebpΒ 炎症信号通路 腺相关病毒 神经炎症

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C/EBPα通过结合鸡神经调节蛋白4基因外显子2正调控其表达

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作者 罗昊玉 黄佳新 +3 位作者 高帆 闫晓红 牟芳 王宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1608-1617,共10页

神经调节蛋白4(NRG4)是一个新发现的脂肪细胞因子,它在机体能量平衡、糖脂代谢等许多生理过程中发挥重要调控作用。目前,NRG 4基因的转录调控机制尚不清楚。我们前期的5′RACE分析显示,鸡NRG 4基因转录起始位点(TSS)弥散分布于一段约200... 神经调节蛋白4(NRG4)是一个新发现的脂肪细胞因子,它在机体能量平衡、糖脂代谢等许多生理过程中发挥重要调控作用。目前,NRG 4基因的转录调控机制尚不清楚。我们前期的5′RACE分析显示,鸡NRG 4基因转录起始位点(TSS)弥散分布于一段约200 bp的区域,提示鸡NRG 4基因的启动子为分散型启动子(dispersed promoter)。本研究开展了鸡NRG 4基因近端外显子和内含子的启动子活性分析,报告基因分析显示,包含NRG 4基因外显子1、内含子1和外显子2的基因组片段(-122/+452)具有很强的双向启动子活性。生物信息学分析显示,鸡NRG 4基因外显子2上存在1个转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的潜在结合位点;报告基因分析发现,删除或突变C/EBPα结合位点会导致C/EBPα丧失对NRG 4基因片段(-122/+452)启动子活性的调控作用。基因表达相关性分析显示,鸡脂肪组织中C/EBPα和NRG 4基因的mRNA表达存在显著正相关(P<0.01)。进一步的脂肪组织ChIP-qPCR分析显示,C/EBPα直接结合鸡NRG 4基因的外显子2。本研究发现,鸡NRG 4基因的近端外显子和内含子具有双向启动子活性,C/EBPα通过直接结合外显子2调控鸡脂肪组织NRG 4基因的表达。 展开更多

关键词 神经调节蛋白4 近端外显子和内含子 启动子活性 转录调控 ccaat增强子结合蛋白α(c/ebpα)

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敲低CCAAT/增强子结合蛋白β促进肝癌细胞的增殖和迁移

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作者 陈利荣 刘玉玲 +2 位作者 贾艳梅 梁紫微 李佳佳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期797-806,共10页

近年来已有研究表明,C/EBPβ在肝癌的发生发展中发挥重要的作用,但其具体分子调控机制尚不清楚。本研究通过分析GEO数据库和Kaplan-Meier Plotter数据库发现,C/EBPβmRNA在肝癌中低表达(P<0.05),且其低表达与肝癌患者预后密切相关。... 近年来已有研究表明,C/EBPβ在肝癌的发生发展中发挥重要的作用,但其具体分子调控机制尚不清楚。本研究通过分析GEO数据库和Kaplan-Meier Plotter数据库发现,C/EBPβmRNA在肝癌中低表达(P<0.05),且其低表达与肝癌患者预后密切相关。进一步,通过功能富集分析和TIMER数据库分析显示,C/EBPβ主要参与细胞周期、DNA转录等生物学过程,且C/EBPβ表达水平与CD4^(+)T细胞和巨噬细胞的免疫浸润具有较强的相关性(P<0.05)。为了进一步研究C/EBPβ对肝癌细胞增殖和迁移的影响。在肝癌细胞中瞬时转染C/EBPβsiRNA,将其分为si-NC组和siC/EBPβ组。通过qRT-PCR、Western印迹检测肝癌细胞中C/EBPβ在mRNA和蛋白质水平均显著降低(P<0.05);通过MTT检测、平板克隆形成实验和5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷(Edu)实验证实,敲低C/EBPβ促进肝癌细胞的增殖(P<0.05);Transwell和划痕实验证实,敲低C/EBPβ促进肝癌细胞的迁移;Western印迹法检测敲低C/EBPβ对肝癌细胞内迁移相关蛋白质(E-cadherin、N-cadherin)以及Wnt/β-catenin信号通路蛋白质表达的影响,结果表明,敲低C/EBPβ促进肝癌细胞EMT上皮间质转化,并能激活Wnt/β-catenin信号通路的基因表达(P<0.05)。综上所述,C/EBPβ在肝癌组织中低表达且与患者生存预后成正相关。敲低C/EBPβ可能通过激活Wnt/β-catenin信号通络促进肝癌细胞的增殖、迁移和上皮间质转化,为C/EBPβ在肝癌的发生发展中的作用提供了依据,可能是一个肝癌诊治过程中的潜在靶点。 展开更多

关键词 肝癌 细胞增殖 细胞迁移 ccaat/增强子结合蛋白β

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补阳还五汤提高血管性痴呆大鼠海马CREB、C/EBP的DNA结合活性 被引量：11

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作者 张泓波 高维娟 +2 位作者 钱涛 唐敬龙 李君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1166-1170,共5页

目的观察补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马CREB(cAMP反应元件结合蛋白)、C/EBP(CCAAT/增强子结合蛋白)DNA结合活性的影响。方法实验分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和尼莫地平组。采用改良的4血管法制备血管性痴呆模型,分别给予生理... 目的观察补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马CREB(cAMP反应元件结合蛋白)、C/EBP(CCAAT/增强子结合蛋白)DNA结合活性的影响。方法实验分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和尼莫地平组。采用改良的4血管法制备血管性痴呆模型,分别给予生理盐水、补阳还五汤、尼莫地平灌胃干预,用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)测定各组大鼠CREB和C/EBP的DNA结合活性。结果与假手术组比较,模型组大鼠海马组织CREB的DNA结合活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,尼莫地平组与补阳还五汤组明显升高(P<0.01);尼莫地平组与补阳还五汤组之间差异无显著性(P>0.05)。结论补阳还五汤可提高VD大鼠海马组织CREB、C/EBP与DNA的结合活性。 展开更多

关键词 补阳还五汤 血管性痴呆 海马组织 cAMP反应元件结合蛋白 ccaat/增强子结合蛋白 DNA结合活性

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幽门螺杆菌对CCAAT增强子结合蛋白α和Cx43表达的影响及其在胃癌发生中的作用 被引量：5

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作者 周莉 徐灿霞 +4 位作者 胡婷姿 刘晓明 肖静 罗玲 蒋小霞 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期700-706,共7页

目的:探讨CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα)和间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达改变在H.pylori致胃癌中的作用。方法:扩大培养不同胃黏膜上皮细胞株(GES-1细胞、AGS细胞、SGC-7901细胞);胃镜下采集... 目的:探讨CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα)和间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达改变在H.pylori致胃癌中的作用。方法:扩大培养不同胃黏膜上皮细胞株(GES-1细胞、AGS细胞、SGC-7901细胞);胃镜下采集H.pylori感染慢性非萎缩性胃炎患者6例、胃癌前病变和胃癌患者各12例胃黏膜组织;采用realtime PCR法检测上述细胞和组织中C/EBPα和Cx43 mRNA的表达;同时将东亚型Cag A+H.pylori与GES-1细胞共培养24和48 h为实验组,以不加H.pylori的GES-1细胞株为对照组,培养24和48 h;采用real-time PCR法和Western印迹检测C/EBPα和Cx43 m RNA和蛋白的表达。结果:C/EBPα和Cx43 m RNA在AGS细胞、SGC-7901细胞中的表达均显著低于GES-1细胞(均P<0.05),且两者在SGC-7901细胞中的表达量较AGS细胞更低(均P<0.05);C/EBPα和Cx43 m RNA在胃癌胃黏膜组织中的表达明显低于慢性非萎缩性胃炎(均P<0.05)和胃癌前病变(均P<0.05),C/EBPα与Cx43表达呈正相关(胃癌前病变:r=0.679;胃癌:r=0.792,均P<0.05);实验组24,48 h的C/EBPα和CX43表达量在转录及蛋白水平均低于对照组(均P<0.05),且48 h表达量均低于24 h(均P<0.05)。结论:H.pylori感染可下调胃黏膜上皮细胞C/EBPα和CX43的表达,这可能与胃癌发生有关。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 ccaat增强子结合蛋白n 间隙连接蛋白43 胃癌

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初治急性髓系白血病患者CEBPA基因突变检测及其临床意义 被引量：1

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作者 胡瑞萍 崔久嵬 +7 位作者 李薇 张福明 韩薇 杜忠华 韩秀丽 刘晓玲 李红兵 续薇 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期389-394,共6页

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者CCAAT/增强子结合蛋白-α(CEBPA)基因突变的情况,阐明其临床意义。方法:无菌采集279例AML患者和40名对照者骨髓或外周血样本,瑞士染色分析细胞形态学及骨髓幼稚细胞(BM Blast)比例;采用PCR联合序列分... 目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者CCAAT/增强子结合蛋白-α(CEBPA)基因突变的情况,阐明其临床意义。方法:无菌采集279例AML患者和40名对照者骨髓或外周血样本,瑞士染色分析细胞形态学及骨髓幼稚细胞(BM Blast)比例;采用PCR联合序列分析法检测CEBPA、FLT3-ITD、NPM1和C-KIT基因突变情况;G显带技术进行染色体核型分析。结果:279例初治AML患者中35例检测到CEBPA基因突变,总检出率为12.5%,其在M2型患者中的检出率显著高于其他亚型(P<0.05)。35例突变患者中31例为双突变,其余4例为单突变,对照者CEBPA突变均为阴性。CEBPA基因突变常见于正常核型患者。与CEBPA野生型患者比较,CEBPA双突变患者的白细胞(WBC)计数、红细胞(RBC)计数及血红蛋白(HGB)水平升高(P<0.05),年龄、血小板(PLT)计数降低(P<0.05),而性别、BM blast比例及FLT3-ITD、NPM1、C-KIT基因突变发生率组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。在治疗方面,CEBPA双突变型与野生型患者首疗程诱导缓解率分别为84.0%和80.5%(P>0.05)。结论:CEBPA基因突变主要见于M2亚型的AML患者,常见突变形式为双等位基因突变,CEBPA双突变型与野生型患者有不同临床特征,表现为WBC、RBC计数和HGB水平较高,年龄和PLT计数较低。 展开更多

关键词 白血病 急性髓系 ccaat 增强子结合蛋白-α 基因突变 序列分析

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CCAAT/增强子结合蛋白α抑制人肝癌细胞内的肝刺激因子表达 被引量：1

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作者 吴媛 董凌月 安威 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期634-639,共6页

目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)对人肝癌细胞内肝刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)表达的影响及其在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)抑制HSS表达过程中的作用。方法... 目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)对人肝癌细胞内肝刺激因子(hepatic stimulator substance,HSS)表达的影响及其在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)抑制HSS表达过程中的作用。方法采用凝胶迁移电泳实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)研究C/EBPα与HSS启动子的体外相互作用,real-time PCR和Western blotting的方法测定hHSS mRNA和蛋白质表达情况。结果 EMSA实验证实C/EBPα可以与hHSS启动子-343/-330区域内的C/EBPα结合位点结合,对hHSS表达具有负性调节作用,C/EBPαsiRNA转染入HepG2细胞后,hHSS mRNA和蛋白质表达均升高。但C/EBPα表达下降并不影响EGF对hHSS表达,而EGF不改变C/EBPα的活性和表达。结论 C/EBPα可通过C/EBP位点抑制hHSS的表达,但不参与EGF对hHSS的转录调节过程。 展开更多

关键词 肝刺激因子 表皮生长因子 ccaat/增强子结合蛋白α

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C/EBPα参与小鼠胰岛β细胞囊泡谷氨酰胺转运子2基因表达的调控

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作者 吴柱国 刘世明 陈心春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期142-145,共4页

目的:探讨转录调节因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在小鼠胰岛β细胞株MIN6的囊泡谷氨酰胺转运子2(VGLUT2)基因表达过程中的调控作用。方法:克隆小鼠VLGUT2基因的启动子区,并对其中C/EBPα的结合位点进行了核酸定点突变,以荧光素酶... 目的:探讨转录调节因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在小鼠胰岛β细胞株MIN6的囊泡谷氨酰胺转运子2(VGLUT2)基因表达过程中的调控作用。方法:克隆小鼠VLGUT2基因的启动子区,并对其中C/EBPα的结合位点进行了核酸定点突变,以荧光素酶活力方法观察突变后的启动子活性改变情况。通过电泳迁移率实验(EMSA)检测C/EBPα与含有小鼠VGLUT2启动子区核酸序列的核苷核探针的结合能力,以CEBPαsiRNA特异性抑制转录调控因子C/EBPα的基因表达,通过荧光素酶,RT-PCR和Western blotting方法观察抑制C/EBPα基因表达后小鼠VGLUT2的基因表达情况。结果:在对小鼠VGLUT2启动子区C/EBPα结合位点进行核酸定点突变后,小鼠VGLUT2启动子活性下降约50%,EMSA实验表明C/EBPα可与小鼠VGLUT2启动子区结合,当以C/EBPαsiRNA特异性地下调C/EBPα的表达时,小鼠VGLUT2的启动子活性、mRNA和蛋白水平也相应各自下降约60%、40%及45%。结论:C/EBPα参与了小鼠VGLUT2的基因表达调控。 展开更多

关键词 小鼠β细胞 启动子 基因表达调控 ccaat增强子结合蛋白α 囊泡谷氨酰胺转运子2

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内质网应激相关因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用 被引量：2

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作者 黄啸元 赵冬 +5 位作者 刘祺 许晖 戴晶 代林志 徐伟华 王业忠 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期2911-2916,2921,共7页

目的探讨内质网应激相关因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达及其在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中的作用。方法选取健康雄性SD大鼠78只,采用随机数字表法将其分为空白对照组(6只)、假手术组(36只)与SAH组(36只)。... 目的探讨内质网应激相关因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达及其在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中的作用。方法选取健康雄性SD大鼠78只,采用随机数字表法将其分为空白对照组(6只)、假手术组(36只)与SAH组(36只)。将假手术组和SAH组分别于1、6、12、24、48、72 h,采用简单随机抽样法选取6只大鼠处死。比较各组不同时间点光镜及电镜下大鼠海马神经元形态改变、CHOP相对表达水平、海马神经元凋亡细胞水平及神经行为学评分。结果 3组大鼠6、12、24、48 h时CHOP相对表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中SAH组大鼠6、12、24、48 h时CHOP相对表达水平均高于空白对照组和假手术组(P<0.05)。空白对照组和假手术组大鼠不同时间点CHOP相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组与假手术组仅有极少数海马神经元凋亡细胞;SAH组1 h海马神经元未见明显凋亡改变;SAH组6、12 h海马神经元凋亡细胞较前增多,部分散在的海马神经元凋亡细胞的细胞核呈棕褐色;SAH组24 h海马神经元凋亡细胞明显增多;SAH组48 h海马神经元凋亡细胞逐渐减少,72 h可见少量海马神经元凋亡细胞。3组大鼠6、12、24、48 h时海马神经元凋亡细胞水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中SAH组大鼠6、12、24、48 h时海马神经元凋亡细胞水平均高于空白对照组和假手术组(P<0.01)。空白对照组和假手术组大鼠不同时间点海马神经元凋亡细胞水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组、假手术组及SAH组大鼠实验前神经行为学评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组大鼠6、12、24、48 h时神经行为学评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中SAH组大鼠6、12、24、48 h时神经行为学评分均低于空白对照组和假手术组(P<0.01)。空白对照组和假手术组大鼠不同时间点神经行为学评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。SAH组CHOP相对表达水平与海马神经元凋亡细胞水平呈正相关(r=0.933,P<0.01)。结论 SAH后早期CHOP表达增高,海马神经元凋亡细胞增多,神经行为学评分降低,提示CHOP在SAH后内质网应激诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多

关键词 蛛网膜下腔出血 脑损伤 内质网应激 ccaat增强子结合蛋白类 血管痉挛 颅内 细胞凋亡

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大鼠IL-6基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及其与C/EBP β结合位点的鉴定 被引量：1

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作者 庞蓉蓉 李妍 +5 位作者 张婧 单锴 邱文 何风霞 赵聃 王迎伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期722-727,共6页

目的 :构建大鼠IL-6基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒并予鉴定,观察人胚肾细胞(HEK293)中过表达CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)对该质粒基因启动子活性的影响。同时,筛选C/EBPβ与IL-6基因... 目的 :构建大鼠IL-6基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒并予鉴定,观察人胚肾细胞(HEK293)中过表达CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)对该质粒基因启动子活性的影响。同时,筛选C/EBPβ与IL-6基因启动子区的结合位点。方法:采用PCR技术,扩增出大鼠IL-6基因启动子全长序列(-1 791～+30 nt),将IL-6基因启动子插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中。将IL-6基因启动子全长荧光素酶报告质粒(pGL3-IL-6-1)和大鼠野生型C/EBPβ表达质粒(pIRES2-EGFP-C/EBPβ)共转染HEK293细胞,检测其荧光素酶活性,确定C/EBPβ对IL-6基因的启动作用。另用生物信息学软件预测IL-6基因启动子上C/EBPβ潜在的结合位点,并构建IL-6基因启动子截短的荧光素酶报告质粒(即pGL3-IL-6-2～5)。将上述IL-6基因启动子全长和各截短的荧光素酶报告质粒和C/EBPβ过表达质粒共转染HEK293细胞,再行荧光素酶活性测定,筛选出C/EBPβ的结合位点。结果:菌液PCR及核酸测序证实,上述荧光素酶报告质粒均构建成功。将pGL3-IL-6-1和pIRES2-EGFP-C/EBPβ共转染HEK293细胞发现,IL-6基因启动子活性显著增加。另将pGL3-IL-6-1、pGL3-IL-6-2～5和pIRES2-EGFP-C/EBPβ共转染HEK293细胞后发现,pGL3-IL-6-5的启动活性显著低于其他组。提示C/EBPβ可能结合在IL-6基因启动子的-618 bp～-126 bp区域。结论:成功构建了大鼠IL-6基因启动子全长及截短荧光素酶报告质粒,并初步筛查出了C/EBPβ在IL-6基因启动子上的结合部位。 展开更多

关键词 IL-6 ccaat 增强子结合蛋白β(c ebpβ) 荧光素酶报告质粒 启动子活性

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CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白与钙联蛋白在内侧颞叶癫痫模型小鼠海马中的表达 被引量：1

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作者 沙志强 沙龙泽 许琪 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期265-270,共6页

目的观察CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙联蛋白(CNX)在内侧颞叶癫痫小鼠海马区域中表达的时间和空间分布。方法采用海人酸(KA)诱导内侧颞叶癫痫小鼠模型,免疫印迹和免疫荧光技术检测CHOP和CNX在急性期(12、24 h)小鼠海马CA3区... 目的观察CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙联蛋白(CNX)在内侧颞叶癫痫小鼠海马区域中表达的时间和空间分布。方法采用海人酸(KA)诱导内侧颞叶癫痫小鼠模型,免疫印迹和免疫荧光技术检测CHOP和CNX在急性期(12、24 h)小鼠海马CA3区的表达量及分布差异,并与注射PBS的正常小鼠进行对照。结果免疫印迹检测结果显示,KA注射后12 h小鼠海马中的CHOP(F=1.136,P=0.4069)和CNX表达量(F=2.378,P=0.2087)与对照组差异没有统计学意义,KA注射后24 h注射侧海马中的CHOP(F=8.510,P=0.0362)和CNX表达量(F=6.968,P=0.0497)明显高于对照组。免疫荧光结果显示,KA注射后12 h CHOP的表达主要集中于CA3区,注射后24 h在CA1和CA3区表达水平均升高;KA注射后24 h CHOP蛋白(F=24.480,P=0.0057)和CNX蛋白(F=7.149,P=0.0478)的表达量显著高于对照组。结论伴随着癫痫发作的产生,CHOP蛋白表达量上升,提示神经元内质网应激水平不断增加,可能需要更多CNX作为分子伴侣帮助更多未折叠蛋白完成折叠过程。 展开更多

关键词 内侧颞叶癫痫 内质网应激 ccaat/增强子结合蛋白同源蛋白 钙联蛋白

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转录因子C/EBPβ在子宫蜕膜化中的作用及机制研究进展 被引量：1

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作者 狄芳芳 刘建胜 +1 位作者 李尚 杜艳芝 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第6期865-869,共5页

CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)是CCAAT增强子结合蛋白家族的重要成员。C/EBPβ蛋白可通过其羧基端bZIP结构域调控下游靶基因的转录活性,进而参与细胞的增殖、分化等生命活动。近期研究显示,C/EBPβ在子宫内膜基质细胞的蜕膜化过程中... CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)是CCAAT增强子结合蛋白家族的重要成员。C/EBPβ蛋白可通过其羧基端bZIP结构域调控下游靶基因的转录活性,进而参与细胞的增殖、分化等生命活动。近期研究显示,C/EBPβ在子宫内膜基质细胞的蜕膜化过程中具有重要的调控作用。该文就近年来C/EBPβ在子宫内膜基质细胞蜕膜化中的作用及机制进行综述,旨在为临床蜕膜化障碍研究提供新的视角。 展开更多

关键词 ccaat增强子结合蛋白β 子宫内膜基质细胞 蜕膜化 增殖 分化 细胞周期

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CCAAT增强子结合蛋白α与急性髓细胞白血病的发生 被引量：3

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作者 史庭 叶琇锦 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期552-557,共6页

CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在髓系造血过程中起着重要的调控作用,其基因表达失调是急性髓细胞白血病(AML)发生的重要机制。C/EBPα基因表达失控的结局是p30过表达和p42不完全丧失,两者均促使AML的发生。因此,恢复C/EBPα表达比例,... CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在髓系造血过程中起着重要的调控作用,其基因表达失调是急性髓细胞白血病(AML)发生的重要机制。C/EBPα基因表达失控的结局是p30过表达和p42不完全丧失,两者均促使AML的发生。因此,恢复C/EBPα表达比例,过表达p42或阻断p30致癌通路是治疗此类原因所致AML的重要途径。本文回顾了近年来关于C/EBPα表达失调及其两种蛋白体在AML发病机制中的研究进展。 展开更多

关键词 ccaat增强子结合蛋白α 白血病 髓样 急性 基因表达 突变 综述

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C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达

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作者 蔡蓉 戴冰冰 +2 位作者 梅文瀚 李珂 卢健 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期562-564,571,共4页

目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G41... 目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。 展开更多

关键词 c/ebpε U937细胞 PI3K Γ基因 磷脂酰肌醇-3激酶 增强子结合蛋白 Western PcDNA3 真核表达载体 RT-PcR 核内转录因子 过量表达 电穿孔转染 细胞克隆 稳定转染 blot 转染细胞 转录调控 水平

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转化生长因子β1对肾小管上皮细胞C/EBPα及相关核转录因子表达的影响

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作者 杜云蕾 刘剑 +3 位作者 应霁 戴芹 徐丽梨 王伟铭 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1243-1247,共5页

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),利用T... 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),利用TGF-β1分别在不同质量浓度(5和10 ng/m L)和不同时间点(0、4、12、24 h)刺激HK-2细胞,收集细胞总RNA和蛋白(核蛋白和总蛋白)以及细胞上清液。应用realtime PCR法和Western blotting检测C/EBPα和核转录因子PPARγ以及上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白α-SMA、E-cadherin的表达变化;ELISA方法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平。结果 TGF-β1(5 ng/m L)刺激HK-2细胞24 h后C/EBPα蛋白与PPARγ变化一致,差异均无统计学意义(P>0.05);E-cadherin表达减少。TGF-β1(10 ng/m L)分别刺激0、4、12、24 h后,核蛋白中C/EBPα在12 h时表达明显降低,PPARγ在4 h表达升高。以TGF-β1 10 ng/m L刺激HK-2细胞12 h后,C/EBPα、PPARγ、E-cadherin mRNA分别降低70%、50%和90%(P<0.05)。以10 ng/m L TGF-β1刺激HK-2细胞后,MCP-1在12、24 h时分别升高6倍和10.67倍。结论 C/EBPα参与TGFβ1诱导的肾间质纤维化过程,并且与间质纤维化过程中的炎症反应和EMT过程相关;且在此过程中,与PPARγ相互作用,促进或抑制肾间质纤维化。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 ccaat增强子结合蛋白α 单核细胞趋化蛋白1 过氧化物酶增殖物激活受体Γ

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在APAP、TAA诱导的肝细胞药物性损伤中C/EBPβ对FXR的调控机制

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作者 洪炜龙 彭旭云 +3 位作者 杨帆 李攀龙 梁伟铖 叶志强 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期332-340,共9页

目的:通过生物信息学分析寻找对乙酰氨基酚(APAP)诱导药物性肝损伤(DILI)过程中的关键基因,并研究在APAP、硫代乙酰胺(TAA)介导的小鼠肝细胞药物性损伤中,CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)对法尼醇X受体(FXR)的调控机制。方法:采用生信... 目的:通过生物信息学分析寻找对乙酰氨基酚(APAP)诱导药物性肝损伤(DILI)过程中的关键基因,并研究在APAP、硫代乙酰胺(TAA)介导的小鼠肝细胞药物性损伤中,CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)对法尼醇X受体(FXR)的调控机制。方法:采用生信分析筛选APAP诱导的DILI模型中的关键基因;通过RT-qPCR、Western blot法检测不同浓度的TAA(0、13、33 mmol/L)、APAP(0、2、5μmol/L)对小鼠肝细胞AML12中C/EBPβ及FXR的mRNA及蛋白水平表达的影响。针对C/EBPβ基因设计两条不同的shRNA,并分别克隆至pLKO载体,用于构建C/EBPβ稳定敲低的AML12细胞系;通过流式细胞术分析TAA、APAP对AML12细胞凋亡的影响。结果:(1)FXR是APAP所致DILI模型中的关键性基因;(2)TAA和APAP导致AML12小鼠肝细胞损伤中FXR的mRNA及蛋白表达水平均显著降低;(3)TAA和APAP导致AML12小鼠肝细胞损伤中C/EBPβ蛋白表达水平显著降低;(4)C/EBPβ稳定敲低的AML12细胞系中FXR的mRNA水平显著下调。(5)奥贝胆酸(OCA)可以抑制凋亡基因聚ADP-核糖聚合酶(PARP)的表达。结论:在TAA及APAP诱导的肝细胞损伤中,C/EBPβ可能是调控FXR的关键基因。 展开更多

关键词 药物性肝损伤 法尼醇X受体 对乙酰氨基酚 硫代乙酰胺 ccaat/增强子结合蛋白β

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结肠癌病灶内C/EBPα、FOXC2表达量的研究及其下游靶基因的初步分析

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作者 蔡冰 宫惠琳 《海南医学院学报》 CAS 2017年第21期2990-2993,共4页

目的:研究结肠癌病灶内C/EBPα、FOXC2的表达量并探究其下游靶基因。方法:选择2014年3月~2017年2月期间在陕西省渭南市中心医院手术切除的结肠癌标本,另取距肿瘤病灶边缘5cm以上的癌旁组织标本作为对照。抽提临床标本中的RNA并测定C/EB... 目的:研究结肠癌病灶内C/EBPα、FOXC2的表达量并探究其下游靶基因。方法:选择2014年3月~2017年2月期间在陕西省渭南市中心医院手术切除的结肠癌标本,另取距肿瘤病灶边缘5cm以上的癌旁组织标本作为对照。抽提临床标本中的RNA并测定C/EBPα、FOXC2以及内质网应激分子、上皮间质转化分子的mRNA表达量。结果:结肠癌标本中C/EBPα、Bax、Bak、GRP78、PERK、ATF6的mRNA表达量显著低于癌旁标本,FOXC2、FAK、SphK1、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达量显著高于癌旁标本;C/EBPα高表达的结肠癌标本中Bax、Bak、GRP78、PERK、ATF6的mRNA表达量显著高于C/EBPα低表达的结肠癌标本;FOXC2高表达的结肠癌标本中FAK、SphK1、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达量显著高于FOXC2低表达的结肠癌标本。结论:结肠癌病灶内低表达的C/EBPα和高表达的FOXC2分别能够抑制内质网应激所介导的细胞凋亡、促进上皮间质转化所介导的细胞侵袭。 展开更多

关键词 结肠癌 ccaat/增强子结合蛋白-α 叉头框蛋白c2 内质网应激 上皮间质转化

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C/EBPβ在氧化低密度脂蛋白诱导的白介素1β成熟过程中的作用

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作者 马骏 余三九 +2 位作者 康华丽 邓梦杨 黄岚 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期429-433,共5页

目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的小鼠巨噬细胞白介素1β(IL-1β)成熟过程中的作用。方法分别用0、25、50、100μg/ml ox-LDL对小鼠巨噬细胞株RAW264.7处理12、24、48h,以不同时间点的0μg/ml ... 目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的小鼠巨噬细胞白介素1β(IL-1β)成熟过程中的作用。方法分别用0、25、50、100μg/ml ox-LDL对小鼠巨噬细胞株RAW264.7处理12、24、48h,以不同时间点的0μg/ml ox-LDL为对照组,筛选出50μg/ml ox-LDL处理24h进行后续实验。定量PCR观察C/EBPβ基因表达变化,Western blotting检测C/EBPβ、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1)、IL-1β前体及成熟体表达的变化。采用小干扰RNA敲减C/EBPβ及caspase-1,采用ELISA法检测IL-1β分泌的变化,Western blottin检测相关蛋白表达的变化。结果 Ox-LDL呈时间剂量依赖性增加C/EBPβ的表达。其中50μg/ml ox-LDL处理24h后,C/EBPβ蛋白表达开始明显上调,平均上调幅度为57%(P<0.01)。同时ox-LDL可明显增加caspase-1、IL-1β前体、IL-1β成熟体的表达(P<0.05)。敲减C/EBPβ能抑制ox-LDL诱导的caspase-1、IL-1β前体、IL-1β成熟体的表达及IL-1β的分泌,平均抑制幅度分别为34%、36%、54%及53%(P<0.05);而敲减caspase-1仅可抑制IL-1β成熟体的表达及IL-1β的分泌(P<0.05)。结论C/EBPβ是ox-LDL诱导巨噬细胞产生IL-1β的关键性蛋白,并通过调控caspase-1促进IL-1β前体成熟。 展开更多

关键词 ccaat/增强子结合蛋白β 动脉粥样硬化 白细胞介素1Β 氧化低密度脂蛋白

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内质网应激通路相关分子GRP78及CHOP在糖尿病脑病小鼠海马表达的变化 被引量：28

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作者 闫颖 赵咏梅 +2 位作者 赵志炜 王玉兰 李森 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第1期90-94,共5页

目的本研究通过观察内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER Stress)通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein78,GRP78)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)... 目的本研究通过观察内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER Stress)通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein78,GRP78)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)在糖尿病脑病小鼠海马CA1区表达的变化,探讨ER Stress在糖尿病脑病发生发展中的作用。方法 60只雄性昆明小鼠随机分为正常组(n=25)和糖尿病(diabetes mellitus,DM)组(n=35)。小鼠禁食12h后,按200mg/kg腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ),3d后尾部非禁食血糖>15mmol/L者为DM模型复制成功。分别在STZ注射后1、4、8周应用免疫组织化学染色方法观察正常组与DM组小鼠海马CA1区GRP78及CHOP阳性细胞形态和数量的变化,并应用图像分析软件计数GRP78及CHOP阳性细胞。结果 ①GRP78免疫组织化学染色结果显示,注射STZ后1、4、8周DM组小鼠海马CA1区GRP78阳性细胞形态和数量与正常组相似。②CHOP免疫组织化学染色结果显示,注射STZ后1、4、8周正常组小鼠海马CA1区CHOP阳性细胞数量较少,染色浅;DM组小鼠海马CA1区CHOP阳性细胞数量较多,染色深。③注射STZ后1、4、8周,DM组小鼠海马CA1区GRP78阳性细胞数量(12.00±3.60,10.50±3.11,13.75±3.01)与正常组(10.33±2.34,8.88±1.89,7.00±3.20)相比差异无统计学意义(P=0.29,P=0.23,P=0.06);注射STZ后1、4、8周,DM组小鼠海马CA1区CHOP阳性细胞数量(45.12±10.27,32.88±6.58,20.19±3.54)比正常组(19.19±6.80,15.44±5.35,13.94±5.00)明显增加,经统计学分析差异均有统计学意义(P分别为0.000,0.000和0.009)。结论 ER Stress相关分子CHOP在DM小鼠海马CA1区表达比正常小鼠增加,说明糖尿病脑病小鼠海马组织内发生了ER Stress。ER Stress可能在糖尿病脑病神经元变性中发挥重要作用。 展开更多

关键词 内质网应激 糖尿病脑病 葡萄糖调节蛋白78 ccaat/增强子结合蛋白同源蛋白 海马

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肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化 被引量：12

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作者 杜锡潮 韩冰 +2 位作者 谢汝佳 邹河 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期906-912,共7页

目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4... 目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4周组、正常8周组、肝纤维化4周组和肝纤维化8周组,肝纤维化组大鼠皮下注射40%CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周和8周处死大鼠,观察肝组织病理改变,Western blotting检测肝脏活化转录因子6(ATF6)蛋白,免疫组化、Western blotting和real-time PCR分别检测肝脏CHOP和TRB3蛋白和mRNA表达变化,TUNEL法检测肝脏细胞凋亡。结果:肝纤维化组大鼠肝脏可见假小叶形成,p90ATF6蛋白表达量较正常组明显减少(P<0.01),p50ATF6蛋白表达量较正常组明显增加(P<0.01),肝细胞胞浆CHOP和TRB3蛋白及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01),细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01)。结论:内质网应激相关分子CHOP和TRB3在CCl4致大鼠肝纤维化过程中蛋白及mRNA表达水平明显增加,其变化趋势与大鼠肝细胞凋亡率一致,提示内质网应激可能通过CHOP和TRB3促进肝细胞凋亡,参与肝纤维化发生发展。 展开更多

关键词 大鼠 肝纤维化 内质网应激 细胞凋亡 ccaat/增强子结合蛋白同源蛋白 Tribbles同源蛋白3

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