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沉默CC型趋化因子受体5对人乳腺癌细胞黏附及迁移的影响
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作者 林森森 王从品 +3 位作者 万淑颍 孙立 袁胜涛 张陆勇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期362-367,共6页
构建CC型趋化因子受体5(CCR5)基因shRNA的真核表达载体,探讨沉默CCR5对乳腺癌细胞黏附与迁移能力的影响。在多种人乳腺癌细胞中检测CCR5的基因表达,选择CCR5表达较高的MDA-MB-231细胞做为基因沉默的研究对象;设计并合成2对靶向人CCR5基... 构建CC型趋化因子受体5(CCR5)基因shRNA的真核表达载体,探讨沉默CCR5对乳腺癌细胞黏附与迁移能力的影响。在多种人乳腺癌细胞中检测CCR5的基因表达,选择CCR5表达较高的MDA-MB-231细胞做为基因沉默的研究对象;设计并合成2对靶向人CCR5基因的RNA沉默序列,连入基因沉默载体pSilencer 2.1-U6中,构建沉默质粒shCCR5-1和shCCR5-2,定量PCR和蛋白印迹法检测CCR5基因沉默的效率;以细胞黏附实验和Transwell趋化小室实验分别检测沉默CCR5对MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力的影响。结果表明,沉默CCR5可以抑制MDA-MB-231细胞的黏附能力,同时显著降低MDA-MB-231细胞的迁移和趋化。 展开更多
关键词 cc型趋化因子受体5 ccR5 基因沉默载体pSilencer 2 1-U6 乳腺癌 黏附与迁移
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养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞CXCR3和CCR5表达的影响 被引量:4
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作者 李点 王超群 +2 位作者 廖亮英 胡平 彭银艳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第1期8-11,共4页
目的研究养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞CXC型趋化因子受体3(CXC chemokine receptor 3,CXCR3)、CC型趋化因子受体5(CC chemokine receptor 5,CCR5)表达的影响。方法采用随机数字表法将60只SD雄性大鼠分为5组,每组12只,分别为正... 目的研究养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞CXC型趋化因子受体3(CXC chemokine receptor 3,CXCR3)、CC型趋化因子受体5(CC chemokine receptor 5,CCR5)表达的影响。方法采用随机数字表法将60只SD雄性大鼠分为5组,每组12只,分别为正常组、假手术组、养阴润目丸组、新泪然组、模型组,除正常组与假手术组外均采用去势法制造干眼模型。造模成功后用药3个月,分别进行泪液分泌试验及泪膜破裂时间的检测,取大鼠结膜上皮组织,采用免疫组织化学法检测CXCR3、CCR5的表达。结果用药3个月后,养阴润目丸组、新泪然组泪液分泌量分别为(9.60±1.04)mm和(9.00±1.37)mm,均明显高于模型组的(6.40±0.84)mm(均为P<0.01);两组泪膜破裂时间分别为(9.61±0.82)s和(9.12±0.69)s,均明显长于模型组的(6.21±0.72)s(均为P<0.01)。养阴润目丸组、新泪然组结膜上皮细胞中CXCR3的表达分别为11.40±1.75和12.71±2.46,均明显少于模型组的29.39±2.48(均为P<0.05);两组结膜上皮细胞中的CCR5表达分别为26.33±4.17和28.15±4.52,均明显少于模型组的38.78±6.60(均为P<0.05)。结论养阴润目丸治疗能增加泪液分泌量,延长泪膜破裂时间,下调结膜上皮细胞中CXCR3、CCR5的表达。提示干眼的发病机制与炎症密切相关,养阴润目丸对干眼有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 养阴润目丸 干眼模 结膜上皮细胞 CXC趋化因子受体 cc型趋化因子受体
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叶酸联合维生素B12对高同型半胱氨酸血症引起大鼠动脉粥样硬化的治疗作用 被引量:1
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作者 徐吉光 李宇宁 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期943-947,I0005,共6页
目的:探讨叶酸联合维生素B12对高同型半胱氨酸血症引起大鼠动脉粥样硬化的治疗作用,并阐明其治疗机制。方法:将33只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组11只,对照组大鼠给予普通饲料,模型组大鼠给予普通饲料和蛋氨酸,治疗组大鼠给... 目的:探讨叶酸联合维生素B12对高同型半胱氨酸血症引起大鼠动脉粥样硬化的治疗作用,并阐明其治疗机制。方法:将33只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组11只,对照组大鼠给予普通饲料,模型组大鼠给予普通饲料和蛋氨酸,治疗组大鼠给予普通饲料和蛋氨酸同时灌胃给予叶酸和维生素B12。HE染色观察大鼠胸主动脉的病理组织形态表现,ELISA法检测大鼠血清同型半脱氨酸(Hcy)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,免疫组织化学染色检测大鼠胸主动脉平滑肌细胞中CC趋化因子受体5(CCR5)和CC趋化因子配体5(CCL5)蛋白表达水平,RT-PCR法检测胸主动脉平滑肌细胞中CCR5和CCL5mRNA表达水平。结果:HE染色,对照组大鼠胸主动脉中膜平滑肌细胞排列整齐,内弹力膜完整,内皮细胞连续;模型组大鼠胸主动脉中膜平滑肌细胞紊乱疏松,内膜损伤,内膜下有泡沫细胞形成,内皮细胞坏死脱落;治疗组大鼠胸主动脉病理组织形态表现介于对照组和模型组之间。模型组和治疗组大鼠血清Hcy水平高于对照组(P<0.05),治疗组大鼠血清Hcy水平低于模型组(P<0.05);模型组和治疗组大鼠血清MMP-9水平高于对照组(P<0.05),治疗组大鼠血清MMP-9水平低于模型组(P<0.05);模型组和治疗组大鼠胸主动脉平滑肌细胞中CCR5和CCL5蛋白灰度值低于对照组(P<0.05),治疗组大鼠胸主动脉平滑肌细胞中CCR5和CCL5蛋白表达水平高于模型组(P<0.05);模型组和治疗组大鼠胸主动脉平滑肌细胞中CCR5和CCL5mRNA相对表达水平高于对照组(P<0.05),治疗组大鼠胸主动脉平滑肌细胞中CCR5和CCL5 mRNA相对表达水平低于模型组(P<0.05)。结论:叶酸联合维生素B12治疗可以降低血清Hcy和MMP-9水平和胸主动脉平滑肌细胞中CCR5及CCL5表达水平,这可能是叶酸联合维生素B12治疗动脉粥样硬化机制之一。 展开更多
关键词 叶酸 维生素B12 动脉粥样硬化 基质金属蛋白酶9 cc型趋化因子受体5 cc趋化性细胞因子5
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稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定 被引量:1
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作者 程林 吴喜林 +1 位作者 袁钟平 吴稚伟 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期804-808,共5页
CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细... CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细胞克隆,用流式细胞术检测细胞表面CCR5蛋白,发现克隆10能够高表达人CCR5基因.使用RT-PCR鉴定克隆10CCR5基因转录情况,结果在预期的位置检测出目的条带.采用细胞ELISA的方法进一步鉴定克隆10细胞表面CCR5的表达,结果该克隆的405nm光密度值是对照组的13.6倍.结果表明,本研究建立的稳定转染人CCR5的CHO细胞系能够高效表达CCR5基因,为研究HIV-1共受体、筛选病毒中和抗体、以及抗病毒药物奠定了基础. 展开更多
关键词 cc型趋化因子受体5 稳定转染 细胞酶联免疫吸附实验 人类免疫缺陷病毒
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